半番鸭源鸭1型甲肝病毒亚型的分离鉴定及其VP1基因分析     

傅秋玲  傅光华  陈翠腾  程龙飞  万春和  施少华  陈红梅  陈珍  朱春华  黄瑜 《福建农业学报》2017,32(8):813-817

自胰腺泛黄的雏半番鸭中分离获得1株病毒(命名为FJ1605株),经RT-PCR检测为鸭1型甲肝病毒,通过鸭胚中和试验发现该株病毒可被鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)高免血清特异性中和,确定该株病毒为鸭1型甲肝病毒亚型。对该株病毒VP1基因进行分子特征分析,发现其核苷酸大小为714bp,与GenBank登录的DHAV-1a同源性为98.1%~99.7%,与DHAV-1FJ1220毒株同源性最高达99.7%;而与鸭2型甲肝病毒(DHAV-2)、鸭3型甲肝病毒(DHAV-3)VP1基因的核苷酸同源性仅分别为65.7%和68.3%左右。基于VP1基因的遗传进化分析表明,FJ1605分离株属鸭1型甲肝病毒亚型谱系。以该株病毒对7日龄雏半番鸭进行人工感染试验,可完全复制出同于临床病例的病变。以上结果显示,雏半番鸭也可感染DHAV-1a,且表现为胰腺泛黄。  相似文献   

鸭巴泰病毒一步法RT-PCR检测方法的建立     

傅光华  陈翠腾  傅秋玲  刘荣昌  程龙飞  施少华  万春和  陈红梅  黄瑜 《福建农业学报》2017,(11):1193-1196

为建立鸭巴泰病毒(Batai virus,BATV)的快速检测方法,本研究基于该病毒囊膜蛋白(M)基因序列的保守区域,经优化反应条件,对检测方法的特异性、敏感性及重复性进行了测定,建立了一种用于检测BATV的一步法RT-PCR快速诊断方法。所建立的检测方法可特异性扩增出BATV M基因480bp的序列片段,其最低检测病毒量为1×10~(1.1) TCID_(50),且重复性好,对禽坦布苏病毒、鸭甲肝病毒等5种鸭常见传染病病原均未扩增出相应的片段,特异性好。以上结果表明,所建立的RT-PCR检测方法具有很好的特异性和敏感性,可用于鸭BATV感染的早期快速诊断及流行病学调查。  相似文献   

浅谈微生物学实验教学改革   总被引：2，自引：0，他引：2  

谢翎  陈红梅 《安徽农学通报》2011,17(14):269-270

微生物学实验作为生物技术专业的基础实验课,对大学生科研素质的培养起着非常重要的作用。从实验项目、实验教学方法、开放实验室、实验教学考核等方面着手,探讨对培养学生科学素质取得的效果。  相似文献   

鸡传染性法氏囊病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

朱春华  林甦  程龙飞  陈红梅  陈珍  刘斌琼  蔡国漳  林羽  黄瑜 《福建农业学报》2011,26(2):175-179

R-PCR扩增IBDV的VP5基因保守片段,将其克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定得到阳性质粒.以阳性质粒为标准品,建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR的标准曲线和溶解曲线.结果表明,IBDV荧光定量PCR的标准曲线Ct值与3.29×10～3.29×108之间的病毒基因拷贝数呈现良好的线性关系.该方法...  相似文献   

雷公藤丽长角巢蛾生物学特性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱建华  黄金水  任少鹏  陈红梅  詹远顺  张继龙 《中国森林病虫》2010,29(3)

丽长角巢蛾Xyrosaria lichneura在福建省泰宁县1 a发生5代,主要以幼虫危害雷公藤。10月中、下旬以蛹在寄主周围土壤中越冬,翌年3月下旬成虫开始羽化产卵。幼虫孵化后直接潜入雷公藤叶片内取食叶肉,仅留下叶的上表皮。幼虫4龄,1~4龄幼虫平均历期分别为2.93,3.24,4.52,5.33 d。7月第3代幼虫进入猖獗危害阶段。成虫产卵多在晚上进行,单雌产卵量约60粒。卵多散产在嫩叶背面主脉附近。  相似文献   

玉米品种耐旱性鉴定及耐旱指标筛选^*     

谭静  黄必华  陈红梅  肖卫华  韩学莉  姚文华  番兴明 《云南农业大学学报(自然科学版)》2010,25(2):189-195

 对云南省区域试验中表现优良的33个玉米杂交种在水分控制条件下进行耐旱性鉴定,筛选高产耐旱优良玉米新品种;同时,对干旱和正常水分处理下各性状之间和干旱条件下不同性状与产量之间进行差异和相关分析,研究干旱对玉米主要农艺和产量性状的影响,并筛选若干可用于耐旱鉴定的间接指标。试验筛选出寻单7号,保21-413,云杂3号、金瑞6号、宣黄单5号等一批干旱和正常条件下产量高、且差异小、其它农艺性状优良的耐旱玉米品种;研究表明干旱将显著地引起雌雄间隔期延长、秃尖增长、穗粒重降低、单株生产力下降和单产降低(P＜0.05);干旱处理下穗粒重、籽粒灌浆后期叶片衰老度、单株生产力和耐旱系数与产量呈显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）相关,可以作为耐旱鉴定的间接指标。  相似文献   

玉米品种耐旱性鉴定及耐旱指标筛选   总被引：1，自引：0，他引：1  

谭静  黄必华  陈红梅  肖卫华  韩学莉  姚文华  番兴明 《云南农业大学学报(自然科学版)》2010,25(2):189-194

对云南省区域试验中表现优良的33个玉米杂交种在水分控制条件下进行耐旱性鉴定,筛选高产耐旱优良玉米新品种;同时,对干旱和正常水分处理下各性状之间和干旱条件下不同性状与产量之间进行差异和相关分析,研究干旱对玉米主要农艺和产量性状的影响,并筛选若干可用于耐旱鉴定的间接指标。试验筛选出寻单7号,保21-413,云杂3号、金瑞6号、宣黄单5号等一批干旱和正常条件下产量高、且差异小、其它农艺性状优良的耐旱玉米品种;研究表明干旱将显著地引起雌雄间隔期延长、秃尖增长、穗粒重降低、单株生产力下降和单产降低(P0.05);干旱处理下穗粒重、籽粒灌浆后期叶片衰老度、单株生产力和耐旱系数与产量呈显著(P0.05)或极显著(P0.01)相关,可以作为耐旱鉴定的间接指标。  相似文献   

分子标记株鸭圆环病毒感染性核酸的构建     

万春和  傅光华  施少华  程龙飞  陈红梅  黄瑜 《中国畜牧兽医》2010,37(9):91-93

以临床分离的鸭圆环病毒（duck circovirus）（GenBank登录号：GU168779）阳性病料为材料,根据GenBank中所登录的鸭圆环病毒基困序列设计引物并对设计的引物5′末端进行磷酸化处理,通过引物设计替换碱基,以突变形成EcoRⅠ酶切位点。利用PCR方法扩增鸭圆环病毒的基因,经胶回收后,用T4 DNA连接酶进行环化,以获得鸭圆环病毒具有感染性的核酸。在含有分子标记的两端设计引物,进行PCR扩增,对PCR产物进行胶回收,连接T载体后测序,对胶回收产物进行EcoRⅠ酶切鉴定,均证明在第587位成功插入EcoRⅠ酶切位点。结果表明,本试验已成功构建带有分子标记的鸭圆环病毒的感染性核酸,为进一步开展该病毒的分子调控机制、致病性和开发基因工程疫苗研究奠定基础。  相似文献   

三株鸭肝炎病毒1型全基因序列分析     

施少华施少华  陈红梅万春和 程龙飞 《中国农学通报》2010,26(14):8-12

【研究目的】为分析三株1型鸭肝炎病毒（DHV）的遗传变异和进化关系;【方法】采用RT-PCR和5'-/3'-RACE.方法测定三株1型鸭肝炎病毒全基因序列;【结果】研究结果表明,不含poly（A）尾巴的3株病毒的基因组全长为7691~7700 nt,基因组均仅含一个长度为6750 nt的ORF,625~627 nt 5'端非翻译区和325~328 nt 3'端非翻译区(UTR)。将3株病毒株与GeneBank公布的其他DHV-1全基因序列及小RNA病毒科的其它属代表病毒株进行序列分析表明,聚蛋白均被分割成为12个蛋白,其中VP1的变异性最大,180~187位为高变区。3株病毒与DHV-1参考毒株核苷酸序列同源性在93.7%~98.8%,氨基酸序列同源性在96.9%~98.8%,DHV-1各株在小RNA科病毒多聚蛋白氨基酸序列进化树上形成一个独立的进化分支;【结论】DHVs-1病毒间核苷酸和氨基酸仍较保守,它们在进化中可将其归为小RNA病毒科的一个新属。  相似文献   

石河子垦区紫香无核干穗发生情况及应对措施     

陈红梅 《新疆农业科技》2013,(1):33-34

紫香无核从花期开始果穗不断感染病菌,部分穗轴逐渐变成黑褐色;果实进入着色期,由穗尖逐渐发生萎蔫现象,对叶片和病穗进行病菌检测及分析,主要受霜霉菌、灰霉菌、链格孢、镰刀菌等侵染,叶片K含量仅有2％～3％,在栽培、病菌防治方面采取相应防治措施,取得较好防治效果.  相似文献