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金黄色葡萄球菌聚集因子A蛋白的原核表达及抗血清活性分析 总被引:1,自引:1,他引:0
采用PCR方法对金黄色葡萄球菌山东分离株ZFB1的聚集因子A(Clumping factor A,ClfA)基因进行扩增,并将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中获得重组克隆pGEX/ClfA,使ClfA与GST进行融合表达,然后利用原核表达的蛋白免疫小鼠制备抗血清,并采用黏附与黏附抑制试验对抗血清的活性进行分析。在SDS-PAGE和Western-blot试验中,表达产物相对分子质量(约67 000)同预期结果相符,与兔源抗ZFB1全价血清有特异的抗体结合活性。在黏附与黏附抑制试验中发现ClfA抗体能够抑制金黄色葡萄球菌在细胞表面的黏附。结果表明,ClfA可以作为保护性抗原,有助于动物抵抗金黄色葡萄球菌的侵入、定植和感染,从而为奶牛金黄色葡萄球菌性乳腺炎的防治提供了科学的试验依据。 相似文献
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同时检测四种病原菌的PCR方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
(目的)为建立一种同时检测四种常见动物源致病菌的PCR方法.(方法)本研究针对大肠杆菌的(16s-23s rRNA)基因、金黄色葡萄球菌的(nuc)基因、单增李斯特氏杆菌的(hlyA)基因以及沙门氏菌的(invA)基因分别设计合成了四对特异性引物,PCR扩增的目的基因片段分别为662 bp、484 bp、372 bp、284 bp,并对多重PCR反应条件进行了优化.(结果)建立的多重PCR方法具有敏感、特异、准确、快速的优点,检测时间为4h左右.(结论)为研发同时检测人畜共患病食源性主要致病菌即大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏杆菌及沙门氏菌的试剂盒奠定了基础. 相似文献
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16 S rRNA在细菌分类鉴定研究中的应用 总被引:11,自引:0,他引:11
细菌的16S核糖体RNA(ribosome RNA,rRNA)以其在进化上的特征性序列,现已被广泛用于细菌分类和鉴定的分子指标。其具体操作是,以聚合酶链式反应(PCR)分离细菌样本中的16SrRNA的基因片段,通过克隆、测序或酶切、探针杂交获得其序列信息,再与16SrRNA数据库中的序列数据进行比较,确定其在进化中的位置,从而鉴定样本中可能存在的微生物种类。文章综述了16SrRNA作为微生物系统分子分类鉴定的理论基础和方法,以及在细菌分类鉴定中的应用。 相似文献
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"全息"穴区注苗对机体免疫应答反应的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究以羊为实验动物模型,将伪结核棒状杆菌灭活苗分别接种于试验组羊耳背部“全息”穴区和对照组羊体背侧部皮内,然后定期检测供试羊的白细胞总数和淋巴细胞比率,同时采用ELISA检测血清中的特异性抗体效价,用氚村票房胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入法,分别以刀豆素(ConA)和特异性为刺激因子进行T淋巴细胞转化试验。结果表明,两组供试羊的白细胞总数均呈一时性增多,但无显著差异;血清中抗体效价、淋巴细胞 相似文献
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宁夏肉用种鸡J亚群禽白血病的实验室诊断 总被引:3,自引:0,他引:3
对宁夏某肉用种鸡场发病的肉种鸡病料进行组织病理学检查,并将其接种于鸡胚成纤维细胞(cEF),从中分离到J亚群禽白血病病毒(ALV—J)。从患鸡肝组织切片中观察到大量髓细胞样瘤细胞,散在或呈簇状,髓细胞样瘤细胞的细胞质内显现嗜酸性颗粒。在用抗ALV—J囊膜糖蛋白的单克隆抗体进行的间接荧光抗体(IFA)试验中.病料接种cEF后的IFA试验呈现强阳性。用一对ALV—J特异性的引物对病料基因组DNA进行PcR扩增,结果,扩增出了2.2kb的特异性条带。上述观察和试验证实,该肉用种鸡场肉种鸡发生的疫病为J亚群禽白血病。 相似文献
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