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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88 ad ETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段facC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a( )中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS-PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88 ad ETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原-抗体反应。 相似文献
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产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达 总被引:4,自引:0,他引:4
应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a( )中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选得到可诱导表达K99抗原的工程菌株。经IPTG诱导,分离纯化K99重组蛋白,以其免疫新西兰大白兔,获得重组蛋白的兔抗血清;免疫印迹分析表明,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的K99强毒株姓明显的抗原抗体反应。 相似文献
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江苏地区日本沼虾种质资源的RAPD分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用RAPD技术研究了江苏地区10个日本沼虾群体的遗传多样性和亲缘关系。以40个随机引物(10个碱基)对沼虾基因组DNA进行扩增,选取其中18个扩增产物多态性好的引物进行分析。结果共扩增出234个DNA片段,大小在250~2000 bp之间;126个位点表现为多态位点,多态位点比例为53.85%。常州湖繁保区的日本沼虾遗传多样性最高,遗传多样性指数为0.1742;宿迁骆马湖池塘养殖的日本沼虾遗传多样性最低,遗传多样性指数为0.1263。UPGMA聚类分析表明,常州湖繁保区的日本沼虾和苏州太湖胥口镇渔洋山西南侧水域的日本沼虾亲缘关系最近,总体上亲缘关系和地理位置呈正相关。 相似文献
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K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备 总被引:5,自引:1,他引:4
利用PCR技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的K88菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到E.coli表达载体pET28a(+)中,构建了该基因的原核表达载体p8828,导入E.coliBL21(DE3),得到工程菌株。DSD-PAGE分析结果显示,经IPTG诱导,该亚基基因高效表达出重组K88菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的30%。用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备K88菌毛 相似文献
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为探究间歇性断食饲养对中华绒螯蟹生长性能及免疫功能的影响,于2021年10—12月,以体质量为(9.91±1.50)g的中华绒螯蟹为研究对象,设置5个试验组,其中E00为完全断食组,E25、E50和E75分别为投喂饱食量25%,50%和75%的断食组,E100为对照组;以养殖2 d为周期,第1天对试验组不同程度断食,第2天足量喂食,以此循环,E100正常喂食。结果表明,E00体质量增加量显著大于E100(P<0.05),各试验组饲料消耗量均显著小于E100(P<0.05);各组肝胰腺营养物质含量接近,E50肝代谢能力最强,肝胰腺谷丙转氨酶(ALT)活力与谷草转氨酶(AST)含量和活力均显著强于E100(P<0.05);E25和E50溶菌酶含量高,同时存活率也高于其他组。指出,在2 d为周... 相似文献