苏云金芽孢杆菌Cry8Ca2蛋白的纯化与活性的研究          下载免费PDF全文

吴洪福  ;张彦彩;郭淑元;张杰;王容燕;高继国 《植物保护》2007,33(4):29-32

cry8 Ca2基因是本实验室自行分离克隆的一种新型苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白基因,其表达130 kDa蛋白对铜绿异丽金龟(Anomala corpulenta)和黄褐异丽金龟(A.exoleta)幼虫具有较高的活性。本研究对Cry8Ca2蛋白原毒素及胰凝乳蛋白酶消化片断的纯化条件及活性进行研究,最适的消化条件为质量比1∶20,37℃,消化1 h。通过阴离子交换层析得到纯的活性毒素蛋白。用原毒素与纯化的毒素对铜绿丽金龟幼虫进行生测,Cry8Ca2原毒素蛋白的LC₅₀为0.47μg/g土,纯化的毒素的LC50为0.08μg/g土,毒素的杀虫活性可以达到原毒素的6倍。  相似文献   

施用ABT5号增产灵对甜菜农艺性状和内源激素含量的影响     

马凤鸣  迟玉杰  高继国  韩天富  李文华  马秀峰  王继先 《中国糖料》1993,(3)

在框栽和田间条件下研究了ABT5号增产灵浸种处理和叶喷处理对甜菜农艺性状及对甜菜叶片和根系内源激素含量变化的影响。结果表明,ABT5号处理明显增加根中赤毒素(GA_(1、3、4、7))、生长素(IAA)含量。明显增加根及叶中细胞分裂素(DHZR_S)含量,降低脱落酸(ABA)含量,导致刺激生长的激素(DHZR_S GA_(1、3、4、7) IAA)与抑制生长激素(ABA)的比例在根组织中表现出浸种处理>叶喷处理>CK的结果。这是ABT5号处理后甜菜块根增产的生理机制之一。本实验证实,ABT5号处理仅促进主根生长,不形成簇状叉根。浸种处理在框栽和田间试验中分别比对照增产12.58％和13.10％,叶喷处理比对照增产9.85％和10.67％,ABT5号处理对块根含糖率没有影响。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌cry1Ac28基因的克隆及原核表达     

曲步云  李海涛  李明  高继国 《东北农业大学学报》2010,41(10)

研究旨在克隆苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Q-12的cry1Ac28基因并在原核载体中表达。应用PCR-RFLP法鉴定出Bt Q-12中含有cry1Ac基因,根据已知的cry1Ac全长基因序列设计特异引物,以Bt Q-12基因组DNA为模板扩增cry1Ac全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pEB相连接获得含有cry1Ac全长基因的重组质粒pEB-cry1Ac,经过序列分析表明,该基因编码区为3 537 bp,编码1 178个氨基酸,分子质量为133.3176 ku,pI为4.885,为弱酸性蛋白质,亮氨酸(Leu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)三种氨基酸含量最高,分别为8.06%、7.80%、7.72%,该基因在大肠杆菌BL21(DE3)菌株能够正常表达133.3176 ku蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为FJ610439,并由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry1Ac28。为进一步研究cry1Ac28蛋白功能和活性打下了良好的基础。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌应用研究进展     

刘明  李海涛  刘荣梅  高继国 《黑龙江八一农垦大学学报》2014,26(4):9-13

由于苏云金芽胞杆菌(Bt)具有特异性高,对人畜无害,对环境友好等优点,因而其抗虫基因成为目前研究历史最久、应用最成功、使用最广泛的抗虫基因。现简述了cry基因资源的现状及在生物杀虫制剂、转基因作物中的研究进展。  相似文献   

Bt工程菌高性能载体研究进展     

李先军  李杰  李海涛  柏锡  吕明  于龙凤  高继国 《东北农业大学学报》2006,37(6):829-833

近30年来,以苏云金杆菌为基础利用ICPs基因构建性能优良的重组菌株和生产遗传重组杀虫剂成为生物农药公司的主要目标。生物工程杀虫剂相继商品化,用于防治重要经济作物的害虫。为了增强工程菌的杀虫效果,研究者在构建高性能载体方面开展了大量研究并取得显著进展。文章对该领域研究进展做一简要综述。  相似文献   

植物抗非生物胁迫基因工程的研究进展     

杨贵春  高继国  邢少辰 《吉林农业科学》2005,30(4):25-30

非生物胁迫因子有干旱、盐渍、低温、风害、重金属、臭氧和紫外辐射等,是制约植物生长、提高农作物产量与质量的重要因素。主要综述了植物抗旱、耐盐和耐低温3方面基因工程的研究进展,论述了植物抗逆基因工程研究策略及今后的研究方向。  相似文献   

大豆QTLs研究进展     

李一丹  齐东来  高继国 《东北农业大学学报》2005,36(1):95-98

文章从形态性状、生育期性状、产量品质性状等5个方面,介绍了大豆数量性状基因定位的研究进展。  相似文献   

耐大豆疫霉根腐病QTL定位的研究   总被引：6，自引：3，他引：6  

韩英鹏  李文滨  Kangfu Yu  Vaino Poysa  文景芝  高继国 《大豆科学》2006,25(1):23-27

利用1200个RAPD随机引物和341对SSR引物对Conrad×OX760的重组自交系(RIL)F2:6群体的耐大豆疫霉根腐病基因进行QTL定位。试验设两个地点、两个年限,在MLG D1b+W和MLG M连锁群上检测到3个QTL,即QP-1(OPL18-800bp)、QP-2(OPN03-600bp)和QP-3(Satt536和Satt463)。每个QTL对病害损失率的贡献率从13.34%到22.31%不等。QP-1和QP-2经多重QTL分析(Mapmaker/QTL1.1)对两年(2000年和2001年)两点(Wood-slee和Werver)平均病害损失率的贡献率合计达44.5%,QP-3对2001年Woodslee试验点的病害损失率的贡献率为15.2%,QP-1对2000年Woodslee试验点的病害损失率的贡献率为21.55%,对2000年Wever试验点的病害损失率的贡献率16.71%,及对两年两点平均病害损失率的贡献率为22.31%。在大多数生态环境下能稳定的、再次被检测出的QTL,可以作为育种工作中的重点选择指标,用以指导耐大豆疫霉根腐病品种的分子辅助选育。  相似文献   

十株Bt野生菌杀虫晶体蛋白及基因型分析   总被引：2，自引：2，他引：0  

李先军  高继国  齐东来  李一丹  康立功  李海涛 《东北农业大学学报》2009,40(9)

利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析方法,分析了从我国千山地区不同森林地带土壤中分离的10株Bt菌的32类杀虫晶体蛋白基因类型和表达蛋白。研究表明,电镜照片显示晶体形状较为多样,有长菱形、菱形、方形、球形。同时含有cry1、cry7、cry16类基因的有1株菌,同时含有cry1、cry2类基因的有1株菌,含有cry30类基因的有1株菌,含有cry1基因的有3株菌,4株菌不含所鉴定的32类基因。同时也发现,绝大多数含有cry1基因的菌株表达了130ku蛋白,含有cry2基因的菌株表达了60ku的蛋白,含有cry30基因的菌株表达了30ku的蛋白。  相似文献   

茶卡盐湖中耐盐抗真菌芽孢杆菌的分离和鉴定          下载免费PDF全文

邵高祥  束长龙  耿丽丽  高继国  刘贵明  张达  张杰 《中国生物防治学报》2016,32(4):440-448

本试验从茶卡盐湖水及淤泥中分离得到了51株细菌,通过16S rDNA及gyrB基因测序分析初步确定了菌株的分类地位,并测定了各菌株对苹果根腐病菌Fusarium spp.、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici等13株病原菌的抑菌谱及对NaCl的耐受性。共筛选获得13株对13种真菌病害均有抑菌作用的菌株,13株广谱生防菌株在NaCl浓度为10%的LB培养基上都能正常生长,其中菌株10和27在NaCl浓度为15%的LB培养基中的生长速度显著高于生防菌B916。盐湖环境为耐盐生防菌的筛选提供了丰富的资源,本研究获得的耐盐广谱生防菌对盐碱地真菌病害的防治提供了菌株资源。  相似文献