黏虫溶菌酶基因Mswly的克隆与真核表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张元臣  蔡新  张国强  董丽丽  王景顺 《河南农业科学》2019,48(5)

为了研究溶菌酶在害虫抵抗虫生真菌中的作用及分子机制,以黏虫为试验材料,利用RT-PCR和RACE技术获得黏虫溶菌酶基因Mswly的全长序列,同时采用体外真核表达系统对Mswly基因进行蛋白质表达。克隆、测序后分析表明,Mswly基因的cDNA全长为652 bp(GenBank登录号为MG692501),开放阅读框序列长度为426 bp,编码141个氨基酸。其编码蛋白质分子质量为16.26 ku,理论等电点为6.57;含有信号肽,剪切位点在第20个和21个氨基酸之间;含有溶菌酶活性所需要的谷氨酸和天冬氨酸活性位点。系统进化树分析表明,Mswly与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起,说明Mswly为C型溶菌酶。Western blotting结果显示,Mswly重组蛋白大小约17 ku,与预期分子质量大小一致,说明Mswly基因在昆虫Sf9细胞系能够高效表达。综上,从黏虫脂肪体中克隆得到了1个C型溶菌酶基因Mswly的完整cDNA序列,并将其在草地贪夜蛾细胞系Sf9中进行了高效表达。  相似文献   

一种三回路式淡水循环养殖系统的构建及应用     

潘国英  文畅  黄薇薇  姚雪梅  董丽丽  周梅阳  杨飞 《热带生物学报》2024,(1):122-132

为满足人们对优质鱼类蛋白日益增长的需求和环保要求,在海南琼海构建了三回路式高密度循环水养殖系统,以微滤机反冲洗水作为反硝化碳源,建立了水循环处理、鱼粪污泥厌氧消化对鱼类生长和污染物控制的运行方式。在121 d的吉富罗非鱼(Oreochromis mossambicus)养殖实验中,养殖密度达到107.7kg·m^-3,存活率100%,饲料转化率(FCR)1.74;鱼缸中总氨氮(TAN)、亚硝酸盐氮(NO₂^--N)和硝酸盐氮(NO₃^--N)的平均浓度分别为0.95、0.15和43.01 mg·L^-1。每日外排水量为系统总水量的2.66%、养殖水量的6.67%;试验期间,厌氧消化单元内仅有少量污泥残留而无外排。微生物群落分析表明,共21个菌属参与了氮代谢,包括红细菌属(Rhodobacte)、黄杆菌属(Flavobacterium)和固氮螺旋菌属(Azospira)等。结果表明,该循环水养殖系统为罗非鱼等淡水鱼类养殖提供了一种潜在的生态可持续循环养殖模式。  相似文献   

论语音识别技术视域下的翻译现状     

董丽丽 《广东蚕业》2018,(2)

当前随着计算机技术和自动化技术的发展,语音识别技术作为人工智能领域内的关键技术越来越收到人们的普遍关注,其在翻译领域内的成功运用极大地提升了翻译工作的效率和质量,有效的推动了各民族文化的融合,并为人类文明的发展带来了技术性变革。文章在前人研究的基础上系统的回顾了语音识别技术视角下翻译技术研究的发展历程,重点分析了当前语音翻译技术的发展现状和主要问题,并对其发展前景进行了展望。  相似文献   

肺炎链球菌耐药相关基因的表达及其蛋白的纯化和功能分析     

柏晓辉  董丽丽  胡晓倩  刘孝莲  孙春巧  吴锦菲 《农业生物技术学报》2018,(8)

由于抗生素的大量使用和滥用,肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)出现了耐药性,甚至是多重耐药性,因此开发新的抗生素和疫苗迫在眉睫。为深入了解肺炎链球菌的耐药机制,从而为开发新的抗生素和疫苗提供依据,本研究从肺炎链球菌TIGR4菌株中克隆1个耐药相关基因SP_0010(Gen Bank登录号:A0A0H2UMY6-1)至表达载体p ET28a(+)中,并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)菌株,实现基因SP_0010的异源表达。通过蛋白电泳结果显示,该重组蛋白Sp_0010的最佳诱导温度为16?C;镍柱纯化条件为20 mmol/L咪唑除杂蛋白,250 mmol/L咪唑洗脱重组蛋白。亲和层析后的重组蛋白Sp_0010在溶液状态为单体,且纯度较高;而肽聚糖结合实验揭示重组蛋白Sp_0010能结合肽聚糖,且与去磷壁酸的肽聚糖结合能力更强。该研究揭示了蛋白Sp_0010与肺炎链球菌肽聚糖代谢相关,为后续阐明其在肺炎链球菌耐药机制的作用提供了数据支持。  相似文献   

龙凤山灌区水稻生育期降水量多时间尺度分析     

徐淑琴  王云鹤  杨旭  董丽丽 《东北农业大学学报》2012,(11):98-102

龙凤山灌区是国家的重要粮食生产基地和商品粮基地,灌区内82%以上的作物是水稻,所以降水量对作物的生长至关重要。采用Morlet小波分析方法对龙凤山灌区(1953-2010年)水稻生育期的降水量进行多尺度分析,分析存在的主要震荡周期、突变点和发展趋势,为灌区的用水及分配提供依据。结果表明,龙凤山灌区降水量存在6、14和24年的主周期,水稻生育期降水量以长周期的上升趋势变化为主,经历了4次丰枯交替变换,从大尺度来看,2012年将处于降水偏少期。  相似文献   

切花菊‘神马’细胞分裂素合成酶基因DgIPT3参与侧枝发育的功能分析     

于静  董丽丽  郗琳  赵瑞艳  马男  赵梁军 《园艺学报》2012,39(4):721-728

 利用RACE方法,从菊花（Chrysanthemum morifolium）‘神马’中分离得到细胞分裂素合成异戊烯基转移酶基因的全长cDNA序列,命名为DgIPT3,基因登录号为JQ711176。序列分析结果表明,DgIPT3的cDNA全长为1 171 bp,开放阅读框ORF编码331个氨基酸,具有IPT家族典型的ATP/GTP结合位点MGATGTGKS。系统进化分析显示,DgIPT3与毛果杨（Populus trichocarpa）的PtXP02321061亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,DgIPT3在菊花根、茎、叶中均有表达,其表达量为叶 > 茎 > 根。瞬时转化拟南芥（Arabidopsis thaliana）原生质体表明DgIPT3蛋白定位于细胞质中。过表达DgIPT3异源转化野生型拟南芥,莲座侧枝明显增多,表明DgIPT3可能是参与菊花侧枝形成的关键基因。  相似文献   

我国农村生活垃圾现状及处理对策     

董丽丽  于玲 《现代农业科技》2013,(16):223+226

生活垃圾问题伴随着农村经济的高速发展已变得日益突出,在很长一段时期内农村生活垃圾问题没有得到有效管理和处置,农村生活垃圾污染已成为影响农民生活生产、农村城镇化建设和可持续发展的重要因素,必须引起高度的重视。该文介绍农村生活垃圾的排放现状、农村生活垃圾的危害,并据此提出了解决我国农村生活垃圾污染问题的对策。  相似文献   

“创新”和“卓越”视域下的生物技术专业应用型人才培养探索     

胡晓倩  董丽丽  毕淑峰  吕顺清  许竟成 《安徽农业科学》2018,(18):231-233

以"创新"和"卓越"为指导,充分考虑地方高校的"地方性应用型"以及生物行业的多样性和实践工程能力,从"突出专业特色、突出实践创新、行业企业深度参与培养、强化学生工科和创新能力、培养质量监控保障体系"等方面阐述了生物技术专业应用型人才培养的改革措施,旨在促进突出"创新能力、工科素养和应用型"的生物技术人才的培养。  相似文献   

论机械设计制造及其自动化的特点与发展趋势     

董丽丽  丁晶晶  王磊 《广西农业机械化》2019,(6)

机械设计制造及其自动化技术的应用给工业生产制造提供了保障,但是随着我国工业领域的发展和经济水平的提高,传统的机械设计制造已经满足不了现在工业生产的要求。本文就机械设计制造及其自动化的特点和优势进行了阐述,并且不断研究高新技术以适应未来经济建设的需要。  相似文献   

浅谈西方汉学家对中国典籍翻译     

董丽丽 《广东蚕业》2018,(1)

西方汉学家在外译与传统中华传统文化方面发挥着不可磨灭的作用,有效的推动了中华传统文化与外国文化的融合,对着全世界文化市场的持续繁荣发挥着巨大的作用,但是他们的实际工作也面临着文化和语言差异问题。文章基于现实的角度对西方汉学家对中国典籍的翻译现状进行了系统的研究,针对翻译工作中体现出的种种问题探究了合理的解决措施,希望对中西方文化的进一步融合起到一定的指导性作用。  相似文献