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根据编码牛种布鲁氏菌外膜蛋白(OMP-2)基因的核苷酸序列设计1对PCR引物,并对PCR扩增条件进行优化,建立了快速检测布鲁氏菌病病原的PCR方法。特异性检测表明,该引物对牛种、羊种、猪种布鲁氏菌制备的模板DNA均能扩增出193bp目的基因片段,但不能扩增大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠结肠炎耶氏菌(0:9型)的目的基因片段;敏感性检测显示,乳样的检测灵敏度达50cfu/mL、纯化的布鲁氏菌DNA检测灵敏度达1.5pg,可重复性和稳定性十分理想。可见,该布鲁氏菌病病原PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,能为快速诊断布鲁氏菌病提供技术支撑。 相似文献
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为了解广西食蟹猴饲养场鞭虫病的感染情况,并比较饱和蔗糖漂浮离心法和水洗沉淀集卵法对虫卵检出率的影响,笔者采集广西3个饲养场食蟹猴新鲜粪便样品共计457份,采用饱和蔗糖漂浮离心法和水洗沉淀集卵法,取样涂于载玻片上,制片后于显微镜下测量观察。结果:饱和蔗糖漂浮离心法检出鞭虫阳性数分别为10/62、2/80、9/315,阳性率分别为16.13%、2.50%、2.86%,平均为4.60%;水洗沉淀集卵法检出鞭虫阳性数分别为6/62、1/80、4/315,阳性率分别为9.68%、1.25%、1.27%,平均为2.41%。饱和蔗糖漂浮离心法显著提高了鞭虫检出率,并且有镜检视野杂质少,虫卵密集,节约时间等优点,适用于食蟹猴鞭虫病诊断、流行病学调查等检测项目。 相似文献
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对广西地区56株仔猪致病性大肠杆菌进行菌毛基因的多重PCR检测及质粒DNA指纹图谱分析。多重PCR检测结果证实该方法可用于各大肠杆菌野生菌株的检测,且适用于仔猪大肠杆菌性腹泻病的快速诊断和流行病学调查。质粒DNA指纹图谱分析发现这56个菌株质粒的获得率为100%,来源相同的菌株具有相同或相似的质粒图谱,来源不同的菌株的质粒图谱一般不同。所有菌株都含有1条大小相同的质粒带,表明广西流行的猪大肠杆菌性腹泻病主要是由携带相同质粒的大肠杆菌引起。试验结果表明,质粒DNA指纹图谱法可作为大肠埃希氏菌分型的分子生物学方法。 相似文献
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参考GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)基因的全序列,利用反向PCR技术设计一对特异引物,用PCR方法扩增从本室分离的猪圆环病毒2型GX-FSH株全基因,另设一对引物扩增编码ORF2完整基因,将它们分别连接到pMD 18-T载体,筛选获得重组阳性质粒并对其测序分析。结果表明,所克隆的GX-FSH株全基因序列与Gen-Bank上已发表的部分PCV2毒株全基因序列同源性在94.6%~99.4%之间;相应ORF2开放阅读框的核苷酸同源性在90.0%~99.1%之间,氨基酸序列同源性为90.1%~98.7%;利用生物学软件对ORF2蛋白质结构特征分析,结果提示其成熟蛋白二级结构为β类结构。 相似文献
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母鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 总被引:2,自引:0,他引:2
母鹅大肠杆菌病俗称“蛋子瘟”,是产蛋母鹅的一种常见传染病。本病引起母鹅死亡,产蛋率下降和病原垂直传播,给养鹅业带来较大的经济损失。为了有效地控制本病的流行,我们从发病鹅场采集病料作病原分离鉴定及药敏试验,现将试验结果报告如下。1诊断和药敏材料1.1病料来源采自4个种鹅场发病母鹅新鲜病料(输卵管、卵巢等)。1.2培养基普通肉汤、普通琼脂、血斜面等培养基按常规方法配制:麦康凯、伊红美兰培养基为上海市医学化验所试剂厂生产;三糖铁培养基为上海生物制品研究所生产。1.3生化试剂购自杭州天和微生物试剂有限公… 相似文献
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