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犬冠状病毒RT—PCR检测方法的建立和初步应用 总被引：9，自引：1，他引：9
根据Ｗｅｓｅｌｉｎｇ发表的犬冠状病毒（ＣＣＶ）Ｋ３７８株纤突蛋白（Ｓ）基因序列，设计合成了４条寡聚核苷酸引物Ｐ１（１８ｂｐ，１５２０～１５３７ｂｐ）、Ｐ２（１９ｂｐ，２０７２～２０９０ｂｐ）和Ｐ３（２０ｂｐ，２６２１～２６４０ｂｐ）、Ｐ４（２０ｂｐ，２９４４～２９６３ｂｐ）。以此为引物，以从美国引进的ＣＣＶＮＬ－１８参考株反转录产物为模板，在国内首先建立了ＣＣＶＲＴ－ＰＣＲ方法，并初步应用于国内ＣＣＶ分离株的鉴定。结果表明，以Ｐ１、Ｐ２和Ｐ３、Ｐ４为引物，只能从ＣＣＶＮＬ－１８株反转录产物中扩增出大小分别为５７１ｂｐ和３４３ｂｐ核苷酸片段，与理论设计值大小一致，而正常ＣＲＦＫ细胞和狂犬病等５种对照病毒扩增结果为阴性。ＲＴ－ＰＣＲ可检出１μＬ做１０５和１０３倍稀释的ＣＣＶＮＬ－１８株反转录产物，说明其具有很高的敏感性。初步应用试验结果，可从２株国内分离的ＣＣＶ反转录产物中扩增出５７１ｂｐ和３４３ｂｐ核苷酸片段。通过本研究不仅建立了敏感、特异的ＣＣＶＲＴ－ＰＣＲ检测方法，也为其Ｓ基因的克隆和序列测定奠定了基础。 相似文献
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犬瘟热病毒小熊猫株(LP)的动物感染试验 总被引：4，自引：1，他引：3
将从死亡小熊猫肝脏病料中分离到ＣＤＶ ＬＰ株第９代ＭＤＣＫ细胞培养毒,按不同剂量各接种７只２～３月龄的健康幼犬,接种犬全部发病。于接种后７天时各捕杀２只犬进行检测,电镜检查、ＣＤＶ ＲＴ－ＰＣＲ、ＣＤＶ的分离及中和试验结果均为阳性,说明接种犬发生了ＣＤＶ感染。结合接种犬出现的临床症状及病理解剖学变化结果进行的分析表明,ＣＤＶ ＬＰ株是一株强毒,并且具有很强的免疫原性。人工感染犬试验结果表明某动物园 相似文献
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近年来 ,在欧洲鳗鲡 (Ａｎｇｕｉｌｌａａｎｇｕｉｌｌａ)的养殖过程中常发生“狂游病”。发病前 ,出现食欲极为旺盛 ,异常抢食现象。数日后离群、不摄食、旋转式游动、侧游或在水面上呈挣扎状急游 ,数秒后沉入水中 ,再上浮挣扎状游动 ,往复进行。 2～ 3天后病鳗出现呼吸困难 ,对外界剌激反应迟钝 ,继而随水流集于排污口。死亡数急剧增加。流行季节为 5月 - 1 0月份 ,7月 - 8月份为发病高峰 ,死亡率达 90 %以上。当年欧洲鳗鲡 ( 1 0 0～ 2 0 0ｇ)和 2龄欧洲鳗鲡 ( 4 0 0ｇ以上 )均易发病死亡 ,从开始发病到死亡一般只需 2周左右 ,目前尚无良… 相似文献
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养殖欧洲鳗鲡"狂游病"外周血细胞的病理变化 总被引：7，自引：0，他引：7
近年来 ,在欧洲鳗鲡 (Ａｎｇｕｉｌｌａａｎｇｕｉｌｌａ)的养殖过程中常发生“狂游病”。发病前 ,出现食欲极为旺盛 ,异常抢食现象。数日后离群、不摄食、旋转式游动、侧游或在水面上呈挣扎状急游 ,数秒后沉入水中 ,再上浮挣扎状游动 ,往复进行。 2～ 3天后病鳗出现呼吸困难 ,对外界剌激反应迟钝 ,继而随水流集于排污口。死亡数急剧增加。流行季节为 5月 - 1 0月份 ,7月 - 8月份为发病高峰 ,死亡率达 90 %以上。当年欧洲鳗鲡 ( 1 0 0～ 2 0 0ｇ)和 2龄欧洲鳗鲡 ( 4 0 0ｇ以上 )均易发病死亡 ,从开始发病到死亡一般只需 2周左右 ,目前尚无良… 相似文献
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将精氨酸霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａａｒｇｉｎｉｎｉ，简称ＭＡ）和莱氏无（需）胆甾醇霉形体（Ａｃｈｏｌｅｐｌａｓｍａｌａｉｄｅａｗｉｉ，简称ＡＬ），分别接种于鸡胚细胞，电镜下观察结果如下：（１）此２种霉形体在形态、细胞内分布、增殖形式和吞噬功能以及对培养细胞的选择性等方面是相同的；（２）此２种霉形体引起培养细胞的病理学过程不同。接种ＭＡ的鸡胚细胞，早期即出现髓膜样结构和脂质体等退行性变化，晚期在细胞质内才能见到空泡出现；而接种ＡＬ的鸡胚细胞，早期即可出现细胞质内的空泡化现象，晚期细胞质内才可见到髓膜样结构和脂质体。 相似文献
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核蛋白基因（N）位于犬瘟热病毒基因组的108—1679位置处,是保守性较强的免疫原性蛋白,因此选择N基因作为目的基因,利用酶切、连接等方法构建了含犬瘟热病毒核蛋白基因的穿梭质粒pVAX△E3LPN。以含CAV-2SY株全基因组的pPoly2-CAV-2为载体,构建了重组质粒pCAV-2-CDVLPN,利用脂质体介导法转染MDCK细胞,转染三次后,细胞出现了典型的腺病毒样病变。电镜负染、切片观察,酶切、PCR扩增及测序鉴定的结果表明表达犬瘟热核蛋白基因的重组犬2型腺病毒构建成功,表达的核蛋白分子量为58kDa。 相似文献
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采用间接荧光标记及胶体金标记方法通过流式细胞仪和低压扫描电子显微镜，检测了L-选择素在健康泌乳中期乳牛（A组）及患金黄色葡萄球菌型临床型（B组）和亚临床型乳腺炎乳牛（C组）中性粒细胞上表达的基本规律。结果表明：三者表达L-选择素的中性粒细胞阳性率分别为97．90％、97．69％和96．67％（收集5000个细胞），组间差异不显著（P〉0．05），但患亚临床型乳腺炎乳牛的阳性率从3次测定的结果看是逐渐增加的；L-选择素表达的间接荧光强度组间差异极显著（P〈0．01）；而患亚临床型乳腺炎的乳牛组内差异也极显著（P〈0．01）；扫描电镜观察到的中性粒细胞表面脊样结构的分布及形态与流式细胞仪检测的结果具有相似性。 相似文献
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