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100只SPF鸡均分为5组，A、B、c3组免疫后攻毒，接种3批次自制的IBD基因工程重组亚单位油乳剂疫苗；D组不免疫不攻毒，E组不免疫而攻毒。免疫后第22天，感染IBDV强毒株BC-6／85。攻毒后第4天，将所有存活的鸡只以颈脱臼致死，收集法氏囊，以3种方法和指标（法氏囊眼观病变；法氏囊显微病变；法氏囊中IBDV抗原检测）进行分析，以评定免疫保护率。结果显示，以这3种方法和指标评定，A组免疫保护率为90％，B、C组免疫保护率均为95％；试验鸡A3、A14、B7、C16、E1～E20，法氏囊眼观病变明显，法氏囊显微病理损伤评分为3～5分，琼脂免疫扩散试验检测法氏囊中IBDV抗原均为阳性；其他试验鸡，法氏囊眼观无明显异常，法氏囊显微病理损伤评分在3分以下，琼脂免疫扩散试验检测法氏囊中IBDV抗原均为阴性。结果表明，这3种方法和指标在IBD疫苗免疫保护试验评定中具有很好的一致性。 相似文献
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以RT-PCR扩增新城疫病毒Mukteswar株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶Kpn I和Xba I对目的基因片段及质粒pCAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化E. coli DH5α.以PCR方法确定Mukteswar F1和Mukteswax F2的阳性重组子均为4个.对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1 198 bp、269 bp,与新城疫病毒Mukteswar株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致.结果表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2,研究Mukteswar株与基因Ⅶ型毒株之间F蛋白的抗原性差异程度打下基础. 相似文献
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以大肠杆菌表达的传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2致敏绵羊红细胞,建立间接血凝试验(IHA).对参考阳性血清(鸡新城疫病毒抗血清、鸡传染性支气管炎病毒抗血清、鸡禽痘病毒抗血清)及鸡参考阴性血清等分别进行微量IHA,加上抑制试验,结果证实其特异性高.对商品肉用仔鸡的30个血清样品、IBDV重组亚单位疫苗免疫试验鸡的20个血清样品,分别进行微量IHA和琼脂免疫扩散试验(AGID),将肉用仔鸡血清的阳性检出率进行t检验(P＜0.05);而20份免疫试验鸡血清样品IHA阳性检出率与AGID阳性检出率均为100%.对30份肉用仔鸡血清样品和20份免疫试验鸡血清样品检测得到的阳性血清的平均滴度进行方差分析,IHA的平均滴度与AGID的平均滴度之间均具有显著性差异.对20份免疫试验鸡血清及IBDV参考阳性血清以3个批次和第2批次IHA试验制剂,分别进行重复性试验,对其IHA平均滴度进行了方差分析,均无显著性差异.对20份免疫试验鸡血清以在4℃、保存期分别为3、6、9个月的IHA的试验制剂进行了微量IHA,检出的IBDV抗体平均滴度中,3个月的与6个月的无显著差异;3个月的与9个月的及6个月的与9个月的,均有显著差异,结果表明该IHA试验制剂在4℃的保存期可达6个月. 相似文献
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传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫持续时间的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以三批次传染性法氏囊病（IBD）重组亚单位疫苗分别免疫SPF雏鸡和产蛋鸡,以琼脂免疫扩散试验检测鸡血清抗体或卵黄抗体,以其阳性率达到80%为免疫期确定依据。试验结果表明,IBD重组亚单位疫苗对青年鸡及产蛋鸡接种一次的免疫期为15～16周。 相似文献
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传染性法氏囊病基因工程疫苗研究进展 总被引：3，自引：0，他引：3
综述了导致近年来传染性法氏囊病(IBD)疫苗免疫发生重大变化的主要原因,即:传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株的出现和IBDV分子生物学研究和分子克隆技术与手段的长足进步.介绍了目前IBD基因工程疫苗的4种主要类型:活病毒疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗、可食用转基因植物疫苗. 相似文献
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将重组质粒pET28 a-VP2转化禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40,探讨该转化菌表达的VP2是否具有免疫原性,以及重组表达质粒在转化菌内的稳定性。该转化菌在体外经IPTG或乳糖诱导,表达产物经AGP检测,VP2滴度可达1/4;经间接ELISA检测,VP2滴度可达1/512;经SDS-PAGE分析,出现VP2蛋白条带。结果表明,诱导表达的提取液中有一定量可溶性VP2。将pET28 a-VP2转化的禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40经诱导后,接种爱维茵肉仔鸡,21日龄及35日龄时,分别肌肉注射菌液0.1、0.2 m l/只(3×108个/m l活菌)。49日龄时,感染IBDV标准强毒株BC6/85。IBDVVP2血清抗体检测结果,不接种组(B)、0.1 m l接种组(C)、0.2 m l接种组(D)及空质粒转化菌接种组(E)的AGP抗体检测阳性率分别为0、65%、70%、0;间接ELISA抗体检测阳性率分别为0、80%、85%、0;IBDV强毒感染的免疫保护率分别为5%、75%、75%、5%。经t检验,B组与C组、B组与D组、E组与C组、E组与D组,P<0.05,差异均显著,但B组与E组、C组与D组,P>0.05,差异均不显著。免疫试验结果表明,诱导表达产物VP2可有效地刺激鸡体产生体液免疫应答,刺激鸡体建立的免疫力可以抵抗一定剂量强毒的攻击。在质粒稳定性测定中,第9代次及以后的3个代次,20个菌落的VP2目的基因PCR检测结果均为阴性,表明该质粒在禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40内是不稳定的。 相似文献
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根据中兽医辨证施治的原则，按中兽医组方的原理，组成了运饮灵Ⅰ号、Ⅱ号药方，进行预防肉鸡腹水症试验，初步取得良好开端，现报道如下。１试验药物１． １运饮灵 Ⅰ号主要由猪苓、 茯苓、白术、黄芪、当归、厚朴、积实、木香及甘草等多种药物组成，用量各３０～８０ ｇ。经粉碎过筛（粉碎度应在４０目以上）分装备用。１．２运饮灵Ⅱ号主要由猪苓、茯苓、苍术、党参、苦参、连翘、木通、防风及甘草等多种药物组成。用量各５０～１００ ｇ。经粉碎过筛，分装备用。２试验动物 试验鸡由荆州市华龙集团星火种鸡场提供１日龄艾维茵雏鸡２００… 相似文献
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为寻找一种新的理化性质与人体内环境比较接近的尿酸酶，对10种鱼肝组织尿酸酶活性进行了测定，并对其最佳提取pH进行了比较。结果显示：10种鱼肝组织在pH6．8～11．1范围内均可测到尿酸酶活性．其酶活性范围为0．064～0．644U；在pH6．8、7．5、8．4和pH11．1条件下鲢（Hypophthalmichthys molitrix）、翘嘴红鲐（Erythroculter ilishaeformis）、鳜（Siniperca chuatsi）、团头鲂（Megalobrama amblycephala）、黄颡鱼（Pseudobagrus fulvidraco）、鲶（Silurus asotus）、银鲫（Carssius auratus gibelio）、鲤（Cyprinus carpio）、鳙（Aristichthys nobilis）、草鱼（Ctenopharyngodon idellus）肝组织中尿酸酶平均酶活力分别为0．405、0．356、0．306、0．287、0．278、0．204、0．168、0．128、0．123、0．094U。在pH7．5缓冲液抽提条件下，活性较高的是翘嘴红鲐（0．402U）、团头鲂（0．301U）、黄颡鱼（0．297U）。以肉食性鱼类或以动物性食物为主食的鱼类肝组织尿酸酶活性较高，以植物性食物为主食的鱼类肝组织尿酸酶活性较低。翘嘴红鲐、团头鲂和黄颡鱼尿酸酶的理化性质比较适合人体内环境；与猪比较（猪肝组织平均酶活力0．206U），鱼肝组织中的尿酸酶催化尿酸氧化反应的酸碱稳定pH范围较大，特别是在pH7．5条件下仍具有明显活性。该结果可为今后筛选临床应用的尿酸酶参考。 相似文献