茶树△12-脂肪酸去饱和酶基因FAD2和FAD6的克隆与表达分析     

陈丹  俞滢  岳川  王鹏杰  陈静  陈桂信  叶乃兴 《茶叶科学》2017,37(6)

本研究在茶树转录组测序的基础上,以铁观音茶树的芽叶为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树不饱和脂肪酸合成途径中的关键限速酶—△12-FAD(12-脂肪酸去饱和酶)基因的包含完整ORF的cDNA序列(CsFAD2和CsFAD6)。生物信息学分析结果表明,CsFAD2的全长为1 184 bp,其开放阅读框(ORF)长度1 149 bp,编码382个氨基酸,定位于内质网上,其氨基酸序列与油茶FAD2的同源性最高达97%;CsFAD6的全长为1 425 bp,其ORF长度为1 311 bp,编码436个氨基酸,定位于叶绿体上,其氨基酸序列与葡萄FAD6同源性达81%。荧光定量PCR结果表明,铁观音茶树幼苗在4℃低温胁迫处理72 h过程中,这两个基因的表达均受低温的诱导,其表达量随着处理时间的延长而升高,在处理48 h时,表达量水平最高;在100 g·L-1的PEG胁迫处理12 h过程中,这两个基因的表达均受PEG胁迫处理的诱导;在ABA(100μmol·L-1)胁迫处理72 h过程中,在处理6~24 h期间,CsFAD2的表达量显著升高,而CsFAD6的表达不受ABA处理的影响,CsFAD6的表达量在处理72 h时显著降低;在Na Cl(250 mmol·L-1)胁迫72 h过程中,CsFAD2的表达量全程降低,而CsFAD6在处理24~72 h期间表达量显著升高。  相似文献   

金观音与其亲本差异基因表达的遗传分析     

姚雪倩  郑玉成  王鹏杰  林浥  郑知临  陈桂信  叶乃兴 《福建农林大学学报(自然科学版)》2019,(2)

从金观音—铁观音和金观音—黄旦差减文库中获得差异基因并进行功能分类;采用荧光定量PCR技术检测金观音与其亲本间差异基因表达量的变化,分析差异基因的表达模式,同时检测具有超高亲表达和低于双亲表达模式的基因在其他两个F_1黄观音和金玫瑰上表达量的差异.结果表明:差异基因包含参与生长发育、逆境胁迫和次生代谢等9类功能;与生长发育、逆境胁迫和次生代谢有关的基因在金观音及其亲本中均有表达,依据表达量的差异可分为5种表达模式;根据3个F_1品种与其共同父母本荧光定量表达量的差异,可将F_1品种的表达分为均超过双亲(杂种优势)、低于双亲(杂种劣势)、部分超过双亲和部分低于双亲(兼具杂种优、劣势)3种类型.  相似文献   

玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA的克隆及原核表达     

郭凤芝  许颖妍  熊青  刘涛  吕恃衡  陈桂信  佘文琴 《热带作物学报》2017,38(4):673-681

以玳玳花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了玳玳HPL基因cDNA全长,全长为1 776 bp,其中包含52 bp的5′非编码区,224 bp的3′非编码区,1 500 bp的编码区(编码499个氨基酸,分子量为55.7 ku)。将该HPL基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与其他植物的HPL基因cDNA序列进行比较,推断玳玳花瓣HPL属于13-HPL类。通过PCR扩增得到了玳玳HPL基因组全长。测序结果显示玳玳HPL基因中包含1个长2 374 bp的内含子。将分离出来的玳玳HPL基因cDNA的编码区序列插入pET-15b载体上构建原核表达载体,在细菌BL21细胞中进行原核表达。结果表明:该编码区片段可在原核细胞中大量表达,其表达产物分子量大小约为55 ku,与13-HPL蛋白的分子量55.7 ku相符。本研究为下一步利用HPL基因cDNA进行遗传转化研究奠定基础,将为花卉香味的遗传改良提供一条新途径。  相似文献   

(木奈)果实CCoAOMT与LAR基因的筛选与表达分析     

陈桂信  王玉珍  赵利  姜翠翠  吕恃衡  潘东明 《北方园艺》2015,(9):87-94

以(木奈)果实为研究材料,探讨了(木奈)PsCCoAOMT和PsLAR基因在(木奈)果实不同发育时期的表达动态,采用两步法逆转录与抑制PCR技术相结合的方法构建含(木奈)果实不同发育时期的均一化全长cDNA文库,通过稀释池PCR法筛选出酚类物质代谢途径中的关键酶基因PsC-CoAOMT和PsLAR.结果表明:PsCCoAOMT和PsLAR全长cDNA序列分别为1 195 bp和1 625 bp,对应的ORF分别为744 bp和1 050 bp,分别编码247和349个氨基酸.PsCCoAOMT相对分子量为27 893.8,等电点为5.42,属于亲水性稳定蛋白;PsLAR相对分子量为38 483.1,等电点为5.40,具有亲水性,属于不稳定蛋白.同源性分析表明,PsCCoAOMT氨基酸序列与白梨相似性达96％,PsLAR氨基酸序列与蔷薇科植物高度同源.荧光定量结果表明,PsCCoAOMT在(木奈)整个生长发育过程表达量差异都不明显,整体呈下降趋势,花后50 d表达量最低;PsLAR在(木奈)整个生长发育过程表达量呈明显的下降趋势,前期高后期低,花后125 d表达量最低.  相似文献   

油木奈——初始坐果机制研究     

郭志雄  潘东明  陈桂信  吕柳新 《勤云标准版测试》2007,(7)

以成年油木奈树为材料,对其初始坐果进行了研究。结果表明,盛花后2周内,油木奈出现大量的落花落果;幼果(子房)低水平的GA1 3与油木奈的落花落果高峰关系密切,而内源细胞分裂素ZRs和[diH]ZRs以及ABA与幼果(子房)的生长呈显著的正相关;初始坐果期,油木奈的雌配子体发育缓慢,且有相当数量的胚囊中途退化、败育,无法正常受精,从而导致其大量的落花落果。文中就油木奈的初始坐果机制进行了讨论。  相似文献   

龙眼胚性愈伤组织胞浆型抗坏血酸过氧化物酶基因3''''末端序列的同源克隆     

李惠华  赖钟雄  陈桂信  陈义挺 《农业生物技术学报》2006,14(1):141-142

抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX(EC1.11.1.11)),是活性氧清除的重要酶类。高等植物中的植物抗坏血酸存在多种同工酶,最大的区别在于叶绿体型和胞浆型,两者在酶学特性和核酸序列和分子机制上都有不同(Foy-er and Halliwell,1997)。至今,不少研究者进行APX各种同工  相似文献   

橄榄幼胚培养成苗及其离体扩繁研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

李周岐  吕柳新  陈桂信 《西南林学院学报》2004,24(3):1-3

于花后约53～61d采集橄榄幼果，取其大小约8mm以上的完整幼胚接种在以MS或WPM为基本培养基、附加琼脂7g／L，蔗糖50g/L，CH0．5g／L及GA3和KT各0．5mg／L的培养基上，成苗率可达68％～81％．将幼胚萌发苗切成带1个腋芽的小段，插于以1／2MS为基本培养基、附加琼脂7g／L，蔗糖15g／L，PVP4g／L及IBA4mg／L的培养基上进行扩繁，生根率可达56．7％．  相似文献   

柑桔组织培养材料基因组DNA的快速提取   总被引：2，自引：0，他引：2  

张健  夏海武  吕柳新  陈桂信  杨国华 《福建果树》2006,(3):35-36

本文介绍了一种适用于柑桔组织培养材料基因组DNA的快速提取方法,获得的柑桔基因组DNA具有较好的质量和较高的纯度,可满足进一步研究的需要。  相似文献   

重瓣大岩桐组织培养初报   总被引：3，自引：0，他引：3  

张丽梅  徐瑞成  陈桂信  赖钟雄 《福建果树》2000,(4):7-9

以重瓣大岩桐侧芽为外植体 ,进行了组织培养研究。结果表明 ,在附加NAA 0 1～0 2mg L- 1和BA 2 0mg L- 1的MS培养基上可诱导分化和增殖 ,在含IBAl 0mg L- 1的 1/ 2MS培养基上诱导生根 ,发育成正常植株 ,为重瓣大岩桐的试管育苗奠定了基础。  相似文献   

热胁迫下水仙花叶片的转录组分析     

宋姣敏  徐小萍  陈裕坤  陈桂信  赖钟雄 《热带作物学报》2019,40(10):1991-2000

为研究水仙响应高温胁迫过程中相关基因的表达及响应热应激的分子机制,本研究以漳州水仙花为材料,使用BGISEQ-500测序技术,对高温（30、35 ℃）处理及正常生长条件（15 ℃）的水仙叶片进行转录组学的测序分析。使用Trinity软件对15（对照）、30、35 ℃（高温胁迫）处理24 h的水仙叶片测序数据进行从头组装,利用BLAST软件进行基因比对注释,通过DEGseq和PossionDis检测差异表达基因,并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。结果表明：本次水仙花叶片测序共获得112 160条总长度为128 733 815 bp、平均长度为1147 bp的Unigene,其N50以及GC含量分别为1770 bp和42.33%。Nr比对注释匹配度最高的物种为石刁柏,利用KOG数据库进行比对,5560条Unigene序列分布于25个功能区域。差异表达基因GO富集显示与光合系统及膜系统相关的GO term被显著富集,KEGG分析显示次生代谢物的生物合成、苯丙烷类生物合成、代谢途径、光合作用、糖胺聚糖降解、乙醛酸和二羧酸代谢、光合作用-天线蛋白、单萜类生物合成等8条代谢途径在3个比较组中均显著性富集,硫胺素代谢途径是唯一在高温胁迫条件下均显著富集的代谢途径。本研究注释了大量相关基因序列,通过本研究为改善水仙花植物的耐热性及耐热性品种的培育提供了丰富的数据资源和分子基础。  相似文献