苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性     

崔婷婷  杜立新  彭琦  张杰  高继国  宋福平 《植物保护》2019,45(1):30-36

本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。  相似文献   

吸水链霉菌新种的筛选和鉴定     

高爱丽  王相晶  向文胜  高继国  王晴  姜冰  王丽 《东北农业大学学报》2007,38(3):361-364

从土壤中分离得到一株产生对叶螨等有高活性抗生素的新链霉菌株。该抗生素对各种叶螨(红蜘蛛)、蚜类等都有较高的防治效果。通过对该菌株进行形态特征、培养特征、生理生化、细胞壁组份分析及16S rDNA序列分析,确定该菌种为吸水链霉菌的一株新菌,命名为冰城链霉菌(Streptomyces bingchengensis.n.sp.)  相似文献   

阿苯达唑和奥芬达唑对猪囊尾蚴延胡索酸还原酶的抑制作用     

高继国  高学军  郝艳红 《黑龙江畜牧兽医》2002,1(8):8-9

研究测定了阿苯达唑和奥芬达唑对猪囊尾蚴组织匀浆延胡索酸还原酶活性的抑制作用。结果表明两种经物均能抑制延胡索酸还原酶活性，提示苯并咪唑氨基甲酸酯药物的作用机理可能是非竞争性抑制延胡索酸还原酶复合体，从而导致虫体因能量耗竭而死亡。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌Cry1Ie1蛋白末端缺失的研究   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

吴玉娥  张杰  曹景萍  高继国  黄大昉  宋福平 《植物保护》2003,29(5):15-19

通过PCR扩增法 ,以cry1Ie1全长基因为模板 ,分别得到不同末端缺失的基因片段 ,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达 ,得到 6种末端缺失蛋白。对小菜蛾生物测定结果表明 ,缺失蛋白IE659、IE656分别缺失了C末端60个和63个氨基酸残基 ,对小菜蛾的杀虫活性与Cry1Ie1全长蛋白相当 ;IE648、IE045分别缺失了C末端 71个氨基酸残基和N末端缺失44个、C末端缺失63个氨基酸残基 ,对小菜蛾的活性提高了50% ;IE633、IE105分别缺失了C末端 86个氨基酸残基和N末端缺失 104个、C末端63个氨基酸残基 ,丧失了对小菜蛾的活性。试验明确Cry1Ie1蛋白的最小活性区N端在45～104氨基酸位点之间 ,C端在633～648氨基酸位点之间。  相似文献   

欢迎订阅2006年《烟台果树》     

温四民张桂玲  高继国 《北方园艺》2005,(5):40-40

近年来，城市绿地景观迅速发展，花坛花卉在城市美化中的作用越来越大，主要用于广场、街道、居民小区等主要景区的醒目位置。而目前花坛花卉栽培中还存在着出苗率、成活率低，栽培方法落后，病虫害发病严重等诸多问题，根据多年栽培实践，总结出花坛花卉大面积种植的步骤和方法。  相似文献   

花坛花卉的育苗技术及病虫害防治     

温四民  张桂玲  高继国 《北方园艺》2005,(5)

近年来,城市绿地景观迅速发展,花坛花卉在城市美化中的作用越来越大,主要用于广场、街道、居民小区等主要景区的醒目位置.  相似文献   

苏云金芽胞杆菌cry1Ib6基因的克隆、表达及活性的研究     

张庆丽  李海涛  赵世源  刘荣梅  赵勇  高继国 《中国农业科技导报》2011,13(6):61-65

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)能产生杀虫晶体蛋白(Insecticida Crystal Proteins, ICPs),对敏感昆虫有强烈毒性,而对高等动物和人无毒性。ICPs由cry或cyt基因编码,根据cry1I型基因设计引物,以Bt LB52菌株的质粒DNA为模板,扩增出了全长为2.1 kb的cry1I基因,其能通过表达载体pEB在大肠杆菌中高效表达为79.9 kDa的蛋白。经过AlginX软件分析该蛋白由712个氨基酸组成,分子量为79.9 kDa,等电点为6.54,为弱酸性蛋白质,NCBI Blast比对该蛋白的氨基酸序列与Cry1Ib3的相似性最高为98%,有12个氨基酸的差异。该基因已在GenBank中注册,登录号为ADK38579,并被国际基因命名委员会正式命名为cry1Ib6。它的表达产物对小菜蛾具有较高的毒力,LC50为1.196 μg/mL,为抗虫转基因植物研究提供了新的基因。  相似文献   

新型vip3Aa基因的克隆与杀虫活性的测定   总被引：2，自引：1，他引：1  

赵世源李海涛  张春鸽高继国 《中国农学通报》2012,28(30):191-195

为了给生物防治提供更多的基因资源,以从黑龙江省分离的100株苏云金芽胞杆菌进行PCR vip3类基因鉴定,对vip3类基因进行克隆表达及生物活性测定,为vip基因储备奠定基础。利用vip3类通用引物进行基因鉴定并进行全长基因克隆表达和生物活性测定。结果表明,菌株LB73经Blast对比后发现含有vip3Aa类基因,克隆基因全长序列为2370 bp,编码789个氨基酸残基,分子量为88 kD,并在国际基因库GenBank中登记,其登录号为JQ228436,由Bt δ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为vip3Aa46。构建原核表达系统,并进行杀虫活性的测定。vip3Aa46甜菜夜蛾LC50 4.02 μg/g,棉铃虫LC50 387.72 μg/g。生测结果表明,vip3Aa46表达可溶性蛋白对甜菜夜蛾幼虫具有高毒力;对棉铃虫幼虫具有一定毒力。  相似文献   

分子标记及其在大豆抗性基因定位中的应用进展     

王臻昱  许艳丽  高继国 《大豆科技》2008,(2):12-16

快速发展的分子标记技术在大豆遗传图谱构建、抗性基因定位和辅助育种等方面得到了广泛应用。简要阐述了分子标记的主要类型、原理、特点及其在大豆抗性基因定位方面的应用进展,并对当前分子标记存在的问题及以后的发展前景进行了分析。  相似文献   

Cry1Ba3、Cry1Ia8蛋白对Cry1Ac抗性小菜蛾的杀虫活性研究   总被引：4，自引：2，他引：2  

刘楠  王少丽  宋福平  束长龙  高继国  张杰 《植物保护》2010,36(2)

利用2种苏云金芽胞杆菌原毒素Cry1Ba3、Cry1Ia8及其组合,分别对Cry1Ac抗性种群小菜蛾幼虫进行生物活性测定。结果表明Cry1Ba3、Cry1Ia8对2种目标试虫均有高毒力,LC50分别为0.2175、0.6706μg/mL;Cry1Ba3毒力3倍于Cry1Ia8。2种蛋白混配的结果也表现出高毒力,LC50为0.4375μg/mL,没有显著的协同增效作用,也不存在拮抗。敏感与抗性小菜蛾种群生测结果统计分析比较,结果表明这2种蛋白及其组合与Cry1Ac并无交互抗性。  相似文献