柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法的建立及应用     

封立平  孔德英  孙涛  孙冬  纪瑛  王简 《热带作物学报》2015,36(6):1153-1160

以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因（登录号：AE008923.1）为靶标，设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域，建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀，实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化，并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示，该体系经优化后稳定性良好，可在66 ℃ 恒温条件下，60 min内完成检测；DNA检测下限可达0.02 ng/μL，灵敏度与荧光定量PCR方法相同，比常规PCR方法高1个数量级；能快速、准确地对田间疑似样品进行检测，与荧光定量PCR方法的检出情况一致，没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短，特异性与灵敏度高，为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。  相似文献   

大白菜花青素含量及色差指标相关性研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

林文超  王德森  王海龙  纪纲尚  刘维信 《青岛农业大学学报(自然科学版)》2011,(3):201-204

为了探寻大白菜花青素含量快速测定的方法,本文利用pH差计法和色差仪分别测定了‘城阳青’(普通大白菜)、‘秋宝黄’(黄心白菜)和‘彩凤’3个不同叶色大白菜品种花青素含量以及色差指标,并对6个色泽参数与花青素含量进行了相关和回归分析。结果表明:6个色泽参数均能反映白菜叶片间叶色的细微变化,‘城阳青’和‘秋宝黄’不含花青素,紫色白菜‘彩凤’的花青素主要分布于由外向内的第1～4层叶片。色泽参数L,b,h和C分别与花青素含量呈极显著或显著负相关关系(相关系数分别为-0.85**,-0.58**,-0.49*,-0.58**)。以色泽参数值L、a、h与花青素含量建立了多元回归方程:y=90.24-1.07x1+5.65x2-142.71x3(x1为L值,x2为a值,x3为h值,y为花青素含量),该回归方程相关系数为0.9629。通过色差计依据建立的回归方程可快速测定紫色大白菜花青素的含量。  相似文献   

Effect of Dietary Lactobacillus fermentum from Pig on Growth Performance,Nutrient Apparent Digestibility,Faecal Microflora Number and Serum Immune Indices in Weaned Piglets     

WANG Si-xin  JI Hai-feng  LIU Hui  ZHANG Dong-yan  WANG Jing  WANG Ya-min  DONG Da-ming 《中国畜牧兽医》2016,43(5):1215-1220

This experiment was conducted to study the effects of Lactobacillus fermentum on growth performance, nutrient apparent digestibility, faecal microflora number and serum immune indices of weaned piglets.A total of 160 weaned piglets with an average age of (30±2) days and averge body weight of (7.85±0.68) kg were randomly distributed into 4 groups with 4 replicates per group and 10 piglets per replicate feeding basal diet, 0.1%, 0.2%, and 0.3% Lactobacillus fermentum supplementation diets, respectively.The experiment lasted for 35 d.The results showed that, compared with the control group, the average daily gain, the feed conversion ratio, the apparent digestibility of crude protein, calcium and total phosphorusin of Lactobacillus fermentum groups were all increased in varying degrees.The optimum supplemental level of Lactobacillus fermentum should be 0.2%, and at this level, the average daily gain was significantly increased by 8.70% (P<0.05), the F/G was decreased by 4.62% (P<0.05), the apparent digestibility of crude protein, calcium and total phosphorus were significantly increased (P<0.05), the number of faecal E.coli was significantly decreased (P<0.05), and the serum IgG was significantly increased by 8.39% (P<0.05).The results indicated that Lactobacillus fermentum supplementation could improve the immune function, growth performance, the apparent digestibility of crude protein, calcium and total phosphorus and reduce the number of faecal E.coli of weaned piglets.  相似文献   

丹参对奶牛脂肪变性肝细胞NF-κB和CYP450表达的影响     

路丽芹  孙立云  徐丽娜  汲如芬  李鹏飞  秦建华  钟秀会  马玉忠 《中国兽医学报》2015,(2):278-282

为探讨丹参对脂肪变性奶牛肝细胞的作用机制,采用胶原酶两步灌流法分离培养奶牛肝细胞,不同浓度DL-乙硫氨酸处理,油红染色观察其脂滴数量,MTT法测定肝细胞的活性,生化法检测TG含量。用不同浓度的丹参处理变性肝细胞后,生化法检测ALT、AST、TG、SOD、MDA的含量或活性,ELISA法测定TNF-α的含量,Western blot法检测NF-κB和CYP450的蛋白表达水平。结果显示,筛选出2 mmol/L的DL-乙硫氨酸作用24 h作为体外造模的最佳条件。用丹参处理后,能降低ALT、AST、TG和MDA的活性或含量,抑制TNF-α的释放,增加SOD活性。随丹参浓度增加和处理时间的延长,CYP450的表达呈逐渐降低的趋势。24 h时,丹参对NF-κB的表达无明显影响;48 h时,随丹参浓度的增加,NF-κB的表达呈逐渐降低的趋势。这表明丹参对奶牛脂肪肝有一定的治疗作用,其作用机制与促进脂质代谢、抑制肿瘤细胞坏死因子、抗脂质过氧化及降低NF-κB和CYP450的表达密切相关。  相似文献   

杨树品系对杨干象抗性研究初探   总被引：3，自引：0，他引：3  

谢伟  蔄胜军  纪纯阳  苏晓丽  刘宽余 《辽宁林业科技》2011,(5):15-19,44

杨树不同品系对杨干象抗性差异很大,以美洲黑杨为亲本的多数外来品种对杨干象抗性差,也使杨干象种群迅速扩大。该文根据调查的3年生和4年生连续2 a的不同杨树品系的平均虫口密度,根据聚类分析的方法将其划分为高感虫品系、感虫品系、低抗虫品系、中抗虫品系和高抗虫品系5个级别,结合杨树品系的类型、形态特征等进行分析,为生产上选用杨树抗性品系和减少杨干象大发生的危害及抗虫育种等方面提供参考。  相似文献   

长沙市苗木基地土壤肥力的调查与评价   总被引：1，自引：0，他引：1  

张德军  周卫军  纪雄辉 《湖南农业科学》2011,(21)

为了对长沙市苗木基地土壤肥力进行调查,选取了长沙市7个代表性苗木基地,研究和分析了各基地的土壤物理、化学性状,并采用Fuzzy综合评价对各基地的土壤肥力综合水平进行了评价.结果表明,长沙市苗木基地土壤pH值偏低,容重较大,土壤质地粘重,土壤有机质和氮素的含量中等偏低,土壤磷素和钾素的含量则较丰富；除林业基地外,其他基地土壤肥力综合指标均处于中等偏上水平.  相似文献   

辽西地区五个冬桃新品种抗旱性差异     

纪连军  刘青柏  孙玉梅  王洪江  王义祥  李春辉 《北方园艺》2017,(4)

以辽西朝阳地区5个冬桃新品种为试材,分析了各品种冬桃的叶片保水力、水分亏缺状况、水分利用效率等指标,比较不同品种冬桃的抗旱能力,以期为进一步筛选适宜当地的冬桃栽培品系提供参考依据。结果表明:各冬桃品系在抗旱特性方面的综合表现为:"傲雪4号"表现最好,以下依次为"傲雪3号""傲雪5号""傲雪6号""傲雪2号"。  相似文献   

马蔺的花部构造及开花授粉生物学特性     

穆丹  梁英辉  纪艳 《北方园艺》2012,(13):96-98

对马蔺的花部特征、开花动态、授粉特性及传粉媒介等进行了研究,运用多种处理方式,对马蔺的传粉机制进行测定。结果表明:自然条件下,马蔺5～6月开花,群体花期约40d,盛花期约25d,单花花期约58h。马蔺的繁育系统属于异交,部分自交亲和,自然传粉需要借助传粉媒介,虫媒传粉是其传粉方式之一。  相似文献   

福建省胡萝卜产业现状与发展对策     

纪生疆 《长江蔬菜》2012,(20):103-106

福建省是我国胡萝卜主要出口省份之一,但随着各国对胡萝卜贸易出口要求越来越高,品种、加工、质量安全等问题愈益凸显.为促进我省胡萝卜产业继续快速发展,分析了福建省胡萝卜生产优势和产业现状,指出存在的问题,提出发展对策和建议.  相似文献   

猪急性腹泻综合征冠状病毒SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

张记宇  韩郁茹  时洪艳  陈建飞  张鑫  刘建波  张燎原  冯书风  冯廷帅  季朝阳  石达  冯力 《畜牧兽医学报》2021,52(10):2887-2894

为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒（swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV）检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品,以其为模板建立一种SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示,所建立方法在3.31×10¹~3.31×10⁷拷贝·μL^-1模板量时,呈良好的线性关系,相关系数（R²）为0.997,斜率为-3.318。该方法特异性检测SADS-CoV;而猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测结果均为阴性。所构建的标准品检测灵敏度下限可以达到3.31×10¹拷贝·μL^-1,组内和组间变异系数均小于1%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。用该方法检测SADS-CoV感染IPI-2I和IPEC-J2细胞后不同时间点和不同接毒剂量的复制情况,结果显示,SADS-CoV感染细胞后2 h病毒含量较低,在12~36 h病毒含量迅速增长,36 h后增长速度减缓且病毒含量维持在较高水平。分别用0、0.1、1 MOI SADS-CoV感染细胞结果显示病毒的mRAN转录水平呈现剂量依赖性增加,当MOI为1时,IPI-2I和IPEC-J2细胞病毒含量分别为10^6.7、10^5.3拷贝·mL^-1。进一步利用所建立的方法对经口服攻毒SADS-CoV仔猪的临床样本进行检测,结果发现病毒在空肠回肠含量较高,表明病毒主要定殖于空肠和回肠。综上表明,本研究建立SYBR Green荧光定量PCR检测方法能灵敏特异地检测SADS-CoV,为SADS-CoV的诊断和病毒相关基础研究提供可靠的检测手段。  相似文献