黄粉虫酪氨酸羟化酶基因的克隆与序列分析     

刘晶晶  韩宏岩  许维岸 《安徽农业科学》2011,39(17):10133-10134

[目的]克隆鞘翅目昆虫黄粉虫酪氨酸羟化酶（TmTH）基因。[方法]采用eDNA末端快速扩增（RACE）技术和PCR方法克隆了鞘翅目昆虫黄粉虫‰掰基因,并对其进行了生物信息学分析。[结果]‰ⅢcDNA全长2103bp,包含1605bp的开放式阅读框,可编码534个氨基酸残基,蛋白质分子量为60.66kD,等电点为5．70,构建了其系统进化树。[结论]m掰基因的克隆为鞘翅目昆虫酪氨酸’羟化酶的研究提供了参考。  相似文献   

家蚕表皮多酚氧化酶的分离纯化及酶学性质研究     

马晓春  韩宏岩  许维岸 《安徽农业科学》2009,37(17):7870-7871

[目的]分离纯化家蚕多酚氧化酶,并对其性质进行分析研究。[方法]采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、蛋白质电泳等方法。[结果]多酚氧化酶分子量约为81kD;最适温度为30℃;最适pn值为7．0。低浓度金属离子Ag^＋、Ca^2＋、Mn^2＋、Zn^2＋对多酚氧化酶有一定的激活作用,而高浓度有抑制作用。[结论]金属离子对家蚕多酚氧化酶的影响很大,值得更深入的研究。  相似文献   

极端嗜热菌Thermus thermophilus HB 27中天冬氨酸激酶在大肠杆菌中表达、纯化及酶学性质研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李敬坡  韩宏岩  夏勇  孟凡国  蔡平  许维岸 《山东农业大学学报(自然科学版)》2009,40(4)

为获得具有热稳定性的天冬氨酸激酶,从极端嗜热菌 Thermus thermophilus HB27基因组中扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因,构建重组质粒,并在Escherichia coli BL21 (DE3)中进行表达,得到了较高的表达量.经热处理纯化后测定重组天冬氨酸激酶(tAK)的最适pH为7.5,最适反应温度为80 ℃, 80 ℃半衰期是18 h.酶动力学分析表明tAK的KmATP为0.23 mmol/L,Vmax ATP为840.34 nmol/(L·min),KmAsp为0.95 mmol/L,VmaxAsp为190.76 nmol/(L·min).赖氨酸和甲硫氨酸对tAK活性没有抑制作用,当苏氨酸浓度大于0.5 mmol/L时,对tAK活性有明显抑制作用,并且抑制作用与苏氨酸呈现浓度依赖性.  相似文献