斑节对虾细胞周期蛋白Y基因克隆与原核表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

李伟杰  傅明骏  赵超  郭松  江世贵  周发林  杨其彬  邱丽华 《中国水产科学》2015,22(5):896-907

为了研究细胞周期蛋白Y(cyclin Y)在斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育中的作用,从斑节对虾转录组数据中筛选获得cyclin Y基因部分序列,采用SMART-RACE方法克隆得到斑节对虾细胞周期蛋白Y(Pm-cyclin Y)基因c DNA全序列。Pm-cyclin Y基因c DNA全长1576 bp,其中包含108 bp的5′非编码区(5′UTR)和439 bp的3′非编码区(3′UTR)以及1029 bp的开放阅读框(ORF),可编码342个氨基酸。生物信息学分析显示,其编码的氨基酸序列有1个保守的周期蛋白框(cyclin box)同源结构域(172~257 aa),预测的分子量约为37.6 k D,理论等电点6.64。实时定量PCR显示其m RNA在卵巢的表达量显著高于其他组织(P0.05);并且在卵巢5个不同发育期都有表达,在III期卵巢中的表达量最高。本研究通过原核表达方法对Pm-cyclin Y进行重组表达,为其蛋白质功能方面的研究奠定了基础。  相似文献   

斑节对虾细胞周期蛋白B慢病毒载体的构建及对Hela细胞增殖影响     

周发林  黄建华  邱丽华  杨其彬  江世贵 《南方水产》2014,(4):16-21

细胞周期蛋白B（Cyclin B）是影响卵母细胞发育成熟的重要基因。文章构建了PmCyB慢病毒表达载体,并和慢病毒包装复合物在293T细胞中包装成慢病毒颗粒。利用包装好的慢病毒颗粒,感染干扰了Cyclin B1基因的Hela细胞,研究了PmCyB对Hela细胞增殖的影响。结果表明,通过siRNA干扰细胞自身的Cyclin B1后,转染对照组病毒液的Hela细胞增殖减缓;同时,干扰后转入含有PmCyB重组慢病毒表达载体,Hela细胞增殖速度明显要高于转染对照组病毒液的Hela细胞的增殖速度。这一结果表明,PmCyB基因的过表达能补偿Cyclin B1缺失导致的细胞增殖减缓的现象,说明PmCyB基因具有细胞周期调控功能,是细胞增殖与分化的重要调控基因,且功能可能与人类的Cyclin B1相似。人类的Cyclin B1是卵母细胞发育成熟的重要基因。由此可以推断,PmCyB基因可能对斑节对虾（Penaeus monodon）卵巢发育成熟起着重要作用。  相似文献   

斑节对虾GRP94基因的克隆及其在不同应激条件下的表达与分析     

史进选  傅明骏  赵超  周发林  杨其彬  邱丽华 《南方水产科学》2016,(5):61-70

以斑节对虾(Penaeus monodon)为研究对象,利用RACE技术克隆得到了斑节对虾Pm GRP94基因c DNA全长,并对其结构进行生物信息学分析。Pm GRP94全长2 990 bp,包括75 bp的5'UTR、527 bp的3'UTR和2 388bp的ORF。利用实时定量PCR技术,对Pm GRP94组织特异性及其在不同p H、盐度和3种重金属应激下转录水平变化情况及特点进行了研究。结果显示,Pm GRP94基因存在组织特异性,并在肝胰腺中的表达量最高;不同的应激条件下其表达具有明显差异,其中在p H、铜(Cu)和锌(Zn)的应激下Pm GRP94的表达显著升高。因此预测该基因可以作为斑节对虾受p H、Cu和Zn胁迫的指示基因。  相似文献   

肃南县农业源污染现状及综合防治对策     

邱丽华  曹红梅  张斌  李春霞 《甘肃农业》2009,(12):58-58,60

通过对肃南县种植业、畜禽养殖业农业面源污染现状的调查分析,提出了综合治理农业面源污染的对策.  相似文献   

有机碳土壤调控剂对盐化潮土理化性质和甜菜效益的影响     

邱丽华 《中国糖料》2018,(4)

进行了有机碳(SOC)土壤调控剂配方筛选及对盐化潮土理化性质和甜菜效益影响的研究。结果表明:SOC土壤调控剂配方比例为:有机碳肥0.9375∶保水剂0.0025∶甜菜专用肥0.0563∶聚乙烯醇0.0037,甜菜经济效益最佳施用量为23.85t/hm~2,甜菜理论产量为104.07t/hm~2。施用SOC土壤调控剂与传统化肥比较,盐化潮土容重、pH和重金属离子Hg、Cd、Cr和Pb分别降低6.92%、0.46、16.21%、28.85%、15.74%和18.02%;土壤总孔隙度、毛管孔隙度、非毛管孔隙度和团聚体分别增加3.40、1.87、1.53和7.11个百分点;土壤总持水量、毛管持水量和非毛管持水量分别增加6.67%、6.67%和6.68%;土壤有机质、碱解氮、速效磷和速效钾分别增加11.81%、1.78%、1.68%和0.28%;土壤有益微生物真菌、细菌和放线菌分别增加122.64%、34.40%和21.13%;土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶和多酚氧化酶分别增加61.42%、46.08%、33.33%和59.09%;甜菜叶丛高度、叶丛重量、根体长度、根直径和单株根重分别增加2.03%、3.79%、3.04%、3.03%和8.47%;产量、增产值和施肥利润分别增加8.33%、0.28万元/hm~2和0.07万元/hm~2。在盐化潮土施用SOC土壤调控剂,有效地改善了盐化潮土理化性质和生物学性质,提高了酶活性和甜菜的经济效益。  相似文献   

干旱对农业生产的影响     

王秀云  邱丽华  李燕  李建明  孙晓慧 《现代农业》2008,(2):33-33

干旱对人类生产活动最明显、最直接的危害就是对农业生产带来的严重灾难。尤其是中国北方频繁出现的旱灾。造成粮食作物大面积减产。给人民带来苦难。据1978～1989年统计．全国播种面积平均每年145061百万公顷．而每年受旱涝等灾害就有42．14百万公顷，占28．9％．在受灾面积中有60．6％是旱灾。一旦出现旱灾。农业粮食减产十分严重。要预防和减少干旱．就要先了解干旱。  相似文献   

高寒冷凉山区日光温室蔬菜生产存在的问题及对策     

邱丽华 《中国园艺文摘》2009,25(11):106-107

立足本地资源，充分利用冷凉山区特殊的气候条件，在现有温室蔬菜栽培的基础上，引进新品种、新技术，促进高海拔冷凉山区反季节蔬菜的快速发展，增加农牧民收入。针对目前冷凉山区日光温室蔬菜生产存在的问题，提出发展对策。  相似文献   

花鲈白细胞介素8基因的克隆与序列分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

邱丽华  江世贵  张汉华  杨铿  周发林 《中国水产科学》2007,14(2):201-207

采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法,从经LPS刺激的花鲈(Lateolabrax japonicus)总RNA反转录产物中获得了803 bp的IL-8 cDNA序列。该序列包含159 bp的5′非编码区(UTR)和359 bp的3′非编码区(UTR)以及297 bp的开放阅读框(ORF),可编码99个氨基酸。序列的3′UTR含2个mRNA不稳定基序,在Poly A尾上游17 bp处有1个明确的Poly A加尾信号(AATAA)。预测的氨基酸结构含27个氨基酸组成的信号肽,将信号肽切除可产生72个氨基酸组成的成熟肽,预测成熟肽的分子量约为8.3 kD,等电点为7.85。花鲈IL-8序列中用于形成二硫键的4个半胱氨酸保守,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分开,形成CXC结构。与其他鱼类的IL-8相似,花鲈IL-8序列中也缺乏哺乳类中存在的ELR基序,而含有ELH结构。进化分析显示,花鲈IL-8与从鱼类和哺乳类分离的IL-8有不同程度的同源性,与硬骨鱼黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)和牙鲆(Paralichthys olivaceus)的进化关系最近,其次为软骨鱼类,与无颌类和哺乳类的分化较大;而哺乳类的ELR结构可能为IL-8在进化过程中特化而成的结构,以加强IL-8特异性的趋化能力。  相似文献   

红海湾礁滩增殖的初步研究     

梁超愉  张汉华  吴进锋  王江勇  邱丽华 《水产科技》2001,(1):12-14

红海湾位于北纬22&;#176;33～22&;#176;50；东经114&;#176;52′～115&;#176;34′，10m等深线以浅海域面积有3万ha。散布有菜屿岛、龟龄岛、江牡岛、芒屿岛等数十个岛屿及干出礁。岸线长度35．47Km，岸相以岩礁生境为主。海水年平均温度为22．3℃，海水盐度变化范围在23～34之间。礁栖生物种类多，主要经济种类有杂色鲍、蝾螺、紫海胆等。  相似文献   

鱼类肿瘤坏死因子基因和受体的研究进展     

邱丽华  张汉华  吴进锋 《中国水产科学》2004,11(5):482-487

肿瘤坏死因子(Tumer nerosis factor,TNFα)是机体抵抗寄生虫、细菌和病毒入侵感染时的一种重要的介质,而且TNFα在机体内还起着其他治疗方面的功能,包括抗肿瘤、休克和胚胎发育等。TNFα主要由几种免疫细胞产生,如单核细胞或巨噬细胞、天然杀伤(NK)细胞、嗜中性白细胞和激活的B细胞等。TNFα的许多生物学活性都是通过与细胞膜表面的受体(TNFRI)结合后而发挥作用的。随着分子生物学技术的发展,基因克隆技术的完善,鱼类免疫学研究取得了显著的进步,尤其是TNFα基因自2000年后相继在几种鱼类中被克隆测序并进行了表达方面的研究,因此本文就肿瘤坏死因子基因及受体的功能及近来在鱼类中的研究概况进行了综述。  相似文献