NDVF基因真核表达质粒的构建及其与鸡IL-18基因联合免疫的初步研究*     

陈红英  崔沛  李新生  崔保安  段廷云  陈果  李成 《云南农业大学学报(自然科学版)》2010,25(4):511-517

 为了探索鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白的免疫原性及鸡白细胞介素-18(IL-18)的免疫增强作用,通过PCR和酶切方法将NDV F基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达质粒pcDNA-F。用质粒pcDNA-F单独或与鸡IL-18重组真核表达质粒pIL-18联合免疫14日龄SPF鸡。首免后每周采取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和MTT法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免后第14 d用NDV强毒F48E9株进行攻击。结果表明,质粒pcDNA-F与pIL-18联合免疫显著提高鸡体的细胞免疫水平,并且提供了50%免疫保护,这为ND的防治开辟了新的途径。  相似文献   

传染性法氏囊病毒HN株的分离鉴定及应用免疫荧光检测IBDV     

杨明凡  王岩  张素梅  郭小参  陈红英 《河南农业科学》2008,(1):99-101

河南郑州地区某养鸡场的三黄肉鸡出现精神沉郁,拉水样白色粪便,剖检可见法氏囊水肿、出血;肾脏出血肿大,有尿酸盐沉淀,呈花斑状;腿肌、胸肌有出血斑点;腺胃与肌胃交界处出血。经病毒分离、鸡胚接种、琼脂扩散试验和细胞接种试验,最后确诊为传染性法氏囊病。同时,采集病料,制备冰冻切片,建立一种检测病料中的IBDV免疫荧光检测方法。  相似文献   

固始鸭白细胞介素2基因的克隆及分子进化分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈红英  李新生  杨明凡  王学斌  吕晓丽  崔保安  霍军峰 《河南农业大学学报》2008,42(1):82-85

根据已发表的鸭白细胞介素（IL-2）cDNA序列设计并合成1对引物,直接从成年固始鸭脾淋巴细胞中提取的总RNA,应用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增鸭儿-2cDNA,将扩增片段克隆入pGEM—TEasy载体,并对其进行测序、结果表明,扩增片段长度为446bp,与预期大小一致,为鸭,IL-2基因的编码区全长,共编码140个氨基酸的多肽、把该基因编码的鸭IL-2氨基酸序列与已公布的禽及哺乳动物IL-2氨基酸序列进行比较,其同源性分别在54．3％～100％和15．0％～17．9％之间．分子系统进化树分析表明,固始鸭,IL-2与哺乳动物,IL-2有共同的祖先,亲源关系较近,但在免疫系统选择性压力下,形成独特的种族特异性．  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒河南分离株S1基因克隆及遗传变异分析     

陈红英  李新生  崔保安  魏战勇  赵丽  张书松  方忠意 《河南农业大学学报》2007,41(3):295-299

根据GenBank中已发表的传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因,设计并合成了1对引物,采用RT-PCR技术扩增鸡传染性支气管炎病毒河南分离株(HN0501)S1基因,并进行克隆和测序.结果表明,所克隆的片段大小为1739 bp,包含S1基因和部分S2基因,S蛋白切割识别位点序列为RRSRR.序列比较分析发现,IBV HN0501株S1基因与澳大利亚N1株、吉林JAAS株S1基因核苷酸同源性分别为99.6%,99.8%,氨基酸同源性均为99.3%,而与其它支气管炎病毒株核苷酸同源性为66.4%~85.2%.通过IBV S1基因系统进化分析,结果发现HN0501株与N1株、JAAS株的亲缘关系近,而与其它支气管炎病毒株的亲缘关系均较远.进一步证实IBVHN0501株为IBV肾型株.  相似文献   

传染性喉气管炎病毒河南株gB基因的克隆与序列分析     

陈红英  崔保安  李新生  赵丽  郑兰兰  管倩 《华南农业大学学报》2007,28(2):99-102

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的核苷酸序列,设计、合成1对引物,应用PCR扩增鸡ILTV河南株(ILTV-CG)gB基因.将扩增片段克隆入pGEM-T Easy载体后,经蓝白斑筛选,菌液PCR和酶切鉴定为阳性的重组菌进行测序.结果表明克隆到ILTV-CG株gB基因,全长为2 629 bp,包含一个完整的开放阅读框,共编码873个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有8个潜在的N-糖基化位点,有12个与二硫键形成有关的半胱氨酸.序列分析表明,ILTV-CG株gB基因与GenBank中读取的澳大利亚SA2疫苗株、辽宁疫苗株、烟台株、美国632强毒株、英国Throne强毒株gB基因核苷酸序列同源性为99%以上,与ILTV-SA2株gB基因比较发现,ILTV-CG株gB基因核苷酸序列在第89位均缺失1个碱基G,而在第102位又插入1个碱基A,从而引起该毒株gB基因推导的氨基酸序列中第28～32位5个氨基酸的移码突变.  相似文献   

传染性喉气管炎病毒河南株TK基因的克隆与序列分析     

陈红英  崔保安  李新生  张书松  魏战勇  崔沛  金钺 《江西农业大学学报》2007,29(5):813-817

根据传染性喉气管炎病毒TK基因的核苷酸序列设计并合成一对引物,利用该对引物PCR扩增出鸡传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CGI、LTV-XY及以色列疫苗株TK全长片段,并进行克隆、测序。结果显示3株ILTV的TK基因全长均为1 183 bp,包含一个开放性阅读框(1 092 bp),编码363个氨基酸的多肽;3株ILTV TK基因核苷酸序列完全一致,并与GenBank收录的ILTV美国632强毒株、北京E2株TK基因完全一致,而与山东烟台株、英国Thorne强毒株和英国216株TK基因核苷酸同源性均为99.5%,与其他疱疹病毒TK基因核苷酸同源性在19.1%～27.2%之间。分子进化分析揭示了各毒株间的亲缘关系。  相似文献   

猪伪狂犬病病毒与猪细小病毒混合感染的诊治   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵丽  崔保安  方忠义  陈红英  魏占勇 《中国兽医杂志》2006,42(12):58-58

1 发病情况及临床症状 2005年7月，河南封丘某猪场的初产母猪出现流产、死胎，母猪无明显的临床症状。2005年8～9月，该猪场2～3日龄新生仔猪突然发病，死亡率较高。10月份，初产母猪和经产母猪都发生流产或产出死胎、木乃伊胎，产出的弱仔胎多在2～3天内死亡，流产率达40％。有的初生仔猪及4周龄以内仔猪突然发病，厌食，体温升高至41～42℃，口角流出大量泡沫性唾液，出现呕吐、腹泻、行走不稳，呈后退转圈运动。时有间歇性抽搐，癫痫样发作，角弓反张，四肢呈游泳状等神经症状，最后死亡。发病率约40％～50％，发病猪死亡率达95％，耐过的病猪常成为僵猪。还有一些2月龄左右的猪出现低热，呼吸困难，厌食，流鼻液，有的出现呕吐或腹泻，卧地不起，四肢呈划船动作，口吐白沫，最后死亡。用多种抗生素、退热药治疗无明显疗效，前后死亡100多头仔猪。经临床观察、尸体剖检、实验室诊断为仔猪伪狂犬病病毒与细小病毒的混合感染，  相似文献   

RNA干扰及其在动物传染病预防上的应用     

段廷云  董振杰  陈红英  袁远  崔保安 《动物医学进展》2006,27(5):43-46

RNA干扰技术是近几年发展起来的分子生物学新技术,广泛应用于基因功能研究和人畜疾病预防。在RNaseⅢ的协助下,siRNA能够结合并切断相应基因的mRNA,从而阻断基因的表达。siRNA可以是人工体外合成,也可以是转染到细胞内的重组载体转录产生。对碱基上某些基团的取代会影响到siRNA的干扰活性及其对RNA酶的耐受性。由于siRNA只有不到30个碱基的长度,很容易在病毒的不同亚型和变异株之间找到保守序列,且应用后能快速产生抗病毒作用,这是疫苗和抗病毒药物不具备的优点。  相似文献   

肉鸡腺胃型传染性支气管炎病的诊断     

陈红英  李新生  刘延贺  尹凤阁 《河南畜牧兽医(综合版)》1998,(1)

1997年8月,郑州市某肉鸡场2000只18日龄肉鸡发生一种拉稀、消瘦,伴有呼吸道症状及死亡,剖检腺胃肿大如球状为特征的疾病。经发病情况、临诊症状、剖检病变和实验室诊断,初步诊断其病原为鸡传染性支气管炎病毒,因此将本病暂定名为鸡腺胃型传染性支气管炎。现将诊断结果报告如下：一、发病情况这批肉维分别在1日龄、10日龄和14日龄进行了鸡马立克病、鸡新城疫、鸡传染性支气管炎和鸡传染性法氏囊病的免疫接种,18日龄个别雏鸡开始发病死亡,以后逐日增多,20～25日龄形成死亡高峰,经强力霉素、新霉素加维生素C治疗后,死亡减少,至56日…  相似文献   

且末县肉苁蓉的种植与管理     

陈红英 《新疆林业》2013,(4):32-33

1 肉苁蓉寄主植物栽培 1．1造林地选择 肉苁蓉对土壤要求不高，以中性或偏碱性（土壤pH值为7．5～9）、灌排良好、通透性强的沙质土、轻盐碱土为宜（土壤含盐量小于1％），可利用弃耕退耕地、沙荒地、轻盐碱地种植。  相似文献