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参考GenBank上发表的H5亚型禽流感(AIV)血凝素(HA)基因序列及鸡白细胞介素18成熟蛋白(mChIL-18)的cDNA基因序列,分别设计了HA1和mChIL-18基因的2对引物.然后分别以pMD18-T-HA质粒和pGEX-mChIL-18质粒为模板,扩增出了H5亚型AIV的HA1基因和mChIL-18的cDNA片段.再以杆状病毒pFast-BacTMdual为栽体,将H5亚型AIV HA中的HA1基因和mChIL-18基因分别插入到双表达栽体pFastBacTM du-al的p10启动子(PP10)和多角体蛋白启动子(PPH)的下游,构建携带HA1基因和mChIL-18基因的重组pFastBacTMdual-HA1-mChIL-18真核表达质粒.最后将构建的真核表达质粒转座入大肠杆菌DH10Bac,并利用昆虫细胞进行转染.这个重组栽体的构建为考察mChIL-18作为免疫增强剂的作用及下一步AIV疫苗的研究奠定了坚实的基础. 相似文献
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鸭疫里默氏杆菌病 ,原称鸭疫巴氏杆菌病 ,又名鸭传染性浆膜炎 ,是由鸭疫里默氏杆菌所致的一种接触性传染病。本病呈急性或慢性经过 ,以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎和脑膜炎为特征。 2 0 0 0年 5~ 8月 ,山东省济宁、菏泽、泰安等地区的商品代肉鸭大量发生此病 ,造成了严重的损失。1 流行病学调查 2 0 0 0年 5~ 8月 ,山东济宁、菏泽、泰安的商品代肉鸭场相继发生一种传染病 ,主要发生于 1 0~ 40日龄的小鸭 ,大棚地面饲养 ,品种主要为樱桃谷商品代 ,发病率 2 0 %~ 80 % ,发病后抗生素控制疗效不佳 ,死亡率 1 5 %~ … 相似文献
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禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF鸡对脾细胞中IFN-γ产生的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用网状内皮组织增生病病毒(REV)感染SPF鸡造成免疫抑制状态,用双抗体夹心ELISA对鸡脾淋巴细胞IFN-γ的分泌量进行了测定。结果显示,SPF雏鸡接种REV后,除呈现生长缓慢症状外,并且出现了中枢免疫器官严重萎缩等免疫抑制状态的典型表现。IFN-γELISA显示,REV感染后7 d (7 dpi),脾淋巴细胞IFN-γ的分泌量显著升高,与对照组相比差异极显著。至15 dpi,IFN-γ水平最高,以后逐渐下降,但至50 dpi仍显著高于对照鸡。这是REV感染鸡后对IFN-γ影响的首次直接定量研究。 相似文献
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巢式PCR检测无乳链球菌16SrRNA方法的建立及应用 总被引:6,自引:0,他引:6
无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)引起的奶牛乳房炎主要表现为隐性型,需要通过实验室检查才能确诊。研究建立了一种特异、敏感和快速的巢式PCR方法用于检测奶样中的无乳链球菌。利用链球菌属(Sgeptococcus)16S rRNA基因的保守区设计通用引物作为链球菌属的阳性控制,在保守区内的可变区设计无乳链球菌特异的引物。研究结果表明,通过奶样中无乳链球菌的增菌培养,简便、快速提取DNA和特异性PCR反应,可以检测到奶样中1CFU/mL的无乳链球菌,可以用作牛群中无乳链球菌感染的早期流行病学调查。 相似文献
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摘要:α溶血素(α-Hemolysin, α-HL)是金黄色葡萄球菌的主要毒力因子之一,利用PCR技术从金黄色葡萄球菌临床分离株扩增出编码α溶血素的基因(α-HL),经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达质粒pET32a+-α-HL。经诱导表达后,进行SDS-PAGE分析,结果表明:α-HL在大肠杆菌中已融合表达,融合蛋白的分子量为53kD。溶血实验证明该融合蛋白具有较强的溶血作用,其溶血效价达2.26×104 HU/mg,表明表达产物具有生物活性,这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。 相似文献