食蟹猴耳部成纤维细胞体外培养体系的初步建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

许丹娜  许惠艳  凌泽继  卢晟盛  谢莉萍  卢克焕 《安徽农业大学学报》2009,36(3)

建立食蟹猴耳部成纤维细胞的体外培养体系,为食蟹猴体细胞核移植、转基因技术及治疗性克隆做准备.通过组织块培养法进行原代培养,成功分离了食蟹猴耳部成纤维细胞;原代培养后用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液消化细胞,用含10%FBS的DMEM对细胞进行培养,细胞在体外传至第25代;用含10%FBS和10%DMSO的DMEM为冷冻液对细胞进行冷冻保存,解冻传代后,细胞形态和生长速度没有明显变化;用细胞技术法绘制细胞的生长曲线显示,符合体外细胞生长规律;用吉姆萨染色法对不同代数细胞的染色体倍性进行分析,二倍体细胞所占比例为80%以上.  相似文献   

合浦珠母贝Pf-Cnot2基因的克隆与表达分布     

王雨亭  徐广锐  梁健  谢军  谢莉萍  张荣庆 《上海海洋大学学报》2014,23(5):649-655

采用RACE技术从合浦珠母贝外套膜组织中克隆得到了CCR4-NOT复合体第二亚基(Cnot2)基因,命名为PfCnot2。该基因全长2 616 bp,开放阅读框为1 725 bp,编码574个氨基酸,理论分子量为61 ku,理论等电点为6.25。蛋白序列分析表明它富含丝氨酸、甘氨酸和苏氨酸,具有保守的NOT2_3_5结构域。系统进化分析显示Pf-Cnot2蛋白与脊椎动物的Cnot2蛋白进化关系较远。Pf-Cnot2在合浦珠母贝的外套膜边缘、外套膜缘膜、足、生殖腺、内脏团、闭壳肌和鳃等组织中均有表达,在生殖腺中表达量最高。该基因从担轮幼虫期至幼贝期均有表达,担轮幼虫期表达量最少,D型期比担轮幼虫期有显著增高。上述研究结果为进一步了解Pf-Cnot2在合浦珠母贝中发挥的作用提供了基础数据。  相似文献   

脊椎动物源细胞因子对合浦珠母贝外套膜细胞培养及其矿化功能的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

孔玮  李世国  谢莉萍  张荣庆 《水产学报》2015,39(11):1613-1621

筛选出能促进合浦珠母贝外套膜细胞培养及矿化功能的细胞因子,以作为优化本物种细胞培养基的参考,挑选三龄合浦珠母贝,获取其外套膜进行原代细胞培养。向各实验组细胞培养基中分别添加表皮生长因子(EGF)、内皮细胞生长添加剂(ECGS)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过比较细胞活性、贴壁能力、迁移能力和4种基质蛋白基因(pif80、n16、msi7及accbp)表达水平的变化,来评判这些因子对细胞培养及细胞矿化功能的影响。结果显示:(1)EGF能显著提高原代培养细胞的活性、贴壁能力和迁移能力,并促进pif80、n16和accbp基因的表达;(2)ECGS能增强细胞的贴壁能力和迁移能力,并大幅提高pif80、n16和msi7基因的表达水平;(3)IGF-1能显著增强细胞活性、贴壁能力、迁移能力和msi7的基因表达水平,但对pif80、n16和accbp基因的表达有一定抑制作用;(4)碱性成纤维细胞生长因子能增强细胞的活性及贴壁能力,并显著提升pif80、n16和accbp基因的表达水平。研究表明,脊椎动物源细胞因子具有延长细胞培养时间、增强细胞活性及促进矿化相关基因表达的作用,能够用于优化合浦珠母贝外套膜细胞的培养基。  相似文献   

栉孔扇贝几丁质酶基因的克隆及功能鉴定     

王俊  高静  谢军  郑向南  谢莉萍  张荣庆 《水产学报》2017,41(2):189-197

为研究栉孔扇贝贝壳形成机理,首先应用质谱分析的方法,研究了几丁质酶在栉孔扇贝贝壳的蛋白质组中所占的比例。进一步利用RACE技术克隆获得栉孔扇贝几丁质酶的c DNA,全长共1587 bp,可编码439个氨基酸残基。氨基酸序列的功能结构域分析表明,该几丁质酶具有保守的几丁质酶特征结构域。组织表达分析表明,栉孔扇贝几丁质酶在外套膜组织中表达量最高,并且在外套膜边缘的表达量高于外套膜中心,推测其参与了贝壳的形成。应用实时定量PCR方法,检测贝壳损伤修复过程中基因表达水平,结果显示,几丁质酶基因表达水平呈现下调趋势,暗示其作为负调控因子参与贝壳修复过程。利用RNAi技术降低外套膜组织中几丁质酶基因的表达水平,同时应用扫描电子显微镜观察贝壳内表面的结构,发现贝壳矿物晶体片层的轮廓呈现不规则沉积。综合以上实验结果,推测几丁质酶通过水解几丁质来保证有机框架的有序性,从而对贝壳形状和外观起到调控作用。研究几丁质酶的基因组织表达规律及其生物学功能,将有助于揭示贝壳生物矿化的机制。  相似文献   

新疆栅蛛属一新种蛛蛛目:栅蜘科     

王家福  谢莉萍  梁铁 《新疆农业大学学报》1989,(1)

本文详细描述了分布于我国新疆的栅蛛属一新种——新疆槢蛛Hahnia xinjiangensis sp.nov.并附有外生殖器官结构图。模式标本保存在湖南省生物研究所。  相似文献   

食蟹猴体温、呼吸率、血压值和脉搏数的测定     

韦祝梅  黄俊华  陈健东  谢莉萍 《广西畜牧兽医》2009,25(5):265-266

为提供食蟹猴一般生理指标,本实验测定124只食蟹猴的肛温、呼吸率、血压和脉搏,比较不同性别和不同年龄组之间测定参数的差异.结果表明,1～1.8岁青幼年组、3～6岁成年组食蟹猴的体温、呼吸率、血压和脉搏均无明显性别差异.青幼年组与成年组相比较,血压无明显差异,但肛温、呼吸率明显高于成年组食蟹猴,而脉搏则明显低于成年组(P<0.01) .结论:食蟹猴上述生理参数性别之间差异不明显,随着年龄的变化血压变化不大,但肛温和呼吸率随着年龄的增长而减少,脉搏数则随着年龄的增长而增多,呈现较为复杂的年龄相关性.  相似文献