高寒山区养猪生产存在的问题及对策探讨     

陈红英  姜映国  许国芬  刘代顺  陈建华 《上海畜牧兽医通讯》2010,(6):64-64

宁蒗彝族自治县地处滇西北,与四川大凉山相连,俗称“云南小凉山”。总面积6025km^2,其中山区面积占98．3％,而海拔2500m以上的高寒层占81．48％。2009年末全县家畜存栏72．58万头（只）。畜牧业是我县的五大优势产业之一,历届领导十分重视畜牧业的发展。然而,由于受到高海拔自然环境条件、社会因素的制约和传统消费习俗的影响,  相似文献   

表达传染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因重组禽痘病毒的构建     

管倩  陈红英  崔保安  杨明凡  高文明  李双亮 《中国兽医学报》2010,30(11)

将含痘病毒启动子LP2EP2的鸡传染性支气管炎病毒S1糖蛋白基因和鸡IL-18(ChIL-18)基因同时插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组禽痘病毒转移载体pSYS1/ChIL-18。用脂质体将其转染已感染禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达S1和鸡IL-18的重组禽痘病毒(rFPV-S1-ChIL-18)。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,对重组病毒rFPV-S1-ChIL-18进行多次蚀斑克隆。以重组禽痘病毒DNA为模板,利用S1基因和鸡IL-18基因特异引物进行PCR,分别扩增出1条约1.7 kb和1条约0.6 kb的带。经间接免疫荧光法和T细胞转化试验证实感染rFPV-S1-ChIL-18的CEF中存在表达的S1和鸡IL-18。  相似文献   

人β2微球蛋白成熟肽基因克隆及其原核表达载体的构建     

张蕾  李新生  崔保安  陈红英  魏战勇  孙凯  宋亚鹏  阮武营 《河南农业大学学报》2010,44(1)

根据GenBank基因库中人β2微球蛋白(β2m)成熟肽基因序列设计2对引物,使用RT-PCR法从健康人血液中扩增人β2m成熟肽基因,扩增产物进行T-A克隆和测序.结果表明,获得的人β2m成熟肽基因为297 bp,与模板序列的同源性为100%.利用基因重组技术,将β2m成熟肽基因亚克隆入pET-28a(+)载体中,经PCR、酶切和测序鉴定,证实所获重组表达质粒pET-28/Humβ2m中含有目的片段,且连接、构建正确,表明成功构建了重组表达质粒pET-28/Ham β2m.  相似文献   

贵宾犬α-干扰素基因的扩增、克隆与序列分析     

宋亚鹏  陈红英  崔保安  贾艳艳  郭显坡  张蕾 《江苏农业学报》2010,26(2)

参照基因库中收录的犬α-干扰素基因序列设计1对引物,应用PCR技术直接从贵宾犬肝组织基因组DNA中扩增IFN-α基因,将回收得到的特异性片段克隆于pGEM-T Easy载体中,转化感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选,质粒PCR鉴定及酶切鉴定筛选阳性重组质粒,测定其核苷酸序列。测序结果表明,贵宾犬α-干扰素基因全长为564 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码187个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有3个潜在的N-糖基化位点,有10个与二硫键形成有关的半胱氨酸。用DNAStar软件将所得序列与人和其他种动物的IFN-α基因进行核苷酸及氨基酸同源性比较,并通过绘制系统进化树可知,IFN-α基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。  相似文献   

禽腺病毒4型感染的诊断与防制     

张磊  张宇  李巧  杨兴武  张鸿鑫  陈红英 《安徽农学通报》2016,22(10)

2015年8月,河南新郑某鸡场30日龄肉鸡突然出现死亡。病死鸡心包内存在大量积液,肝脏充血、肿大。PCR检测禽腺病毒4型核酸,呈现阳性,结合发病情况和剖检病变,诊断为禽腺病毒4型感染。然后对该鸡场采取了综合防制措施,取得了较好的效果。  相似文献   

鸭MHC-Ⅰ_α链胞外区成熟肽基因的克隆、序列分析及表达载体构建     

孙凯  李新生  崔保安  陈红英  魏战勇  张蕾  宋亚鹏  阮武营 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010,38(2):57-62

【目的】克隆鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pET/DuMHC-Ⅰ。【方法】依据GenBank/DDBJ/EMBL基因库中公布的鸭MHC-Ⅰ基因序列设计1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中扩增MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA,T-A克隆到pGEM-T Easy载体中,并进行测序。通过PCR和酶切的方法,将鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因亚克隆入pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ,并进行PCR、NcoⅠ和NotⅠ双酶切及测序鉴定。【结果】测序结果表明,获得了MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因,其长度为813 bp,编码271个氨基酸。MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因与GenBank中登录的鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因序列的同源性为89.4%~91.7%,氨基酸同源性为78.2%~83.7%;与鸡、鹅、鹌鹑、草鱼、狗、猪、鼠和人的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽氨基酸序列的同源性分别为64.6%,79.3%,59.4%,41.0%,26.6%,45.0%,12.5%和22.1%,这表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种属多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。所获重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ经PCR、酶切、测序鉴定,证实鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA已正确克隆入pET-28a(+)表达载体。【结论】成功克隆出鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因,并构建了重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ。  相似文献   

流感病毒的核蛋白是一种多功能RNA结合蛋白   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈红英  李新生  崔保安 《动物医学进展》2004,25(3):4-7

流感病毒核蛋白 (NP)的主要功能是使病毒基因组衣壳化 ,以便 RNA转录、复制和病毒子装配。本综述的目的是说明 NP不仅是一种RNA结合的结构蛋白 ,而且作为病毒与宿主细胞之间的一种关键的配体分子而起作用 ,通过病毒和细胞的大分子之间相互作用来发挥其功能 ,包括 RNA、NP、病毒 RNA依赖的 RNA聚合酶和病毒基质蛋白。 NP也与细胞多肽相互作用 ,细胞多肽包括肌动蛋白、细胞核输入和输出装置所需的成分和细胞核 RNA解旋酶  相似文献   

河南良杂猪白细胞介素18基因的克隆及其成熟蛋白在大肠杆菌中的表达     

郑兰兰  贾云飞  崔保安  陈红英  陈瑞亮 《农业生物技术学报》2008,16(4)

白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)又称为干扰素γ诱生因子(interferon gamma inducing factor,IGIF).Okamura and Tsutsui(1995)首次从中毒性休克的鼠肝脏中克隆出了该因子.Muneta et al.(1999,2000)从猪肺泡巨嗜细胞中克隆到pIL-18,并证明表达pIL-18的成熟蛋白比前体蛋白具有更高的活性.本研究选择河南省普遍喂养的良杂猪,对其IL-18基因进行扩增及序列测定,并实现了成熟蛋白在大肠杆菌中的初步表达.  相似文献   

禽大肠杆菌O2、O78菌株外膜蛋白A基因扩增及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹素芳黄青云  温纳相陈红英 《华南农业大学学报》2004,25(1):99-102

根据Genbank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因的核苷酸序列设计引物,从禽大肠杆菌O为O2、O78及它们的融合株O2．78(Chl^rNor^r)中分别扩增得到外膜蛋白A基因(ompA),进行序列测定及分析发现3个菌株的ompA均由2276nt组成,核苷酸序列完全相同,只有一个大的开放性阅读框(ORF),长1041bp,编码由346个氨基酸组成的前外膜蛋白A(pro-OmpA),前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成,相对分子质量为37000．其氨基酸序列也完全相同．从基因水平上证明了禽大肠杆菌O2和O78菌株存在相同的外膜蛋白A抗原。  相似文献   

不同品种猪IFN-α基因的克隆与序列分析     

刘占通  崔保安  文英会  陈红英  金喜新  牛春玲  魏战勇 《动物医学进展》2006,27(12):54-57

根据现有猪α干扰素(IFN-α)基因序列设计引物,应用PCR技术直接从肝组织基因组中扩增丹系长白和法系长白、英系大白和法系大白猪IFN-α基因。将克隆得到的特异性片段克隆入pGEM-TEasy载体中,转化感受态细胞JM109,运用蓝白斑筛选、质粒PCR鉴定及酶切鉴定筛选阳性可疑菌株,并将筛选的阳性株进行测序。结果表明,得到了上述4个品系的猪IFN-α基因。核苷酸同源性均在97.2%以上,氨基酸同源性均在92.8%以上。  相似文献