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小鼠IL-6、iNOS TaqMan荧光定量PCR 检测方法的建立及应用 总被引:3,自引:1,他引:2
为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后IL-6、iNOS基因的表达水平,从分子水平深入研究EMCV的致病机制,分别针对小鼠IL-6、iNOS及管家基因β-actin 的基因序列设计特异性引物和探针,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-6、iNOS和β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法。该方法线性关系好,IL-6、iNOS和β-actin标准曲线的相关系数均达到0.998;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×101拷贝/μL;特异性强,只有以总RNA反转录成的cDNA为模板,并加入特异性引物和探针的反应才检测到荧光信号;重复性好,组内与组间的变异系数均小于2%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株感染小鼠的脑、心脏中IL-6、iNOS mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,本研究建立的TaqMan real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于小鼠IL-6、iNOS基因的检测及定量分析。 相似文献
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随着人们生活水平的不断提高,养猪业也得到了快速发展,广西的养猪业由农村散养逐渐向集约化转变,规模化养猪不断增多,生产规模逐渐增大.由于种猪、生猪及其产品频繁流通,忽视防疫工作,特别是广大个体养猪专业户,普遍存在忽视疫病防治工作.另外,广大农村仍以散养为主,各方面的条件较差,给动物疫病防治增加了难度.再有,我区疫病的防控基础还比较薄弱,防疫、检疫和疫病监测手段还不够健全和完善,这些因素造成了猪的疫病发生和传播.笔者结合近年来的从事动物疫病诊断和防治工作,分析了当前广西猪传染病的发生现状和特点,并提出相应的防治对策. 相似文献
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广西部分种猪场猪瘟抗体监测和免疫效果分析 总被引:1,自引:1,他引:0
猪瘟是威胁养猪业最严重的疫病之一 ,是养猪业重点防制的传染病。多年来 ,猪瘟的免疫预防一直是我区动物防疫的重点 ,我区猪瘟的暴发基本上得到控制。但是由于某些原因 ,猪瘟免疫效果不够理想 ,免疫猪群仍有猪瘟零星发生 ,特别是免疫种猪的隐性感染带毒现象 ,仍威胁着养猪业。为摸清我区种猪场猪瘟免疫效果 ,1999~ 2 0 0 0年的 2年间 ,我们对我区部分种猪场进行了猪瘟抗体监测 ,现报告如下。1 材料和方法1 1 血清样品来自全区 2 8个种猪场猪瘟免疫期内的猪血清共 10 65份。其中种母猪、后备母猪、种公猪、断奶仔猪血清份数分别为482、 2 … 相似文献
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牛奶是很多家庭日常生活中的必需营养品,对于这样一种特殊的食品,国家从奶源、加工、包装、储运等各个环节已经制定严格的质量要求.如<生鲜牛乳收购标准>GB/T 6914-86、<巴氏杀菌乳>GB5408.1-1999和<灭菌乳>GB5408.2-1999、<生鲜牛乳质量管理规范>NY/T 1172-2006、<奶牛配合饲料质量标准>、<无公害食品-生鲜牛乳>、<农产品质量安全法>等标准和法规保障乳品消费的安全,但为什么还出现三鹿问题奶粉重大食品安全事件?除了质疑奶制品市场混乱和企业缺乏起码道德责任心以外,政府部门监管机制存在漏洞,监管工作不力的责任是不可推卸的! 相似文献
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牛附红细胞体病是附红细胞体寄生在牛红细胞表面、血浆和骨髓而引起的一种血液原虫病 ,该病可引起牛发热、贫血、黄疸、消化和呼吸障碍。我区某一牛场饲养 35头牛 ,于 2 0 0 2年7月初先后有 8头发病 ,死亡 2头。病牛表现精神沉郁 ,体温升高 ,稽留不退 ,眼结膜、口唇、肛门等处黏膜出现不同程度苍白、黄染。曾怀疑为牛出败 ,而用青、链霉素治疗 ,但治疗效果不明显。经临床症状、剖检变化和实验室检验等综合诊断 ,确诊为牛附红细胞体病。现报告如下。1 临床症状病畜消瘦 ,呼吸加速 ,四肢无力 ,喜卧 ,食欲不振 ,瘤胃蠕动音弱 ,腹泻或排干硬粪… 相似文献