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71.
家蝇溶菌酶1基因的克隆、序列分析及原核表达 总被引:1,自引:1,他引:0
采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),对鸡致病性大肠杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库(SSH)中筛选得到家蝇溶菌酶1基因((Musca domestica lysozyme-1,MdL-1)进行扩增,测序分析得到一个全长为537bp的cDNA片段,其开放阅读框(ORF)432bp,与Genbank中登录号为AY344589.1基因同源性为96%。构建重组表达质粒pET-32a-MdL-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β—D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分析显示。表达产物大小约为34kD,与预期蛋白大小一致。结果表明,利用RACE技术克隆得到MdL-1全长基因并在大肠杆菌中获得了表达,为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。 相似文献
72.
73.
苷肽注射液对鼠致突变作用的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
通过Ames试验、骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验研究了苷肽注射液对鼠致突变作用的影响。采用多氯联苯(PCB)诱导的大鼠肝匀浆(S9)混合液作为体外代谢活化系统进行Ames试验;采用间隔24 h小鼠腹腔注射0.07,0.13,0.33,0.66 g/kg受试药品法进行骨髓细胞微核试验;采用小鼠腹腔注射0.17,0.33,0.66g/kg苷肽注射液进行精子畸形试验。结果表明:Ames试验受试药品对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100T、A102 4菌株(加与不加S9)均未呈现遗传毒性;骨髓细胞微核试验各剂量试验组微核率与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05);精子畸形试验各剂量试验组精子畸形率与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05)。 相似文献
74.
吡喹酮在绒山羊体内药代动力学的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
应用反相高效液相色谱法测试了 6只健康绒山羊以每千克体重 10 0mg剂量口服给药后吡喹酮在体内的血药浓度 ,并进行了药代动力学研究 ,应用非线性最小二乘法处理 ,实验数据参数用一室模型描述。在口服给药后 ,经过短暂的迟滞期 [Lagtime =(0 2 3987± 0 0 95 39)h],血药浓度迅速上升 ,吸收相很快完成[t1/ 2ka=(0 33899± 0 192 94)h],达峰时间tp=(1 6 45 6 8± 0 43788)h ,之后是一缓慢的消除相 [t1/ 2kel=(6 2 3789± 0 70 6 2 7)h],表观分布容积Vd=(2 3 6 8130± 13 16 197)L/kg ,机体清除率CLB =[(2 6 2 3 46±1 473 10 )mg/(kg·h) ],药时曲线下面积AUC =[(5 0 0 73 2 7± 2 6 12 482 ) μg/(mL·h) ],最高血药浓度Cmax=(4 89990± 2 830 6 4) μg/mL。对吡喹酮在绒山羊体内血药浓度实测值与理论值进行卡平方检验 ,结果表明二者之间没有显著性差异 (P >0 0 5 )。 相似文献
75.
研究了以“高温豆粕”为原料生产的高纯度大豆低聚肽在长白猪体内的药代动力学。结果表明:灌服后5 min进入血液,达峰时间10 min,半衰期为12 h。高纯度大豆低聚肽在最大给药剂量(按体重)30 g/kg时,无中毒现象出现,未测出半数致死量。急性毒性试验证明高纯度大豆低聚肽无毒。 相似文献
76.
77.
78.
79.
利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质粒pPIC9K-MDAP-2,将线性化的重组质粒电击转入毕赤酵母(P.pastoris)感受态GS115细胞内,将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-SDS-PGAE检测表达产物的大小,经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MDAP-2获得高效表达,蛋白分子量为7.8 kD,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌与沙门氏菌均具有体外抑菌活性。MDAP-2基因的成功表达为进一步研究表达产物的生物学及免疫学活性奠定基础。 相似文献
80.
禽毒菌净对小白鼠免疫功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
禽毒菌净是由中药经过精细加工提取而制成的中药冲剂 ,具有抗菌、抗病毒作用。采用常规方法研究了不同剂量的禽毒菌净对小白鼠免疫功能的影响。结果表明 :高剂量组小白鼠血清凝集素 (血清抗体稀释度为 19 10± 1 85 )与对照组 (10 80± 1 75 )比较差异极显著 (P <0 0 1) ,中剂量组 (16 0 0± 1 5 6 )与对照组(10 80± 1 75 )比较差异显著 (P <0 0 5 ) ;高剂量组血清中溶血素含量 (2 5 4 0± 6 7)U/mL与对照组 (139 0±2 9)U/mL比较差异极显著 (P <0 0 1) ,中剂量组 (2 4 5 0± 4 8)U/mL、低剂量组 (2 0 3 0± 3 7)U/mL与对照组 (139 0± 2 9)U/mL比较差异均显著 (P <0 0 5 ) ;对小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能 ,吞噬率高剂量组(76 0± 5 8) %与对照组 (33 0± 2 7) %比较差异极显著 (P <0 0 1) ,中剂量组 (6 1 0± 4 9) %与对照组比较差异显著 (P <0 0 5 )。禽毒菌净对大白鼠血浆蛋白 3个剂量组均高于对照组 ,高、中剂量组γ 球蛋白含量与对照组比较差异显著 (P <0 0 5 )。 相似文献