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11.
采用 Watson 方法由猪垂体总 mRNA 反转录合成了总 cDNA,合成产率约为12.6%。将总 cDNA 克隆到质粒 pUC19中后,转化大肠杆菌 JM107得到约2500个重组子克隆。用猪生长激素探针进行菌落原位杂交筛选得到2个阳性克隆。对这两个克隆进行多种酶切分析的结果表明,其中质粒 pWH101插入片段长度为830bp 左右,带有全长猪生长激素基因及部分5′端和3′端非编码区。用 Sanger 法分析了此基因5′端203个 bp 的序列,结果除确证己克隆了猪生长激素基因(cDNA)外,还查明了此基因5′端非编码区46bp 的序列。  相似文献   
12.
长期以来,我国农民即习惯以稀料喂猪,而稀薄的程度彼此也极不相同。为了探索以何种程度的稀料喂猪为好,很有必要研究不同摄水量对猪代谢的影响。水对机体代谢有着极为重要的作用虽然很早已是大家公认的事实,但摄入不同水量对动物的代谢发生何种影响则报导很少。1957年,Elizabeth J.Castle 和 M.E.Castle(1)研究了不同摄水量对食物通过猪消化道速度的影响,但未涉及不同摄水量对猪代谢的影响。我们于1963—1964年间研究  相似文献   
13.
鸡血清碱性磷酸酶同功酶酶谱的分析及其组织来源的鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分析来亨和农大黄两种鸡血清的碱性磷酸酶同功酶酶谱,结果发现两种鸡的酶谱是非常相似的。所有的鸡血清都有快带和慢带。快带都是一条,着色较浅。大多数鸡血清的慢带为两条(慢1和慢2),少数鸡为一条,个別鸡为三条。用同法分析了鸡肝、肾、小肠和骨组织的碱性磷酸酶。其结果是肝表现为两条主带,一条的泳动速率相当于血清的慢2(慢带中较快的一条);另一条泳动的更快些,血清中未见到与它相当的带。肠表现一条主带和在主带前面有一条附加的带,肠的主带也相当于血清的慢2。以上提示血清的慢2来自肝和小肠。肾表现出一条主带,它相当于血清的慢1,提示血清的慢1来自肾。骨表现出两条较易扩散的带,一条相当于血清的慢1,另一条相当于血清的慢2,但其前沿已超出血清的慢2。在我们已分析的组织中未见有与血清的快带相当的酶。  相似文献   
14.
成年乳牛骨软症(或骨质疏松症)是一种常发疾病,但迄今没有很好的生化指标协助诊断。近年来虽然报道了许多家畜在发生骨病时血清中碱性磷酸酶活性的改变,但对于乳牛骨病时血清中碱性磷酸酶活性的变化  相似文献   
15.
采用胶原酶分阶段消化法对家兔的原代乳腺上皮细胞进行了分离培养,并且构建了以牛ヂ-乳球蛋白(BLG)基因5,调控序列为启动子、以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因的真核表达载体。将该载体转染兔原代乳腺上皮细胞,然后用不同质量浓度的皮质醇、胰岛素和催乳素诱导。结果表明,用5mg/L催乳素 5mg/L胰岛素 1mg/L皮质醇诱导,在诱导36h后开始有荧光出现。诱导48~60h时荧光更强一些,而未经诱导的细胞GFP则不表达。  相似文献   
16.
关于碱性磷酸酶的研究虽已进行了多年,但迄今未能阐明它的生理功能。不过从最近的一篇综述中可以看出,大家趋于认为它与物质的转运过程或磷酸的可利用性有关系。动物体内的许多组织中都含有碱性磷酸酶。不同组织的碱性磷酸酶的具体生理功能可能不同。1966  相似文献   
17.
采用胶原酶分阶段消化法对家兔的原代乳腺上皮细胞进行了分离培养 ,并且构建了以牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因5′调控序列为启动子、以绿色荧光蛋白 (GFP)基因为报告基因的真核表达载体。将该载体转染兔原代乳腺上皮细胞 ,然后用不同质量浓度的皮质醇、胰岛素和催乳素诱导。结果表明 ,用 5 mg/ L 催乳素 5 mg/ L 胰岛素 1m g/ L 皮质醇诱导 ,在诱导 36 h后开始有荧光出现 ,诱导 4 8~ 6 0 h时荧光更强一些 ,而未经诱导的细胞 GFP则不表达  相似文献   
18.
在摇瓶条件下研究了影响猪生长激素(pGH)基因工程菌表达效率的某些因素。实验结果表明:工程菌 pJW301/JA221在不同光密度时开始诱导,诱导不同时间及不同通气量对pGH 的表达效率影响较大;过夜培养物存放时间的长短及不同氨苄青霉素(Amp)浓度对表达效率稍有影响。表达载体 pJW301转化不同受体菌,其表达效率有较大差异。  相似文献   
19.
一、基因工程 自从七十年代初期出现基因工程这门新兴学科以来,十几年的发展表明它具有无限的生命力。它在畜牧兽医方面的作用也是比较突出的。 在基因工程的研究中,当前最成功的是把蛋白类物质的基因转移到细菌中去表达,  相似文献   
20.
含第1内含子的猪生长激素cDNA基因的构建   总被引:3,自引:0,他引:3  
以 PCR方法扩增了猪生长激素 ( p GH)基因的第 1内含子 ,经测序表明 ,扩增的 p GH基因第 1内含子的序列与 Vize发表的序列存在 6个碱基的差异 ,同源性达 97.5%,说明 p GH基因第 1内含子具有多态性。此外 ,还发现此内含子存在有转录因子 ATF的结合位点。利用第 2外显子的 Hinf 位点 ,采用将 3个 DNA片段一步连接的方法 ,将扩增的第 1内含子插入到 p GHc DNA的正确位置上 ,从而构建出含第 1内含子的p GHc DNA。  相似文献   
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