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从猪胃窦和十二指肠提取总RNA,采用美国Am b ion RNA公司生产的Q uan tum RNA class ic 18S为内标,建立了半定量RT-PCR方法,并对胃窦和十二指肠胃泌素mRNA进行了定量检测、测序和比较分析。结果表明,扩增的猪胃窦和十二指肠胃泌素核苷酸序列与猪前胃泌素(propregastrin)核苷酸的同源性达到99%。将其与已发表的人、牛、大鼠和小鼠等物种相应序列的比较结果表明,无论是核苷酸水平,还是氨基酸水平,都显示出了较高的同源性(80%~99%)。另外,建立的RT-PCR方法灵敏度高,操作快捷方便,可用于定量检测少量的组织样品中低丰度表达的胃泌素mRNA。 相似文献
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转codA基因的耐盐碱水稻对大鼠生理代谢的影响及外源基因的水平转移 总被引：6，自引：0，他引：6
实验选用32只SD大鼠随机分成2组，分别饲喂含30％转codA基因水稻（Oryza sativa L．）和含30％非转基因水稻的大鼠配合饲料，2组饲料其它成分相同，各项营养指标和卫生指标均无显著差异，连续饲喂30d。结果发现，实验组大鼠体增重与对照组相比无显著差异（P〉0．05），血清中生长激素（growth hormone，GH）、胰岛素（insulin）、胰高血糖素（glucagon）、甲状腺素（triiodothyroxine T3，tetraiodothyroxine T4）、促甲状腺素（thyroid—stimulating hormone，TSH）、尿素氮（serum urea nitrogen，SUN）、葡萄糖（glucose）、谷丙转氨酶（glutamyl tranpeptidase，GPT）和血清总胆固醇（total cholesterol）等与对照组相比无显著差异（P〉0．05）。同时，分析大鼠的血液、肌肉、肝脏、胰脏、肾脏、胃及肠道内容物PCR扩增水稻内源基因SPS和外源基因codA的特异性片段在大鼠体内的转移情况，结果表明，用含转codA基因水稻的饲料饲喂大鼠，大鼠血液及各组织器官中没有发现转基因水稻内源基因和外源基因片段，而在大鼠胃、肠道内容物中发现了转基因水稻的内源基因和外源基因的片段，说明短期内转基因水稻的内源和外源基冈没有发生遗传转移。 相似文献
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二花脸母猪泌乳期乳中乳铁蛋白分泌规律的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
应用我们已建立的酶联免疫吸附分析 (ELISA)方法 ,研究二花脸母猪泌乳期乳中乳铁蛋白 (Lactoferrin,Lf)的分泌规律。采集分娩后的4头二花脸母猪在泌乳起始 48h内的连续乳样 (每小时采样 1次 )进行测定。结果显示 :刚分娩时乳中Lf浓度最高 ,为 1 2 66 59μg/mL ;随后开始下降 ,前 2 0h内下降较快 ,2 0h之后下降变缓 ;至第 48h ,浓度降为第 1小时的 53 %。对处于泌乳期前 30d内的 4头二花脸母猪连续乳样 (每天采集 1次 )和 1 0 2头二花脸母猪散点乳样 (每天随机采样 )的测定结果表明两者Lf的分泌规律基本相似 :分娩第 1天 ,Lf浓度最高 ;1周内迅速下降 ,第 7天降至第 1天的 2 5 % ;1周后下降缓慢 ;2周后趋于平稳。 相似文献
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饲喂β-酪啡肽对大鼠免疫功能影响的研究 总被引：10，自引：1，他引：9
β 酪啡肽 (β Casomorphinβ CM)是 β 酪蛋白经过酶解所释放的一类小肽 ,具有类似阿片肽的功能。试验通过饲喂 2种 β 酪啡肽 (β Casomor phin 7,β CM 7) ,和β Casomorphin 3 (β CM 3)来探索其对动物机体免疫活性的影响 ,并以谷胱甘肽 (GSH)作为肽参照组。试验选用SD雄性健康成年大鼠 ,分 3个肽组 (β Casomorphin 7,β Casomorphin 3,GSH)和 1个未给药对照组 ,每组 1 0只。 3种肽均以 1 2× 1 0 - 6 mol/L的浓度添加于饮水中 ,饲喂 3周后 ,分别进行试验检测。淋巴细胞转化试验 (LTT) (n =6)结果表明 :平均刺激指数 (SI)对照组为 1 99;β CM 7组为 2 56 ;β CM 3组为 3 2 3;GSH组为 2 46。3个肽组相对对照组SI有提高趋势 ,其中 β CM 3组相对对照组差异接近显著 (P =0 0 8)。红细胞免疫试验 (EIT ,n=6)测出各组红细胞C3b受体花环率各为 :对照组 4 9% ,β CM 7组 1 6 7% ,β CM 3组 1 5 9% ,GSH组 1 4 7%。 3个肽组相对于对照组均极显著升高 (P <0 0 1 )。腹腔巨噬细胞吞噬活性试验 (MTT ,n =6)测出各组平均OD570 分别为 :对照组 0 2 1 ;β CM 7组 0 2 2 ;β CM 3组 0 2 2 ;GSH组0 3。GSH组相对对照组差异显著 (P <0 0 5)。试验结果表明 β 酪啡肽对大鼠的免疫活性具有一定的促进作用 相似文献
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乳源阿片肽活性物质对动物消化、代谢的影响 总被引：5，自引：0，他引：5
近２０年的研究发现，某些食物蛋白质含有生物活性肽（Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＢＡＰ），它们在消化过程中被释放，这些存在于消化腔内的ＢＡＰ可与特殊受体结合，参与采食、消化、代谢和内分泌调节。目前已发现的食物源ＢＡＰ有阿片活性肽、阿片活性拮抗剂、免疫调节肽、金属元素载体、抗菌和抗应激肽等。这一研究领域的发展，对传统的营养学和生理学概念提出了挑战，并迅速成为新的研究热点。美国畜牧杂志（１９９６）对此作了综合评述，指出这是“动物营养学的一个新的前沿”。可是对于这些生物活性肽的来源、产生、生化… 相似文献
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30只孕鼠随机分成正常对照组(Con,n=10)、阳性对照组(P,n=10)和实验组(T,n=10)。实验组大鼠每天按100mg/kg体重灌喂黄芪多糖(astragaluspolysaccharide,APS),直至实验结束,而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水(physiologicalsalinesolution,PSS)。孕鼠于产后72h分别用灭菌PSS和50μg大肠杆菌(Escherichiacoli)内毒素经乳头管灌注到大鼠第四对乳腺内。灌注后24h处死大鼠,取乳腺组织固定,进行组织学观察,观察显示P组的大鼠乳腺组织破坏得最为严重。P组大鼠乳腺组织中白细胞介素-2(IL-2)浓度与正常对照组相比显著降低(P<0.05);T组大鼠乳腺组织中IL-2浓度与P组相比显著升高(P<0.05)。与正常对照组相比,P组大鼠外围血CD4 T细胞数量显著下降(P<0.05),CD8 T细胞数量显著升高(P<0.05),CD4 /CD8 水平显著下降(P<0.05);而T组大鼠外周血CD4 T细胞数量、CD8 T细胞数量及CD4 /CD8 水平均无显著变化(P>0.05)。结果表明,灌喂APS可以减轻炎症对T淋巴细胞增殖反应的抑制,改善感染导致的机体细胞免疫功能下降,对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的保护作用。 相似文献
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[目的]为替唑尼（T）在狗体内的药代动力学研究提供依据。[方法]以健康狗口服硝唑尼特后的血浆为材料,研究了不同处理（水、酶液、缓冲液、处理时间）对葡萄糖醛酸替唑尼特（TG）的降解效果。[结果]加水1μl和加水1μl放置1 h处理的T峰面积差异不明显。加入酶液、缓冲液和放置不同时间处理的T峰面积有显著差异。向血浆中加入20μl pH值为4.3的醋酸-醋酸钾缓冲液、2μlβ-葡萄糖醛酸苷酶、37℃恒温过夜酶解条件下,T的峰面积最大,较处理前明显升高。经该条件酶解处理后,血浆中只能找到T,而酶解处理前能找到T和TG。[结论]得到了能够完全水解狗血浆中替唑尼特葡萄糖醛酸结合物的酶解条件。 相似文献
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控制肉鸡脂肪过多沉积是肉鸡生产中亟待解决的问题。脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)是人体分泌最为丰富的肾上腺类固醇激素,可经由类固醇激素受体介导发挥生理功能,降低机体生脂能力。本研究以鸡胚原代肝细胞为研究对象,选用含DHEA终浓度为0(对照)、0.01、0.1、1.0、10和100μmol/L的培养液孵育肝细胞20min后收集细胞,放射免疫测定法(RIA)检测胞内cAMP水平。结果发现,0.1～100μmol/L DHEA孵育肝细胞均可显著提高胞内cAMP水平(P<0.05),其中0.1μmol/L DHEA效果最为显著(P<0.01)。0.1μmol/L DHEA孵育肝细胞20min或1h后收集细胞,RIA法分别检测胞内腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)活性,(γ-32P)ATP掺入法测定cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)活性,Western blot法测定cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)磷酸化水平。结果显示,0.1μmol/L DHEA孵育肝细胞20min可显著降低胞内PDE活性(P<0.05),提高PKA活性(P<0.05),但对AC活性无显著性影响(P>0.05)。0.1μmol/L DHEA处理肝细胞1h可显著提高CREB蛋白磷酸化水平(P<0.05),且这种效应可被PKA抑制剂阻断(P>0.05)。本研究结果提示,DHEA调控肉鸡肝脏脂肪代谢,降低脂肪沉积的机制可能与激活胞内cAMP/PKA信号系统,活化转录因子CREB有关。 相似文献
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选取食品级胰蛋白酶、胃蛋白酶、Protamex^TM复合蛋白酶、Alealase碱性蛋白酶1.5MG和Flavourzvme^TM复合风味蛋白酶1000MG以确定蛋白酶对酰氨基的水解能力。单酶在适宜的条件下水解面筋蛋白4h后取样。试验采用双（1，1-三氟乙酸基）碘苯（BTI）保护肽中结合Gln，通过高效液相色谱测定肽定中Glu含量间接测定Gln，分析水解液中氨基氮的含量，并计算平均肽链长度。结果发现胰蛋白酶、胃蛋白酶和Protamex^TM复合蛋白酶对酰氨基的水解能力较小，对酰氨基的破坏率分别为2.79%，1.90%和5.8%；而Alcalase碱性蛋白酶3.0T、Neutrase中性蛋白酶1.5MG和Flavourzvme^TM复合风味蛋白酶1000MG分别是32.25%，26.55%和16.38%。胰蛋白酶、胃蛋白酶和Protames^TM复合蛋白酶水解面筋蛋白8h后Gln的得率分别是77.86%，9.58%和87.70%。试验结果表明胰蛋白酶、胃蛋白酶和Protamex^TM复合蛋白酶为制备Gln结合肽的合适蛋白酶。 相似文献