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本研究利用抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体免疫SPF来航鸡,获得产生抗独特型抗体的脾细胞,从中提取总RNA,经反转录合成cDNA第一链.以cDNA第一链为模板,根据来航鸡 IgG 抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因FR设计引物,进行PCR扩增.在体外扩增出该抗体的可变区VH和VL基因(大小分别约为370和320 bp).通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VL ScFv,将ScFv DNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得重组的鸡源抗三肽囊素独特型抗体全套单链噬菌体抗体库.并测得该库容量约为5×105,噬菌体中ScFv基因的插入率为80%,用辅助噬菌体援救后,得到滴度为1011PFU/mL的初级噬菌体抗体库.用抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的淘筛,出现特异性富集.经ELISA、动物试验表明所筛选的5个阳性克隆可与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)特异性结合,并能促进抗体的生产. 相似文献
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1999年2-4月,江西某种鸡场60周龄种鸡群发病,其主要特征为母鸡产蛋率逐渐下降。经实验室检查诊断为鸡疏螺旋体病。禽疏螺旋体病在我国属新发现的家禽传染病,国内对本病的报道甚少,目前对其流行情况、临诊症状。病理变化等资料不多。此次江西地区种鸡的疏螺旋体病与资料记载有些不同,现报道如下。1流行病学调查与临诊症状该种鸡场现有种鸡(三黄鸡)3000余套,其中60周龄种鸡1200余套,不同周龄种鸡均隔离饲养(平养)。1999年2月初,60周龄的种鸡群开始发病。公鸡临诊症状较明显,主要表现为精神沉郁,羽毛松乱,食欲下降,冠逐渐萎缩… 相似文献
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鸵鸟绿脓杆菌病的诊断 总被引:2,自引:0,他引:2
近几年来 ,江西某鸵乌养殖场常有雏鸵鸟卵黄吸收不良 ,导致部分死亡 ,造成较大的经济损失 ,已成为影响该场雏鸵鸟存活率的主要疾病之一。 1 998年 8月 ,该场一批新生雏鸵鸟表现不同程度腹部膨胀、卵黄吸收不良 ,造成 33%的死亡 ,经我室诊断为绿脓杆菌感染 ,报道如下。1 发病情况与临诊症状 该场有母鸵鸟 36只 ,每周入孵 1次。每批雏鸵鸟出壳后均饮用添加抗生素的饮水 ,持续 1周。 1 998年 8月 ,一批雏鸵鸟 (1 5只 )均表现不同程度食欲减退、腹部膨胀、精神沉郁、不能站立 ,并陆续出现死亡 ,至 1 0日龄送检时已死亡 5只。2 剖检变化 剖检… 相似文献
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试验选取18头体质量270 kg左右的锦江黄牛,随机分为对照组和试验组,每组9头牛,试验组日粮中添加200 mg/kg的乳酸粪肠球菌,对照组不添加,研究乳酸粪肠球菌对锦江黄牛免疫功能及粪便菌群的影响。预试10 d,正试60 d。结果表明:正试期第30天,免疫球蛋白G(Ig G)含量试验组比对照组增加11.57%(P0.05);白细胞介素1(IL-1)含量试验组减少26.38%(P0.05);肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量试验组比对照增加1.68%(P0.05);第60天,Ig G含量试验组比对照组增加4.94%(P0.05);IL-1含量试验组比对照组减少6.24%(P0.05);TNF-α含量试验组比对照组增加20.03%(P0.05)。正试期第30天,大肠杆菌试验组比对照组降低38.00%(P0.05);乳酸杆菌试验组比对照组增加1897.6%(P0.05);第60天,大肠杆菌试验组比对照组降低26.96%(P0.05);乳酸杆菌试验组比对照组增加86.20%(P0.01)。结果表明:乳酸粪肠球菌复合菌在一定程度上可以增强锦江黄牛的免疫功能,但效果不显著(P0.05);乳酸粪肠球菌复合菌可以提高动物肠道中优势菌群的数量,改善锦江黄牛肠道内环境。 相似文献
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以戊二醛法制备BursinKLH,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞,以PEG为融合剂,与SP2融合,用间接ELISA法筛选出与Bursin-BSA结合、不与BSA结合的2F9-4克隆株,经鉴定,抗体属性为IgM,K轻链。水溶性Bursin可阻抑2F9-4对鸡法氏囊的反应,切片标本经PBS处理,反应性消失,免疫组织化学染色于法氏囊上获得特征性阳性结果。 相似文献