An oxidative enzyme boosting the enzymatic conversion of recalcitrant polysaccharides     

Vaaje-Kolstad G  Westereng B  Horn SJ  Liu Z  Zhai H  Sørlie M  Eijsink VG 《Science (New York, N.Y.)》2010,330(6001):219-222

Efficient enzymatic conversion of crystalline polysaccharides is crucial for an economically and environmentally sustainable bioeconomy but remains unfavorably inefficient. We describe an enzyme that acts on the surface of crystalline chitin, where it introduces chain breaks and generates oxidized chain ends, thus promoting further degradation by chitinases. This enzymatic activity was discovered and further characterized by using mass spectrometry and chromatographic separation methods to detect oxidized products generated in the absence or presence of H(2)(18)O or (18)O(2). There are strong indications that similar enzymes exist that work on cellulose. Our findings not only demonstrate the existence of a hitherto unknown enzyme activity but also provide new avenues toward more efficient enzymatic conversion of biomass.  相似文献   

Implementation of International Standards for Phytosanitary Measures no. 7 Phytosanitary Certification System and no. 12 Phytosanitary Certificates     

S. Brunel  N. M. Horn  J.‐G. Unger  R. Arnitis 《EPPO Bulletin》2013,43(2):309-315

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Physical properties of a Luvisol for different long‐term fertilization treatments: I. Mesoscale capacity and intensity parameters     

Dörthe Holthusen  Markus Jänicke  Stephan Peth  Rainer Horn 《植物养料与土壤学杂志》2012,175(1):4-13

The physical properties of a Luvisol derived from loess near Bonn, Germany, under different long‐term fertilization treatments were examined. For the investigation of the impact of farmyard manure (FYM) on soil strength at the mesoscale (100 to 300 cm³ soil cores), undisturbed samples were taken from two different depths (10 and 40 cm), either with no fertilization at all, with full mineral fertilization, with FYM only, and with both mineral and organic fertilization. We investigated hydraulic and mechanical parameters, namely precompression stress, pore‐size distribution, saturated hydraulic and air conductivity, and calculated pore connectivity. Long‐term organic fertilization resulted in significantly more and coarser pores which in addition were more conductant and mechanically stronger by trend. Mineral fertilization also increased pore volume by trend but not pore functionality. Mechanical strength generally increased with fertilization by trend, however, was reduced again when organic and mineral fertilization were combined. Nonetheless, FYM led to relatively higher soil strength as the FYM‐treated plots with lower bulk density attained similar soil strength as the unfertilized but denser plots and thus supported the soil‐improving impact of organic amendments. The subsoil physical properties were rather unaffected by fertilization, but were dominated by texture.  相似文献   

Avian pathogenic Escherichia coli MT78 invades chicken fibroblasts     

Letícia Beatriz Matter  Nicolle Lima Barbieri  Marcel Nordhoff  Christa Ewers  Fabiana Horn 《Veterinary microbiology》2011

Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) are responsible for extraintestinal diseases, called colibacillosis, in avian species. The most severe manifestation of the disease is colisepticemia that usually starts at the respiratory tract and may result in bird death. However, it is not yet clear how APEC cross the respiratory epithelium and get into the bloodstream. In this work, we studied the interaction between 8 APEC strains (UEL31, UEL17, UEL13, UEL29, MT78, IMT5155, IMT2470, A2363) and a chicken non-phagocytic cell, the fibroblast CEC-32 cell line. We investigated the association profile, the invasion capability, the cytotoxicity effect and the induction of caspase-3/7 activation in an attempt to understand the way the pathogen gains access to the host bloodstream. Association to cells was determined after 1 h of infection, while cell invasion was determined after 4 and 24 h of infection. The cytotoxic effect of bacterial infection was measured by lactate dehydrogenase (LDH) release and the activation of the apoptotic program was verified by caspase-3/7 activation. Also, the presence of genes for adhesins, invasins and other related virulence-associated factors was verified by PCR. All bacterial strains showed similarity in relation to adhesion, LDH release and caspase-3/7 activation. However, one APEC strain, MT78, showed high invasion capability, comparable to the invasive Salmonella typhimurium strain SL1344. Since an APEC strain was capable of invading non-phagocytic cells in vitro, the same may be happening with the epithelial cells of the avian respiratory tract in vivo. CEC-32 monolayers can also provide a useful experimental model to study the molecular mechanisms used by APEC to invade non-phagocytic cells.  相似文献   

Ultramicro-ELISA with a fluorogenic substrate for detection of potato viruses     

D. Reichenbächer  I. Kalinina  M. Schulze  A. Horn  H. Kleinhempel 《Potato Research》1984,27(4):353-364

Summary A double-antibody ELISA is described in which polystyrene-covered polyvinylchloride plates with 10 μl test volume in the wells are used as a solid phase. A fluorogenic substrate, 4-methylum-belliferyl phosphate is used instead of a colorigenic substrate. The plates are loaded with 10 μl samples by using a 50-channel micropipette and fluorescence units read at 0.16 mm thickness with a special measuring device. The practicability and sensitivity of the method are exemplified by the detection of potato viruses X, Y and M (secondary infections) and potato leafroll virus (primary infections), in leaf and tuber extracts. Ultramicro-ELISA is as reliable in detecting the viruses as the standard ELISA. Because of the very small volumes used in the wells, chemicals, antibodies and alkaline phosphatase are reduced by 95% as compared with the standard test.

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Zusammenfassung Es wird ein Ultramikro-ELISA in der Form eines Doppelantik?rper-ELISA (Clark & Adams, 1977) beschrieben, in dem als feste Phase polystyrolbeschichtete Polyvinylchlorid-Folien mit einem Füllvolumen von 10 μl verwendet wurden. Die Dosierung erfolgte in einem Raster von 5×10 mit einem speziellen 50-kanaligen Mikropipetter. Alle Inkubationsschritte wurden bei Raumtemperatur durchgeführt. Nach dem Ausspülen mit PBS-Tween wurden die Folien 20 Minuten mit Aqua dest. gewaschen. An Stelle des chromogenen Substratesp-Nitrophenylphosphat wurde 0,0005 mol/l 4-Methylumbelliferylphosphat in Diethanolaminpuffer verwendet. Die Reaktionszeit für das fluorogene Substrat betrug 20 Minuten. Ein Abstoppen der Substratreaktion entfiel, da die L?sung nach erfolgter Reaktion mit einem Mikropipetter auf eine im Raster 5×10 gekammerte Glasmessküvette überführt wurde. Die Messung der Fluoreszenzintensit?t erfolgte bei 0,16 mm Schichtdicke in einem speziellen Auswerteger?t. Dieser Ultramikro-ELISA, der zur quantitativen Bestimmung des α₁-Fetoproteins Anwendung findet (Horn et al., 1981; Hoffmann-Blume et al., 1983), wurde in seiner Nachweissicherheit mit einem üblichen Doppelantik?rper-ELISA verglichen (Richter et al., 1979). In die Untersuchungen wurden Blattpress?fte von Pflanzen einbezogen, die mit Kartoffelblattroll-Virus (PLRV), Kartoffel-Virus Y (PVY) und Kartoffel-Virus M (PVM) infiziert waren. Des weiteren wurden das Kartoffel-Virus X (PVX) sowie die Viren PVY und PVM in sekund?rinfizierten Knollen und Bl?ttern von Kartoffelzuchtst?mmen (spontane Freilandinfektionen) nachgewiesen. Zum Nachweis prim?rer Infektionen mit PLRV wurden gesunde Mutterpflanzen der Sorte Adretta an zwei Terminen mit Hilfe von Blattl?usen infiziert. Die mit beiden ELISA-Verfahren erhaltenen Ergebnisse stimmten überein. In Blattpresss?ften konnten die Viren bis zu einer Verdünnung von 10⁵ (PVM), 10³ (PVY) und 10² (PLRV) nachgewiesen werden. In 20 Individuen von Kartoffelzuchtst?mmen wurden mit beiden Verfahren übereinstimmend PVX und PVY in 5 Knollen- und Blattproben festgestellt; PVM wurde in 12 Blatt- und 13 Knollenproben nachgewiesen. Die in Blattproben ermittelten Extinktionen bzw. Fluoreszenzintensit?ten lagen um den Faktor 2–5 h?her als die Werte der Knollenextrakte. In 20 mit PLRV prim?rinfizierten Mutterpflanzen wurden im Rahmen der Blattuntersuchungen Ende Oktober mit beiden Verfahren 10 infizierte Stecklinge ermittelt. Die Ergebnisse wurden durch die Augenstecklingsprüfung, bei der 9 infizierte Pflanzen gefunden wurden, unterstützt. Bei der Untersuchung prim?rinfizierter Knollen wurde nach einer Zwischenlagerung von 2,5 Monaten in 17 von 18 dieser Knollen eine PLRV-Infektion best?tigt. Die anschliessende Augenstecklingsprüfung ergab nur 12 PLRV-infizierte Pflanzen. Eine Abh?ngigkeit vom Infektionszeitpunkt wurde nicht gefunden. Der vorgestellte Ultramikro-ELISA besitzt nach diesen Ergebnissen die gleiche Sensitivit?t wie ein üblicher Standard-ELISA. Bedingt durch die geringen Füllvolumina k?nnen jedoch Chemikalien, Antik?rper und alkalische Phosphatase um 95% der im Vergleich zum Standard ben?tigten Mengen reduziert werden.

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Résumé Dans ce travail est décrit une méthode Ultramicro-ELISA avec le principe du double anticorps-ELISA (Clark & Adams, 1977). La partie réceptrice solide se compose de feuilles en polyvinylchloride additionnée de couches en polystérole avec une capacité de 10 μl par alvéole. La sensibilisation des plaques qui correspondent à une grille de 5×10 alvéoles, est effectuée avec une micro-multipipette à 50 canaux. L'incubation a lieu à température ambiante. Après rin?age des plaques avec le PBS-Tween le lavage est effectué durant 20 minutes avec de l'eau distillée. A la place du substratp-nitrophénylphosphore on utilise une solution de 4-methylumbelliferylphosphore 0,0005 mol/l avec un tampon de diethanolamine. La durée de réaction du substrat fluorescent est de 20 minutes. Un stoppage de la réaction est superflu, étant donné qu'une fois la réaction obtenue, la solution est prélevée avec une micro pipette et versée sur une grille-cuvette en verre avec 5×10 champs. La mesure de l'intensité fluorescente est effectuée avec un appareil spécial sur une couche de 0,16 mm. Cet ELISA Ultramicro-test utilisé pour la détermination quantitative de la protéine α-1 Feto (Horn et al., 1981; Hoffmann-Blume et al., 1983) a été comparé sur sa fiabilité avec un double anticorps-ELISA courant (Richter et al., 1979). Les examens comprenaient des jus de feuilles de pommes de terre contaminées par PLRV, PVY, PVM. On a également détecté le PVX, PVY et PVM, infections secondaires de tubercules et feuilles de clones de pommes de terre. Pour la détection des infections primaires de PLRV, des plantes-mères saines de la variété Adretta ont été infectées à deux dates à l'aide de pucerons. Les résultats obtenus avec les deux méthodes ELISA concordent dans tous les essais. Dans le jus de feuilles, les virus ont été détectés jusqu'à une dilution 10⁵ (PVM), 10³ (PVY) et 10² (PLRV). Sur les 20 clones examinés on a décelé avec les deux méthodes 5 cas de PVX et PVY dans les échantillons de tubercules et feuilles. PVM a été détecté dans 12 cas sur les feuilles et 13 fois sur les tubercules. Les extinctions, c'est-à-dire les intensités fluorescentes, sont 2 à 5 fois plus élevées à partir de jus de feuilles que sur du jus de tubercules. Sur 20 plantes qui présentaient une infection primaire, on a obtenu par des analyses foliaires des boutures à fin octobre, 10 individus infectés avec chaque méthode. Ces résultats ont été confirmés par des tests d'indexage qui ont donné 9 individus infectés. Lors de la détection d'infections primaires, après entreposage des tubercules pendant 21/2 mois, on a obtenu 17 tubercules positifs sur 18 contaminés de PLRV. L'indexage d'oeilletons a permis de déceler 12 individus malades sur ce même matériel. On a pas observé de différence selon l'époque d'infection de la plante-mère. Cela avait cependant été démontré lors d'une étude plus conséquente (Richter et al., 1983). Selon les résultats obtenus avec les virus de la pomme de terre PVX, PVY et PVM d'infections secondaires, ainsi que du PLRV d'infections primaires l'ultramicro-test ELISA offre la même sensibilité que le test ELISA standard. En raison des petits volumes des plaques, les substances chimiques, anticorps et phosphatase alcaline, peuvent être réduites de 95% comparativement avec la méthode traditionnelle.

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High regeneration potential in vitro of sunflower (Helianthus annuus L.) lines derived from interspecific hybridization     

Steffen Weber  Renate Horn  Wolfgang Friedt 《Euphytica》2000,116(3):271-280

Successful selection of interspecific hybrid progenies with superior ability to regenerate shoots from apical meristems was performed in sunflower which now allows for the development of lines for improved biotechnological applications. Early generations of interspecific hybrids originating from crosses between the two H. annuus CMS lines ‘HA89’ and ‘Baso’, and 9 wild species were screened for their ability to regenerate in vitro. Evaluation of 36 progenies allowed to identify seven progenies from crosses involving H. mollis, H. giganteus, H. strumosus, and H. decapetalus which showed a significantly higher regeneration potential than the commercial hybrid ‘Albena’ regarding the number of shoots per explant. Among these progenies, 47.2 to 62.4% of explants produced shoots with an average of 2.3 to 3.5 shoots per cultured explant. Regeneration in vitro was significantly determined by the genotype. More than half of the investigated interspecific hybrids performed better than the inbred ‘HA89’ demonstrating that the high regeneration potential available in the wild species can be efficiently transferred to cultivated sunflower. The seven progenies with high regeneration potential in vitro were characterised by agronomic performance in the field. Two of the interspecific hybrids derived from H. strumosus and H. decapetalus not only showed a superior regeneration potential but also proved to be competitive to commercial hybrids with regard to important agronomic traits, e.g. fat content and TGW. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.  相似文献   

Agnostische Gedanken über die Rolle der Mathematik in der Biologie     

Walther Horn 《Journal of pest science》1932,8(8):89-92

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贮藏中荔枝果皮衰老与褐变的研究   总被引：25，自引：1，他引：24  

陈文军  洪启征 《园艺学报》1992,19(3):227-232,T001

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The occurrence of bacterial infections in the swamp beaver (Myocaster coypus MOLINA, 1782). 3. Streptococcal, staphylococcal, Aeromonas and Actinobacillus infections     

B K?hler  B Wendland  M Winkler  E Kunter  G Horn 《Archiv fuer experimentelle veterinaermedizin》1988,42(6):877-889

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Dissociative anaesthesia in free-ranging male koalas and selected marsupials in captivity     

M. BUSH  JAM GRAVES†  SJ O'BRIEN‡  DE WILDT 《Australian veterinary journal》1990,67(12):449-451

Forty seven free-ranging, adult, male koalas were captured and administered an intramuscular injection of the dissociative anaesthetic, Telazol (tiletamine HCl plus zolazepam HCl), at dose rates of 5.0 to 7.7 mg/kg body weight. Anaesthesia induction was rapid and smooth and resulted in a surgical plane of anaesthesia lasting 30 to 45 min. There was no depression of heart rate or respiration. Mild salivation occurred in most animals, but was not a problem because the swallowing reflex was retained. There was no mortality or morbidity and the anaesthesia level was sufficient to allow electroejaculation and multiple blood sampling with no apparent animal discomfort. For 10 of 19 males in which anaesthesia was required for a 90 min protocol, a supplementary Telazol injection (average, 2.5 mg/kg) was necessary. All koalas recovered completely within 3 to 4 h of the initial injection. The results suggest that the optimal Telazol dosage for the adult male koala is 7.0 mg/kg body weight. The retrospective analysis of 259 anaesthesia records involving 14 species indicated that Telazol was equally effective and safe in other captive marsupials.  相似文献