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O型口蹄疫病毒VP1蛋白的原核表达及功能鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
为获得具有免疫原性的FMDV VP1蛋白,以O型FMDV重组质粒PMD18T-VP1为模板,利用PCR技术扩增得到O型FMDV VP1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组表达载体,命名为pET-VP1,经PCR和测序鉴定后,用IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析.结果显示,在分子量约为45 ku处有1条明显的蛋白条带,且能被口蹄疫阳性血清识别,表达产物通过包涵体纯化后用透析法复性;ELISA检测结果显示,所复性的蛋白具有较高的活性.结果表明,FMDV VP1蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为开发诊断制剂和疫苗的研制打下基础. 相似文献
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空间插值是研究空间因子区域分布特征的重要方法,可实现空间因子可视化展示。不同的空间因子受影响不同,导致空间插值方法的可靠性和适用性存在差异。为了确定室内区域湿度场动态实时化模拟的最佳方法,以Inter实验室内54个温湿度传感器的一个月采集数据为研究案例。综合分析了反距离权重插值、径向基函数插值、普通克里金插值、协同克里金插值、时空克里金插值和时空协同克里金插值6种空间插值方法,并采用交叉验证的方法对插值结果进行比较。结果表明,时空协同克里金插值方法在模拟准确度、可信度和反应极值等能力都要优于其余几种插值方法。 相似文献
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【背景】非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引发的一种猪烈性传染病,是全球公认的养猪业“头号杀手”,至今尚无安全有效的疫苗和药物。病毒作为专性细胞内寄生物,必须通过“劫持”宿主翻译系统为病毒蛋白合成服务。其中翻译起始因子eIF2α作为翻译调控的核心节点,控制细胞应激反应和翻译重编程走向,对病毒毒力、嗜性、致病性及免疫逃逸等具有重要影响,eIF2α磷酸化调控无疑是病毒与宿主细胞竞争翻译资源的重要阵地之一。然而,关于ASFV编码蛋白与eIF2α磷酸化作用关系的认知极度匮乏。【目的】探究非洲猪瘟病毒MGF110-5L-6L蛋白对宿主细胞翻译阻滞和促进应激颗粒形成的作用机制,为深入揭示非洲猪瘟病毒的致病机制研究提供科学依据。【方法】在前期利用荧光素酶报告基因载体和绿色荧光报告载体,筛选发现外源表达MGF110-5L-6L极显著上调eIF2α磷酸化水平的基础上。选择猪肺泡巨噬细胞3D4/21和猪肾细胞PK-15作为研究用细胞系,利用质粒转染和特异性化学药物处理等方法,结合免疫印迹和激光共聚焦... 相似文献
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针对智能温室变量施水的土壤水分预测问题,建立基于神经网络的土壤水分动态预测模型。以Delaunay三角剖分布点方法为基础,并将种植区域离散成若干单元。对各离散单元,模糊其土壤喷灌量,将单位时间土壤含水量的变化映射成土壤水势变化。考虑到土壤的时空特性,使用MATLAB建立以预测单元表层测量点土壤含水量、土壤温度和单位时间土壤含水量变化量作为输入,未来时刻该单元中心土壤深层含水量作为输出的BP神经网络和RBF神经网络预测模型。利用温室实际数据验证模型的准确性,通过比较两种神经网络模型结果,得出RBF神经网络模型具有较好实用性,为温室精细化变量施水的实现奠定基础。 相似文献
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麟游县位于宝鸡市东北部,有16个乡镇,108个村委会,1.4万个农户,7万农业人口.总面积1706平方公里,有耕地48万亩,林地135万亩,牧地70多万亩.是一个以林牧为主的农业县.党的十一届三中全会以来,随着农村联产承包责任制的推行,为满足役用的需要,我们把养牛业作为畜牧业的重点来抓,取得了比较显著的成绩.养牛业从1981年起一举扭转长期徘徊,下降的局面,每年以9.03%的速度递增,到1983年底,存栏达到了2.4 相似文献
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以狼爪瓦松愈伤组织为试材,采用正交实验的方法,研究了MS基本培养基浓度及6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)2种植物生长调节剂对狼爪瓦松愈伤组织生物量和有效物质含量的影响;同时,对适宜的蔗糖浓度进行了筛选。结果表明:MS+3.5mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA组合,最有利于愈伤组织生长和多糖、总酚及黄酮的积累;MS+3.5mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA培养基中加入30g·L~(-1)的蔗糖时,愈伤组织生长最佳,有效物质含量最高,在此蔗糖浓度下狼爪瓦松愈伤组织可生产711.2mg·L~(-1)多糖、165.1mg·L~(-1)总酚和154.5mg·L~(-1)黄酮。 相似文献
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我国玉米发展现状和趋势分析 总被引:5,自引:0,他引:5
在分析我国玉米发展现状、市场前景、国内贸易特点的基础上,提出了我国玉米发展的基本思路和发展目标。 相似文献
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猪α干扰素的表达及在PAM细胞系中抗PRRSV活性检测 总被引:4,自引:2,他引:2
为研究猪α干扰素蛋白功能和了解猪α干扰素蛋白的抗病毒活性,扩增并测序了猪α干扰素基因(IFN-α),并克隆至原核表达载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-IFN-α,将pET-IFN-α转化至BL21进行表达。Western-Blot结果表明,表达的蛋白具有很好的生物学活性。用细胞病变抑制法在PAM细胞系上进行抗病毒活性测定,结果表明,猪α干扰素有较为显著的抗PRRSV活性,其抗病毒活性效价约为1.13×106U/mg。 相似文献
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疫苗免疫是预防和控制传染病的主要措施,但对于猪繁殖与呼吸综合征,疫苗免疫存在免疫效率低与安全性差的问题,效果并不理想。因此,如何在安全剂量下提高动物机体的免疫力,成为疫苗研究的热点之一。试验证明细胞因子、化学试剂和微生物产物等几种免疫佐剂可以增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫效果。在研究的9个疫苗佐剂中,IL-2、IL-12、IFN-α、poly IC和poly ICLC、CpG ODN等能增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的细胞免疫效应;CpG ODN和霍乱毒素能显著提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗的抗体产生水平;IL-2和CpG ODN在临床实验中能增强疫苗对实验动物的保护,是最具潜力的免疫佐剂。 相似文献