real-time PCR将成为分子生物学研究的重要检测技术     

朱芷葳  赫晓燕  姜俊兵  范瑞文  董常生 《畜牧兽医科技信息》2006,(3):25-26

近年来,real-tim e PCR技术作为一种敏感、快速、简便、重复性好的检测技术已广泛出现在生物学研究领域。real-tim e polym erase chain reaction(RT-PCR)是Kary M ullis在二十世纪八十年代在PCR的基础上发展革新的一项新技术,它能使小量DN A片段扩增一百万倍。这项技术推动了分子生物学技术的发展,简便的操作不仅可应用于普通实验,还可用于人类基因组工程。根据2003年调查的406位科学工作者,48%的研究人员近年来正在使用这项技术。随着使用这项技术的人数增多,各类相关的论文也相继增多。real-tim e PCR将会影响PCR技术的发展,并…  相似文献   

PRRSV与PCV2体外共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫学功能的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

冯志新  姜平  王先炜  李玉峰 《中国预防兽医学报》2007,29(12):950-955

制备猪肺泡巨噬细胞,分别接种PCV2、PRRSV、PCV2 PRRSV(先接种PCV2,12h后接种PRRSV)、PRRSV PCV2(先接种PRRSV,12h后接种PCV2)、PRRSV/PCV2(同时接种)和对照组。接种后不同时间观察细胞病变(CPE),并用real-time PCR和IFA方法检测PRRSV和PCV2滴度,INF-α、INF-γ、TNF-α、IL-8和IL-10的mRNA。结果为:①PRRSV能在PAM中增殖,有CPE;PCV2在PAM中感染率较低,无CPE。②PRRSV对PCV2增殖无明显影响。PCV2先于或同时与PRRSV感染对PRRSV的复制具有抑制作用,而PCV2后于PPRSV感染,可促进PRRSV增殖。③PCV2单独感染PAM后能促进INF-α、INF-γ、IL-8和IL-10的大量表达,对TNF-α的表达量影响不大。④PCV2与PRRSV混合感染,尤其是PCV2后于PRRSV感染后,TNF-α、IL-8和IL-10的表达量与单感染组相比明显增加,而INF-γ的表达量明显受到抑制。实验结果表明,PCV2感染时间对PRRSV的增殖影响不同,PRRSV感染后如果再感染PCV2,可以明显促进PRRSV病毒增殖;两种病毒共同刺激了TNF-α、IL-8和IL-10的大量表达,抑制了抗病毒因子INF-γ的表达,从而可能抑制体液免疫和细胞免疫,加重了病理学免疫应答。  相似文献   

生态营养饲料的合理配制     

董建民  卢杨林 《湖南畜牧兽医》2006,(2):37-38

生态营养饲料就是利用生态营养学理论和方法,围绕畜禽产品无公害和减轻畜禽对环境污染等问题,从原料的选购、配方设计、加工饲喂等过程进行严格质量控制,并实施动物营养调控,从而控制可能发生的畜禽产品公害和环境污染,使饲料达到低成本、高效益、低污染的效果。随着养殖业的发展,畜禽养殖场和养殖规模不断增加和扩大,畜禽生产的排泄物以及由畜禽饲料带来的有毒有害残留,对生态环境和人类健康构成了极大的威胁,严重影响了养殖业的发展。为了更好地保护生态环境和人类健康,实现畜禽生产的经济效益、社会效益和生态效益最优化,应用生态营养学…  相似文献   

兽用生物制品的运输、贮存与使用     

张振兴  李玉峰  蒋文明 《经济动物学报》2006,10(2):63-65

对兽用生物制品的命名作了概述,并对免疫预防用制品、诊断用制品、治疗用制品的运输、贮存与使用分别进行了阐述,同时对改善我国兽用生物制品的监管提出了建议。  相似文献   

谈谈冬季哺乳仔猪的管理     

付健康  麻山河  董凤华  崔春生  崔伟 《河南畜牧兽医(综合版)》2006,27(1):20-20

冬季气温较低,由于仔猪的生理机能不健全,稍有疏忽,就会造成仔猪死亡。因此,笔者结合生产实践,谈谈冬季哺乳仔猪的饲养管理。1创造适宜的生存环境1.1整修猪舍。冬季来临前,应对猪舍进行全面检查,对坏、危、漏房及时修缮,塞上风洞,补好裂缝,以防贼风入侵。门口挂草帘或棉帘,增强保暖效果。1.2要保证适宜的仔猪舍温度。初生仔猪为35℃,1～3日龄为32℃～30℃;4～7日龄为30℃～28℃,15～30日龄为25℃～22℃,2～3月龄为20℃。防寒保暖可采用:一是塑料棚增温法。①槽型棚:以走廊式猪舍为例,从猪舍前缘连接运动场部分开始,沿墙顶加设拱形塑料棚,根…  相似文献   

国家应重视兽医和狠抓养殖业的生物安全   总被引：1，自引：0，他引：1  

张振兴  李玉峰 《畜牧与兽医》2006,38(5):51-53

从动物疫病的形式诸如流行特点的变化,养殖模式对疫病流行的影响,病原体型与病型、新疾病、混合感染、人兽共患病的增多以及兽药生产流通使用的混乱等方面论述我国养殖业生物安全的现状,以及生态环境、药残超限等和动物产品的安全情况。同时,对养殖业生物安全应采取的对策提出建议,诸如重新认识兽医的重要性,改革现行的兽医行政体制,改革养殖业的生产经营模式,以及正视动物产品的安全性等方面。  相似文献   

猪瘟病毒的分离鉴定及其E2基因序列分析     

李玉峰  姜平  董信田  蒋文明 《畜牧与兽医》2006,38(12):14-16

2004~2005年上海和江苏3家猪场发生仔猪急性死亡,用ELISA鉴别试剂盒证明为猪瘟感染。用PK15细胞分离病毒,传代至第3代无细胞病变,RT-PCR扩增E2基因为阳性,扩增片段经纯化后克隆入T载体并进行序列测定。通过DNAStar软件对3株病毒的基因序列进行了比较,同时构建了系统进化树,结果表明,三株病毒分离株均扩增出269bp片段并且核苷酸序列100%同源,这3株与Alfort、Shimen株、兔化弱毒株(HCLV)和Brescia4个标准毒株核苷酸序列同源性均在90%以上,说明在江苏、上海地区分离得到的3株猪瘟病毒与流行毒株在基因序列上没有发生大的变异。  相似文献   

甘草种子带菌检测及药剂消毒处理效果   总被引：4，自引：2，他引：4  

杨力钢  黄中乔  刘鹏飞  王建华  董学会  孙宝启  孙群 《植物保护》2006,32(5):84-87

采用PDA平板检测法分别对来自内蒙古、新疆、宁夏和甘肃等10个地区的甘草种子进行带菌检测。结果表明,甘草种子表面携带的优势菌群主要是曲霉属、青霉属和根霉属,其中来自于内蒙古鄂托克前旗和新疆阿勒泰甘草种子镰刀菌的分离频率达到11.1%和1.9%;种子内部寄藏真菌主要是曲霉属、青霉属、根霉属和交链孢属。来自于内蒙古鄂尔多斯杭锦旗和翁都特旗两个地区的甘草种子镰刀菌的带菌率分别达到5.6%和14.2%,其他来源的种子都未检测到镰刀菌属真菌。同时检测了来自于10个不同地区硬实种子的带菌情况,结果显示只有3个地区的硬实种子带菌,带菌率是0～2.5%。福美双、口恶霉灵、甲霜灵、苯醚甲环唑、百菌清和嘧菌酯几种药剂对甘草种子带菌消毒处理具有良好效果,种衣剂咯菌腈抑菌效果显著。  相似文献   

重组GP5AB蛋白间接ELISA检测PRRSV抗体方法的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

顾小雪  姜平  韩研妍  李玉峰 《畜牧与兽医》2007,39(2):1-5

利用GST-GP5AB重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。抗原最适包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为0.15%BSA,37℃封闭2 h后,再4℃封闭24 h,血清最适稀释度为1∶200,其作用时间为60m in,酶标抗体最适稀释度为1∶20 000,最适作用时间为90 m in,37℃显色10 m in,S/P≥0.284为阳性,S/P≤0.26为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原与猪其他4种临床症状类似的疾病的阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果,变异系数均小于7%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用本方法初步检测了一些疫苗免疫仔猪血清样品,并与重组N蛋白和PRRSV抗原同时进行比较,结果显示3种抗原检测的结果基本一致。  相似文献   

Agouti在不同颜色被毛羊驼皮肤组织中的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜俊兵  赵志军  贺俊平  谢建山  董常生 《畜牧与兽医》2007,39(4):38-41

哺乳动物毛色是一个多基因控制的性状,Agouti是研究哺乳动物毛色发生的一个主要的候选基因。为研究Agouti基因在羊驼毛色发生过程中是否表达及其作用机理如何,本研究分别采用半定量RT-PCR技术和免疫组化技术对白色和棕色被毛成年羊驼皮肤组织进行研究。半定量RT-PCR显示,Agouti基因在白毛羊驼皮肤组织中高量表达,而在棕色毛羊驼皮肤组织中表达量较低;免疫组织化学显示,棕色被毛羊驼皮肤组织毛囊外结缔组织中有少量的Agouti阳性着色,白色羊驼毛囊内根鞘有大量的Agouti阳性着色,且形成了集中的Agouti特异性阳性着色圈。研究结果说明:Agouti基因在不同被毛羊驼皮肤组织中均有表达,在白色被毛羊驼真皮毛乳头表达的Agouti基因可能与白色被毛发生相关。  相似文献