鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定     

陈红英  张书松  崔保安  李新生  金钺  陈文 《中国兽医杂志》2007,43(12):36-37

鸡传染性喉气管炎(ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性上呼吸道传染病。主要危害成年鸡,常表现呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物,产蛋鸡产蛋下降,发病率极高和较高的死亡率,给养鸡业带来严重的经济损失。该病自1925年由May等首次在美国罗德岛发现以来,已在世界上广泛流行。20世纪90年代在国内相继发生该病[1-2]。2005年3-4月河南省长葛、荥阳等地蛋鸡群相继突发以呼吸困难为主要症状的疾病,数日内发病率高达85%以上,死亡率近17%,产蛋率下降15%。剖检可见上呼吸道有多量黏性分泌物,有的含有血丝或血液,产蛋量下降27%,蛋形…  相似文献   

海兰鸡白细胞介素-18全基因的克隆与序列分析   总被引：7，自引：1，他引：7  

陈红英  崔保安  黄青云  李新生  王学斌 《中国预防兽医学报》2006,28(1):48-50

白细胞介素-18（Interleukin-18，IL-18）是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子，在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列，自行设计一对引物，经植物血凝素（PHA）活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后，提取其总RNA，经反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增，扩增产物进行了T-A克隆、测序，获得了中国海兰鸡IL-18基因全序列，其大小为597bp，与在GenBank中查得的鸡IL-18基因进行比较发现，中国海兰鸡IL-18基因与Schneider报道的鸡IL-18基因序列完全一致，为进一步研究鸡IL-18基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。  相似文献   

实时荧光定量PCR检测H1N1亚型猪流感病毒   总被引：12，自引：0，他引：12  

段廷云  陈红英  崔保安  魏战勇  李新生  王学斌 《畜牧兽医学报》2008,39(6)

根据GenBank中H1N1亚型猪流感病毒NP基因的序列（DQ889686）,利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA,经RT-PCR扩增NP基因。将鉴定正确的NP基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用表明荧光定量PCR的建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础。  相似文献   

彩色免疫金银染色法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

李新生  陈红英  崔沛  崔保安 《河南农业科学》2005,(9):94-98

试验首次建立了固相载体上的彩色免疫金银染色法(CIGSS)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并获得成功。用提纯的PRRSV高免兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗PRRSVIgG,建立了检测PRRSV抗原的彩色免疫金银染色法。经方阵试验确定最佳兔抗PRRSV IgG工作浓度为1∶400,金标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶1 000,银染色的时间为15 min,彩染的时间为2 min。用该法对提纯的PRRSV病毒抗原的最低检出量为1.469μg/ml,其敏感性为DIGFA的5倍。以CIGSS法检测了52份疑似PRRSV感染的猪样本,阳性率为53.84%,而检测猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪巴氏杆菌以及正常的Marc-145细胞培养物,均为阴性反应。表明该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判断、特异性强、重复性好等优点,可用于大量PRRSV抗原样本的检测。  相似文献   

有效使用广东警犬连连破案     

陈红英  张国红  欧海涛 《中国工作犬业》2005,(6):43-44

2005年3月21日凌晨,广东省增城市发生一起抢劫杀人案,犯罪嫌疑人作案后潜入荔新公路白石路段周围的蕉林。增城市公安局接报后,马上从各派出所、巡警大队抽调300多名民警和治保人员赴蕉林搜捕嫌疑人,将整片蕉林封锁,形成一个严密的包围圈。当日凌晨5时许,增城市公安局警犬队接报后,马上派出6名带犬民警携4头警犬迅速赶往案发现场。  相似文献   

猪伪狂犬病毒原阳株gE全基因的克隆与序列分析     

郭小参  高晓云  陈红英  杜根成  方剑玉  虞德屏  徐祥臣  张立昌 《国外畜牧学(猪与禽)》2014,(3):58-60

根据GenBank已经公布的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE全基因序列,设计合成了1对引物,利用PCR技术对猪伪狂犬病河南原阳病毒株相关的毒力基因gE进行了扩增,将特异性DNA条带进行回收,回收的PCR产物克隆到pMD?18-T载体中,并转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞。运用蓝白斑筛选,挑取阳性菌落,提取重组质粒进行PCR、酶切和测序鉴定。测序结果表明,该序列全长为1 862 bp,将该基因核苷酸序列与从GenBank下载读取的马来西亚株(FJ176390)、爱尔兰Nia-1株(FJ605136)、湖北Ea株、韩国株(AY249861)、美国Becker株(AY368490)、广东SH株(EF55242 7)、西班牙株(EU502923)、河南焦作株(EU561349)等的gE基因进行同源性分析比较,得出的核苷酸同源性分别为99.4%、97.9%、99.7%、99.6%、98.0%、99.7%、97.8%、99.0%。通过对其序列进行的测定,有利于进一步从分子水平研究PRV在某些地区的流行、变异规律,也为PRV的诊断和预防奠定了基础。  相似文献   

猪伪狂犬病毒YZ株gE全基因的克隆与序列分析     

朱前磊  方先珍  程果  毕亚楠  乔涵  付朋飞  王淑娟  陈红英 《安徽农学通报》2015,(7):127-129

为了解猪伪狂犬病毒(PRV)g E基因的遗传变异特性,根据Gen Bank已发表的PRV g E全基因序列,设计并合成1对特异性引物,对PRV YZ株进行了g E全基因的扩增、克隆及测序,并与其他参考毒株g E基因进行比较序列分析。测序结果表明,YZ株g E全基因序列由1 862bp组成,与Gen Bank已发表的13株PRV g E参考株序列同源性介于97.9%~99.9%。进化树分析表明,YZ株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外分离株有一定差异。  相似文献   

猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建     

王淑娟  陈红英  魏战勇  刘金朋  耿静微  崔保安 《华北农学报》2011,(5):71-75

采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2),RT-PCR产物进行T-A克隆并测序,获得了猪IL-2基因序列.将BamH Ⅰ酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamH Ⅰ酶切并去磷酸化的pSY538载体上,通过PCR、酶切和测序鉴定,筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2.NotⅠ酶...  相似文献   

猪细小病毒感染PK-15细胞抗病毒相关因子转录变化的分析     

李厚伟  魏战勇  尹海燕  陈红英  李金磊  韩志涛  崔保安 《畜牧兽医学报》2011,42(1)

为了解猪细小病毒(PPV)感染后引起干扰素及其相关细胞因子的反应,探讨宿主一病毒之间的作用关系,作者运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR 2、MHC-I、MHC一Ⅱ、MX1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录水平.结果显示,PPV感染PK-15细胞12h病毒开始大量迅速增殖,48 h达到最高峰;PPV感染后可引起PK-15细胞中IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-I、MHC-Ⅱ、Mxl、iNOS、2-5AS、RNase I.和IRF-3的转录量显著增加,其中Mχ1基因在24 h转录量达到8 423倍.猪细小病毒感染可引起PK-15细胞抗病毒相关因子转录增加.  相似文献   

内毒素诱导牛乳腺炎时乳房淋巴和奶中细胞因子的变化     

金喜新  陈红英  崔保安  王川庆 《上海畜牧兽医通讯》2004,(3):30-31

牛乳腺中适度的炎症反应是乳腺感染预后良好所必需的。前细胞因子，包括白介素和TNF-α等，启动乳腺组织炎症反应并诱导白细胞迁入乳房内。  相似文献