福建省羊口疮的流行病学调查与PCR诊断          下载免费PDF全文

董晓宁  李文杨  刘远  高承芳  张晓佩  林碧芬 《家畜生态学报》2013,34(1):47-48

用PCR方法快速检测福建各地区临床发生羊口疮症状病羊病毒。结果表明,该病在福建省发病率为10%～20%之间,死亡率小于10%;PCR检测结果显示病羊样品可扩增出507bp的特异性片段,健康羊只样品则无条带,首次利用PCR方法确定羊口疮病毒在福建省的存在,从而证明了羊口疮在福建省山羊中的流行。  相似文献   

两种不同散养模式对河田鸡生长性能、肉品质及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响     

高承芳 《黑龙江畜牧兽医》2023,(6):43-48

为了明确林下自然草场放牧和林下人工草场放牧模式对河田鸡生长性能、肉品质及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响，试验将300只体况相近的30日龄健康河田鸡(公母各半)随机分成林下自然草场放牧组(对照组)和林下人工草场放牧组，每组150只。对照组林地不经过处理自然放牧饲养河田鸡，林下人工草场放牧组林地种植各种混播牧草品种，待草地封垄后进行放牧饲养河田鸡，两组均补饲全价颗粒饲料，均放牧100 d后出栏，出栏后测定试验鸡只生长性能指标(初始重、末重、平均日采食量、平均日增重、料重比)、肉品质指标(蛋白质、总氨基酸、粗脂肪、水分)、血清生化指标(总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷氨酸氨基转移酶、尿酸、尿素氮、葡萄糖、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)、免疫指标[白细胞介素-2 (IL-2)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)]与抗氧化指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)]。结果表明：与对照组比较，林下人工草场放牧组平均日采食量、料重比极显著降低了7.2%和10.3%(P<0...  相似文献   

兔源A型多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立     

王锦祥  付环茹  孙世坤  陈冬金  高承芳  桑雷  谢喜平 《福建畜牧兽医》2023,(5):20-23

为建立一种特异性强且敏感性高的兔源A型多杀性巴氏杆菌快速检测方法，本研究以兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1和hyaD基因为目的基因，设计2对特异性引物进行双重PCR扩增，经反应条件优化，建立检测兔源A型多杀性巴氏杆菌的双重PCR方法。该方法的最佳退火温度为57.8℃，最佳混合引物浓度为0.8μmol/L。该方法特异性强，对兔源A型多杀性巴氏杆菌为kmt1和hyaD基因双阳性，对兔源D型和F型多杀性巴氏杆菌为kmt1基因单阳性，对兔源其它细菌性病原和阴性对照则均为阴性。该方法敏感性高，对兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1和hyaD基因的最低检出限分别为1×10³拷贝/μL和1×10⁴拷贝/μL。该方法重复性好，且与已报道的多重PCR方法的符合率高达96.12%。本研究建立的双重PCR方法对兔源A型多杀性巴氏杆菌具有良好的特异性和敏感性，且重复性好、准确性高，为该病原的快速检测提供了有力的技术支持。  相似文献   

GnIH基因克隆、表达及对幼龄公兔生殖激素的影响     

桑雷  陈冬金  孙世坤  高承芳  王锦祥  陈岩锋  谢喜平 《畜牧兽医学报》2023,54(1):201-212

旨在获得兔促性腺激素抑制素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)基因，检测其在不同组织和不同发育阶段下丘脑中的表达水平，研究其对幼龄公兔生殖激素分泌的影响。本研究以90日龄健康闽西南黑兔公兔为研究对象，采用RACE技术(rapid-amplification of cDNA ends)从下丘脑组织中克隆出GnIH基因，并对序列进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR方法(real-time quantitative PCR,qPCR)检测GnIH基因mRNA在90日龄公兔不同组织表达水平(n=5)及11、30、60、90、120、150日龄公兔下丘脑中的表达水平(n=6);连续10 d向80日龄公兔分别注射0、0.5、5和50μg鹌鹑GnIH相关肽(n=10)。第11天早上采集耳静脉血液后，屠宰公兔，采集睾丸组织，分别检测血清中生殖激素浓度(GnRH、FSH、LH、INHB和T)和睾丸组织中睾酮合成相关酶基因(StarR、3β-HSD和p450scc)mRNA的表达水平。结果表明，兔GnIH基因cDNA全长904 bp,包含5′UTR 41 bp...  相似文献   

兔源F型多杀性巴氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立     

王锦祥  林松华  陈冬金  孙世坤  陈岩锋  高承芳  桑雷  谢喜平 《中国预防兽医学报》2023,(2):156-160

为建立特异性强且敏感性高的兔源F型多杀性巴氏杆菌(Pm)快速检测方法，本实验根据F型Pm fcbD基因的保守序列设计特异性引物和探针，经反应条件优化，建立了检测兔源F型Pm的荧光定量PCR方法。利用该方法检测兔源F型Pm、兔源A和D型Pm、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌等临床常见兔源病原菌，结果显示，该方法仅对兔源F型Pm检测为阳性，其余病原菌均为阴性，特异性强。利用该方法分别检测10倍倍比稀释(1×10⁸拷贝/μL～1×10⁰拷贝/μL)的兔源F型Pm基因组DNA，进行敏感性试验，结果显示该方法的检测限为10拷贝/μL，敏感性分别是已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的100倍和10倍，敏感性高。利用该方法对不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验，结果显示，批内和批间变异系数均小于3%，重复性好。利用该方法检测64份已知结果的临床样品，结果显示该方法的检测结果与已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法检测结果的符合率均为100%，准确性高。本研究首次以fcbD为靶基因建立兔源F型Pm的荧...  相似文献