茶菊再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立     

卢龙斗  李爱花  彭仁海  高武军  邓传良  周娜  杨绪勤 《安徽农业科学》2009,37(21):9872-9875

[目的]建立高效的茶菊再生体系和卡那霉素筛选体系。[方法]以茶菊叶盘和茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的6-BA和N从设计不同的培养基,研究茶菊叶盘和茎段的最适分化条件,并进行卡那霉素敏感性试验,研究其对不定芽诱导和生根的影响。[结果]茶菊叶盘和茎段直接分化不定芽的最适培养基分别为MS＋6．BA1．0mg／L＋NAA0．3mg／L和MS＋6．BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L,茶菊生根较容易,在5种培养基上生根率均可达100％;茶菊对卡那霉素反应较为敏感,20．0mg／L卡那霉素即可抑制叶盘的分化,40．0mg／L的卡那霉素可抑制茎段的分化,30．0mg／L卡那霉素可抑制小苗的生根。6cm左右长的生根无茵苗经炼苗和移栽后成活率为100％。[结论]该试验为茶菊的进一步遗传转化提供了基础。  相似文献   

刺儿菜性别连锁的同工酶标记分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

洪达  孙富从  姬艳克  高武军  邓传良  卢龙斗 《安徽农业科学》2008,36(9):3540-3542

[目的]利用刺儿菜进行同工酶分析,确定适合作为遗传标记的同工酶类型。[方法]采用聚丙烯酰胺不连续垂直平板电泳(PAGE)技术,对刺儿菜雌雄株花和叶片中过氧化物酶(POD),苹果酸脱氢酶(MDH),苹果酸酶(ME)及酯酶同工酶(EST)的差异进行比较分析。[结果]POD、MDH及EST同工酶在刺儿菜雌雄株的花和叶中存在明显的性别差异。在花和叶片中,POD同工酶均发现了性别特异的酶带,MDH同工酶仅发现在花中具有1条雄性特异带,苹果酸酶同工酶(ME)没有明显的性别差异。除花中的酯酶酶谱外,两种同工酶在同一性别的不同个体间,酶谱无明显差异。[结论]同一种酶在刺儿菜叶片和花中的雌雄株酶谱有明显差异。  相似文献   

温度对根癌农杆菌转化效率的影响   总被引：6，自引：0，他引：6  

高武军  魏开发  孙富丛  卢龙斗  王景雪 《华北农学报》2004,19(2):81-83

以油菜下胚轴和玉米的幼胚为材料，研究19，22，25，28和31℃5个培养温度对含有Bar基因和几丁质酶基因的根癌农杆菌菌株LBA4404的转化效率的影响。结果表明，温度对玉米、油菜的转化效率都有明显的影响，玉米和油菜转化的最佳温度为25℃；25℃条件下，玉米的转化效率与其余4个温度条件下的转化效率有显著的差异；22℃条件下的油菜转化效率和25℃下的差异不显著。  相似文献   

PEG6000对菠菜性别分化的影响及分子机制初探     

王少净  张卫丽  刘新鑫  杜亚茹  王冰肖  李忠徽  闫宁宁  李书粉  高武军 《湖北农业科学》2016,(20):5275-5278

菠菜(Spinacia oleracea L)是研究雌雄异株植物性别分化的模式材料,其性别分化不但受到性别决定基因的控制,还受到环境条件的影响,干旱是其中的一个重要因素,但是关于聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)模拟土壤干旱环境对菠菜性别分化影响的分子机制目前尚未见报道。试验以日本大叶菠菜(S.oleracea cv.Japanese leaves)为供试材料,利用不同浓度的PEG6000进行处理,研究干旱环境对菠菜性别分化的影响。采用温室盆栽种植方式,分别用5%、10%的PEG6000模拟土壤干旱环境对盆栽菠菜处理72 h,处理株数均为100株,并同时设置对照组。结果表明,与对照组雌雄比例(0.96)相比,PEG60005%处理组的雌雄比例(1.09)与10%处理组(0.97)均接近于对照组;对发生性反转数进行统计,结果表明,PEG6000 10%处理组低于5%处理组;利用菠菜Y染色体紧密连锁的雄性特异标记T11A对处理前、后的植株进行鉴定,发现菠菜植株出现了性反转现象,且均为雌株转变为雄株。琼脂糖凝胶电泳结果显示,性反转后,雄性特异条带也随之出现。试验首次对PEG6000模拟土壤干旱环境对菠菜性别分化影响的分子机制进行了探究,其研究结果对于进一步揭示菠菜性别分化机理具有重要意义。  相似文献   

挖坑造林一体机设计分析     

高武军 《林业机械与木工设备》2018,(5)

介绍了目前我国使用比较普遍的几种挖坑机,提出了一种将挖坑与植苗作业合二为一的新型挖坑造林一体机。通过对该机螺旋挖坑铲参数的相关研究,得知螺旋挖坑铲的重力变化是影响其受力的主要因素。运用Pro/E软件对挖坑造林一体机整机进行三维仿真,根据最优化原理对整机进行了运动模拟并加以分析,其可为今后挖坑造林一体机的改进提供参考。  相似文献   

石刁柏Ty1-copia反转座子逆转录酶序列克隆及异质性分析     

石晓卫  李书粉  邓传良  卢龙斗  高武军 《湖北农业科学》2016,(18):4819-4823

对石刁柏(Asparagus officinalis)品种UC309及TD818的两个反转座子逆转录酶序列进行了PCR扩增并对其在基因组中的异质性进行了分析。结果表明,s101366和s107518两个转座子序列均属于Ty1-copia反转座子,是Ty1-copia反转座酶的部分保守区序列,其长度分别为636和653 bp。对随机获得的两个反转座子测序表明两个反转座子存在一定的异质性,其突变主要是由于发生了碱基置换,其中碱基转换分别占到80.4%和80.0%,T圮C和G圮A转换的比例差异不显著。通过对两个石刁柏品种(TD818和UC309)中获得的序列聚类分析发现,s101366和s107518均未表现出性别间、品种间及近缘种间的保守性,甚至表现出了种内异质性大于种间的异质性特征。这说明了两个反转座子处于高度变异的状态,是产生染色体不稳定的重要因素之一。  相似文献   

Fe^＋离子注入诱变莲花突变体的SRAP分析     

贾彦彦  邓传良  高俊  任映雪  王宁娜  高武军  张涛  李鹏飞  卢龙斗 《核农学报》2011,25(5):904-909,958

为了在分子水平上对离子注入诱变莲花突变体进行鉴定,本研究对同一剂量Fe^＋离子注入诱变的白洋淀红莲（Baiyangdian red lotus）突变体及其对照的基因组进行SRAP扩增,并利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对SRAP-PCR扩增产物进行分析。在优化好的SRAP体系基础上,从121对引物组合中筛选出了10对可以稳...  相似文献   

菠菜性别相关EST-SSR标记的开发及应用     

邓传良  高俊  曹莹  秦瑞云  高武军  卢龙斗 《广西农业生物科学》2012,(5):467-472

为了明确菠菜EST序列中SSR的总体特点,开发菠菜EST-SSR引物;为利用EST-SSR引物进行菠菜性别相关特异序列的克隆奠定基础,本文从NCBI上获得1093条EST,利用在线软件SSRIT检测所含SSR序列,并进行分析。共检索出68条SSR序列,分布于64条EST中,检出率为6.22%,包括22种重复基元。其中二核苷酸重复基元的EST-SSR占主导地位,占总SSR数目的32.3%。利用在线引物设计软件Primer3.0设计了7对EST-SSR引物,在适合的PCR反应体系下,分别以雌、雄菠菜DNA基因组为模板,对设计的EST-SSR引物进行筛选,结果显示以EST序列HS097148设计的一对引物从菠菜雌雄基因组中扩增出一条雄性特异的条带,表明通过菠菜EST-SSR引物获得菠菜性别相关特异序列是可行的。  相似文献   

葎草DNA的提取及AFLP标记反应体系的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

肖理慧  高武军  张小莉  卢龙斗  邓传良  路淑霞 《分子植物育种》2008,6(2):393-398

本文对CTAB法、改良CTAB法和SDS法提取雌雄异株植物葎草(Humulus scandens L.)基因组的方法进行了比较分析,并在此基础上对影响葎草AFLP扩增的关键因素模板浓度、酶切时间、选择性扩增模板浓度进行了优化.结果表明,改良的CTAB法更适合葎草基因组DNA的提取;同时利用AFLP分子标记技术,采用EcoI-Mse I酶切组合,共筛选27对引物组合,确定了适用于葎草AFLP反应的最佳酶切连接、预扩和选扩体系.同时发现2对引物组合E-ACG M-CTA和E-AAC M-CAC共扩增出5条雌雄性别特异条带.  相似文献   

菠菜性别相关的RAPD标记     

秦瑞云  杨金华  贾彦彦  张准超  高武军  卢龙斗  邓传良 《江西农业大学学报》2009,31(6)

菠菜为雌雄异株植物,用CTAB法提取其雌雄成株幼嫩叶片总DNA分别构建雌、雄株的DNA池,以之为模板,用已优化的RAPD体系扩增,在160条随机引物(10 bp)和40个引物对中筛选出44个扩增效果较好的单引物,再从中进行进一步筛选.研究发现,引物S1497扩增出1条雄性特异性条带,检测发现该条带只在雄株DNA池中出现.回收纯化该特异扩增片段,将其连接于pUCm-T载体,转化进大肠杆菌JM109菌株,并进行检测及测序.测序结果显示,该片段全长1 978 bp,该特异条带的获得为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础.  相似文献