种猪采食行为与生长性状关联分析与实现          下载免费PDF全文

王婷婷  黎煊  赵书红  雷明刚  刘望宏  刘诗尧 《华中农业大学学报》2022,41(4):240-247

为便于开展种猪采食性状研究及满足测定设备智能化发展需求，设计了一套基于物联网技术和Web技术的种猪性能测定信息管理系统。系统选取CAN总线进行数据双向传输，采用B/S（Browser/Server）前后端分离架构，前端基于Reactjs技术栈，后端采用flask web框架和MySQL数据库进行系统开发；2次测试结果表明，系统数据传输可靠性高，各功能模块满足预期设计要求，满足种猪性能测定实际使用需求；以杜洛克种猪为研究对象，分析采食性状与生长性状间的表型相关，并构建种猪达100 kg体质量日龄偏最小二乘回归（partial least square，PLS）预测模型，交叉验证结果显示PLS测试集平均决定系数为0.68，平均MAE为3.2 d，使用试验数据对PLS模型进行测试，测试结果表明可以将采食性状与生长性状结合对种猪生长速度进行预测。  相似文献   

LbCas12a蛋白的原核表达及活性检测     

刘茹  李小龙  张晓倩  田小欢  余梅  赵书红  曹建华 《中国畜牧兽医》2022,49(5):1621-1629

【目的】 获得具有体外切割活性的来自毛螺旋菌属(Lachnospiraceae) ND2006的LbCas12a蛋白，以期为LbCas12a的应用研究提供重要的生物学工具。【方法】 根据pMBP-LbCas12a质粒(Addgene，113431)的基因序列合成LbCas12a基因，并将其与pET-28a(+)线性化载体进行同源重组，构建重组质粒pET28a-LbCas12a，经测序和NheⅠ、SalⅠ双酶切鉴定后将阳性重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达。通过12% SDS-PAGE凝胶电泳检测确定IPTG诱导的最佳浓度及温度，鉴定重组蛋白的表达形式，通过Ni-NTA树脂亲和层析的方法进行纯化、超滤法浓缩，BCA法检测蛋白浓度。将浓缩后的LbCas12a与猪细小病毒(PPV)靶标DNA、CRISPR RNA (crRNA)及偶联荧光基团的非特异性单链DNA(ssDNA)探针FQ共孵育，设置1个无LbCas12a蛋白的对照组、4个不同蛋白浓度(125、250、500、1 000 nmol/L)的试验组，检测不同组别ssDNA探针的荧光强度，检测测试位点PPV活性。【结果】 测序和NheⅠ、SalⅠ双酶切鉴定结果表明，重组质粒pET28a-LbCas12a构建成功且无移码突变。12% SDS-PAGE凝胶电泳检测结果表明，IPTG诱导表达的最佳浓度为0.5 mmol/L，最佳温度为37 ℃，表达形式主要为可溶性表达。蛋白浓度检测结果表明，浓缩后的蛋白浓度为485 ng/μL，质量为143 ku。活性检测结果表明，125、250、500、1 000 nmol/L LbCas12a蛋白组的荧光强度均极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】 本研究成功表达出高活性的LbCas12a蛋白，且LbCas12a蛋白具有体外切割ssDNA的反式活性，为后续基于CRISPR-LbCas12a系统的分子检测技术奠定了基础。  相似文献