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41.
供体核种类对水牛核移植效果的影响 总被引:11,自引:2,他引:11
采用电融合法和直接注射法进行核移植,以比较不同来源和不同类型水牛供体细胞的核移植效果。当用电融合法进行核移植时,成体耳部成纤维细胞的融合率(46.0%)、卵裂率(53.9%)和囊胚发育率(10.9%),均显著低于胎儿成纤维细胞(64.5%,70.1%和21.6%)、胎儿皮肤细胞(71.5%,70.8%和22.1%)以及卵巢颗粒细胞(88.2%,79.1%和25.5%);后三种细胞间的卵裂率和囊胚发育率无显著差异,但卵巢颗粒细胞的融合率显著高于胎儿成纤维细胞和胎儿皮肤细胞(P<0.05)。当用直接注射法进行核移植时,胎儿皮肤细胞注核后的存活率(78.2%)、卵裂率(41.6%)均显著低于成体耳部成纤维细胞(88.6%和57.4%)和胎儿成纤维细胞(85.8%和65.0%)。胎儿成纤维细胞注核后的卵裂率和囊胚发育率(23.3%)均显著高于胎儿皮肤细胞(10.1%)和成体耳部成纤维细胞(12.0%)。结果表明:(1)采用直接注核法进行核移植时,胎儿成纤维细胞作为核供体较为合适,而采用电融合法进行核移植时,用颗粒细胞作核供体更为适宜;(2)胎儿成纤维细胞的核移植效果好于成体成纤维细胞。 相似文献
42.
BRL饲细胞及血清浓度对体外小鼠精原干细胞的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层.采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞合胞体数量明显增加,同时大多数精原细胞逐渐退化。培养1周后,大多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈圆球形,表达碱性磷酸酶。不同条件培养体系中的精原细胞及精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养20~30d时均有少量精原干细胞存活。这说明BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;培养液中高浓度胎牛血清对精原干细胞存活和增殖无明显影响,但能促进睾丸体细胞增殖。 相似文献
43.
为探讨水牛睾丸生精上皮细胞冷冻保存的适宜冷冻保护剂及其浓度,在DMEM中分别添加不同浓度的冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)、甘油(G)、丙二醇(PG)和乙二醇(EG),以及10%的胎牛血清(FBS),对3~5月龄水牛生精上皮细胞进行冷冻保存,解冻后台盼蓝染色测定细胞活率.结果显示,当以0%,5%.10%,15%,20%DMSO添加时,10%DMSO组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组(P<0.05);当以0%,20%,25%,30%,35%,40%G添加时,35%G组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组(P<0.05);当以0%,5%,10%,15%,20%,25%PG添加时,15%~25%PG各组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组(P<0.05),但以20%PG组为最高;当以0%,5%,10%,15%,20%EG添加时,5%~20%EG各组的细胞解冻后活率均显著高于0%EG组,但以10%EG组为最高;而对4种冷冻保护剂各最优浓度组的细胞解冻后活率比较,10%DMSO、35%G组的细胞活率均显著高于20%PG、10%EG组(P<0.05).结果表明,以添加10%DMSO或35%G于含10%FBS的DMEM冷冻液中,采用两步慢速冷冻,液氯保存,37℃水浴1 min解冻,是一种具有较高复苏率的冷冻保存水牛生精上皮细胞的方法. 相似文献
44.
采用4×4拉丁方设计,研究聚乙烯吡咯酮(PVP)溶解促卵泡素(FSH)一次肌肉注射对奶牛活体采卵效率和体内血清FSH含量的影响。将8头荷斯坦空怀母奶牛随机分为4组,每组2头,分别用5mgFSH 5mL15%PVP(15%PVP组)、5mgFSH 5mL30%PVP(30%PVP组)、5mgFSH 5mL生理盐水(对照组)和常规注射FSH(常规组)处理供体奶牛。试验期4个月,每月处理1次,各组均为处理后4d应用B型超声波导引采卵。结果如下:30%PVP组每头次平均可采卵泡9个,获可用卵母细胞4枚,与常规组比较差异不显著(P>0.05),但与对照组比较差异显著(P<0.05);15%PVP组每头次平均可采卵泡6个,获可用卵母细胞2.25枚,与对照组比较差异显著(P<0.05);体内血清FSH浓度,30%PVP组与常规组变化趋势相似,维持适宜FSH浓度时间较长,15%PVP组次之,而对照组注射后4~12h血清FSH浓度较高,以后急剧下降,表明PVP可延长FSH在体内存留时间,但以30%PVP效果最佳。 相似文献
45.
46.
不同激素对高产荷斯坦奶牛超排效果的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
比较不同激素对高产荷斯坦奶牛超数排卵效果的影响,结果发现:供试的3种促卵泡素(FSH)制剂中,加拿大生产的制剂(FOLLTROP IN-V)超排效果比中国科学院动物研究所、澳大利亚生产的FSH好,可用胚胎比率达94.2%,平均每头可用胚胎数达9.84±4.76枚;加拿大生产的FSH(FOLLTROP IN-V)进行荷斯坦奶牛超排处理效果好于美国S igm a公司生产的孕马血清(PM SG)(可用胚胎数,9.06±2.78枚/头vs 4.54±2.12枚/头);超排母牛授精后注射促排卵素3号(LHRH-A 3),Ⅰ级胚胎比率可达57.3%,明显高于促黄体素(LH)、绒膜促性腺激素(HCG)两组(Ⅰ级胚胎分别为17.4%和19.3%),表明LHRH-A 3可提高胚胎质量。 相似文献
47.
通过研究不同受体胞质对核移植效果的影响,结果发现:部分体外成熟16~18 h的牛卵母细胞,其细胞核已完成成熟,胞质可直接用于核移植而不需进行激活处理,直接进行核移植囊胚率达7.7%;体外成熟培养(IVM)30 h的TⅡ期受体胞质较IVM 20~22 h激活的TⅡ期胞质核移植效果差,不适宜作受体胞质;MⅡ期胞质核移植效果优于TⅡ期胞质,两组囊胚率分别为11.7%和5.2%(P<0.05)。 相似文献
48.
本研究探讨了水牛供体细胞不同培养处理方法对细胞周期及其核移植效果的影响。流式细胞仪分析供体细胞周期的结果显示,水牛胎儿耳皮成纤维细胞或颗粒细胞,在增长期、汇合长满期或经血清饥饿培养或0.1μg/mL蚜栖菌素(APD) 0.5%胎牛血清(FBS)培养处理后,G0 G1期细胞比率差异显著(P<0.05),其中以0.1μg/mL APD 0.5?S培养处理的G0 G1期细胞比率最高(87.89%和89.04%);而增长期的G 2 M期的细胞比率以及汇合长满期的S期细胞比率明显高于其他三组,但经血清饥饿处理后,DNA碎片明显高于其他三组(P<0.05)。当分别以0.1μg/mL APD 0.5?S培养处理后的水牛胎儿耳皮成纤维细胞或颗粒细胞作供核时,重组胚的卵裂率及囊胚发育率,均显著高于血清饥饿处理或汇合长满期的同种供体细胞(成纤维细胞:70.14%vs 58.29%和55.90%,21.33%vs 10.55%和8.72%;颗粒细胞:74.35%vs 60.51%和57.61%,22.17%vs10.26%和9.78%,P<0.05),但汇合长满期或血清饥饿处理的供体细胞构建的重组胚,其卵裂率和囊胚率均没有显著差异(P>0.05)。将经APD处理后的供体细胞构建核移植胚胎,移植给受体水牛后有1头受体水牛妊娠并成功的产下后代。以上结果表明:0.1μg/mL APD 0.5?S预培养处理供体细胞,能有效的抑制细胞停留在G0/G1期,并能提高其核移植胚胎的发育率,而且已成功的获得后代。但在本培养系统中,血清饥饿处理供核细胞是没有必要的。 相似文献
49.
卵巢穿剌术治疗奶牛卵巢囊肿初探 总被引:1,自引:0,他引:1
卵泡囊肿是奶牛常见的卵巢疾病,可以采用多种激素如孕酮、人绒毛膜促性腺激素等治疗,因处理方法不同,治愈率为25~50%;也曾有人用一只手经直肠壁握住卵巢,另一只手持短针头经阴道穹窿穿剌卵巢来消除囊肿,但因牛的骨盆空间有限,两只手同时操作不易,如果以手挤破囊肿的卵泡,有造成出血过多的危险.为探讨简便有效的治疗卵泡囊肿的方法,特进行本治疗试验. 相似文献
50.