利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻Pi21基因的效率分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王芳权  范方军  李文奇  朱金燕  王军  仲维功  杨杰 《中国水稻科学》2016,30(5):469-478

利用CRISPR/Cas9技术,针对Pi21基因的两个靶位点(靶位1和靶位2),构建基因敲除载体,转化水稻品种南粳9108。经PCR鉴定,获得了28株T0代阳性转基因植株。对靶位点酶切检测发现,靶位1突变效率为78.57%,靶位2突变效率为92.86%;靶位1和靶位2同时突变的效率为78.57%,突变效率较高。通过对靶位点进行测序,发现靶位点突变类型较多,包括碱基缺失、碱基插入、碱基缺失后插入其他碱基和大片段DNA缺失等类型。对突变株系进行氨基酸预测,发现大部分株系都存在移码突变现象而使基因突变彻底,少数株系表现为部分氨基酸的缺失或变异。成功敲除了水稻Pi21基因,并对突变效率和类型进行了分析,为进一步验证Pi21基因功能、培育广谱抗稻瘟病的水稻新品系奠定了基础。  相似文献   

水稻多酚氧化酶基因功能标记的开发与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨杰  曹卿  王军  范方军  张玉琼  仲维功 《中国水稻科学》2011,25(1):37-42

 水稻酚反应是水稻分类的重要依据。控制水稻酚反应的多酚氧化酶基因(PPO)已经克隆,根据其等位基因的DNA序列差异设计了InDel功能标记FMppo 18和FMppo 29。利用这两个标记对45份材料进行了标记基因型分析和酚反应鉴定。结果发现3份普通野生稻为非缺失带型;8份籼稻材料中6份为非缺失带型,而Dular为缺失29 bp带型,龙晴为缺失18 bp带型,表明Dular和龙晴分别携带29 bp和18 bp缺失的PPO等位基因;11份粳稻材料中9份携带18 bp缺失的PPO等位基因,2份携带29 bp缺失的PPO等位基因。对23份杂草稻鉴定的结果表明,7份早年发现的杂草稻,即3份江苏省连云港穞稻和4份安徽省怀远、来安、全椒、肥东的塘稻为非缺失带型;而16份近年来发现的杂草稻中14份不缺失,2份表现为18 bp缺失的PPO等位基因,与江苏省大面积推广的栽培粳稻品种携带相同的PPO基因。酚反应结果表明带29 bp或18 bp缺失的PPO等位基因的材料酚反应呈阴性,而不缺失的材料酚反应呈阳性。标记基因型与酚反应表现型完全对应。表明这两个功能标记可用于水稻种质资源鉴定、进化研究以及多酚氧化酶基因的分子标记辅助选择育种。  相似文献   

“土桥”牌珍珠米无公害生产技术与产业化开发     

夏丽华  夏伍孝  仲维功  陈自德  杨杰 《上海农业科技》2011,(6):22-23,15

以符合无公害稻米生产环境条件要求的南京市江宁区淳化街道为“土桥”牌珍珠米生产基地,通过选用优质高产抗病水稻新品种,推广农业新技术,依照无公害水稻生产技术标准,实行生产过程的控制;通过“公司十基地＋农户”的运作方式实施订单生产,起到了示范推广、辐射带动的作用,加快推进了优质稻米产业的发展,提高了“土桥”牌珍珠米的质量安全水平,促进了衣业增效、农民增收。  相似文献   

中粳稻南粳45高产栽培技术规范     

仲维功  李小祥  万荣华  潘军  夏伍孝  杨杰  王军  范方军 《江苏农业科学》2011,39(3)

根据南粳45的品种特性,在江苏省利用水稻精确定量栽培技术对机插稻和人工移栽稻2种种植方式进行了高产栽培技术研究.在6.7 hm2高产示范方上2009年江宁机插稻产量达到了10 968.15 kg/hm2、镇江新区姚桥镇农服中心机插攻关方实收产量11 955.00 kg/hm2,2010年江宁移栽稻获得实收11 990.10 kg/hm2的产量水平.  相似文献   

光强与施氮量对水稻南粳45光合特性和产量构成的影响     

金磊  李霞  仲维功 《西北农业学报》2011,20(7):88-93

以武育粳3号,新品系108为对照,在大田栽培条件下,研究南粳45在225.0、300.0、345.0kg.hm-2施氮量下,其分蘖期、拔节期和开花后的生长和光合生理指标,鉴定其耐光氧化和耐阴特性,并在成熟期考察产量构成因子。结果表明,与武育粳3号、新品系108相比,在施氮300.0 kg.hm-2下,南粳45单株产量分别提高了24.89%、5.40%;在不同生育期以及不同的施氮量下,南粳45具有较高的光合能力,尤其在拔节期;人工光氧化处理后,其最大的光化学效率(Fv/Fm)衰减较少;遮阴条件下,干物质下降较缓,结实率较高,属耐光氧化和耐阴品种。可见,南粳45在不同生育期均具有高光合能力和适应广幅变动的光强特性,这可能是南粳45获得高产的重要生理基础。  相似文献   

水稻抗咪唑啉酮类除草剂基因ALS功能标记的开发与应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

王芳权  杨杰  范方军  李文奇  王军  许扬  朱金燕  费云燕  仲维功 《作物学报》2018,44(3):324-331

选育和利用抗除草剂水稻品种具有重要的生产实践意义。通过筛选水稻资源, 发现了抗除草剂材料金粳818, 其ALS基因编码区第1880位碱基存在一个由G到A的碱基变异, 导致丝氨酸突变为天冬酰胺, 从而具有除草剂抗性。本研究基于该位点的碱基变异, 设计了11条等位基因特异PCR (allelic-specific PCR, AS-PCR)引物, 经过优化筛选, 获得两个引物组合F1N (S1/S9)和F1M (S1/S10), 将该标记命名为AS-ALS。利用F₂群体及其亲本和杂交种, 结合AS-ALS标记检测和除草剂抗性分析, 结果表明感除草剂ALS-G等位基因型只能被F1N引物对有效扩增, 抗除草剂ALS-A等位基因型只能被F1M引物对有效扩增, 而杂合基因型能同时被两对引物F1N和F1M扩增, ALS-A纯合或杂合等位基因型都表现抗除草剂, ALS-G纯合基因型表现感除草剂。因此本研究开发的标记能有效区分除草剂抗性基因的3种基因型, 基因型与表型完全对应。该标记用于回交育种, 可以选择ALS-A杂合基因型单株, 剔除ALS-G纯合等位基因型, 在自交的F₂保留ALS-A纯合基因型单株, 连续自交, 能快速获得除草剂抗性稳定的水稻材料。该除草剂抗性基因的功能标记还可用于咪唑啉酮类除草剂抗性资源筛选。  相似文献   

红米杂草稻中矿质元素及蛋白质含量分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹学伟  王熙  唐晓清  杨杰  仲维功 《江苏农业科学》2010,(3)

以蛋白质和矿质元素(Ca、Fe、Cu、Mn、Se)为主要指标对药食两用的红米稻不同部位的药用价值与营养价值进行初步的评价,采用凯氏定氮法测定了不同部位的蛋白质含量,采用原子吸收法对Ca、Fe 、Cu、Mn、Se等矿质元素的含量进行了测定.结果表明,红米稻的米皮中蛋白含量最高,精米中蛋白含量略低于米皮,米壳中蛋白含量显著低于米皮与精米.矿质元素以米皮的Ca、Fe、Mn含量最高,均显著高于精米与米壳,而米壳中也含有较多的Ca、Fe、Cu、Mn,均高于精米.  相似文献   

直接利用PCR产物构建RNA干扰表达载体     

杨杰  仲维功  王才林  柳青  王明波 《华北农学报》2010,25(5)

利用RNA干扰原理可以对作物进行遗传改良.构建RNA 干扰的发夹结构一般采用在引物两端加酶切位点方法,该方法涉及酶切位点多,步骤繁琐.本试验介绍一种直接利用PCR产物进行RNAi组成型表达载体构建的方法,该载体以潮霉素为筛选标记基因,适合水稻的遗传转化.  相似文献   

优质高产抗病杂交中籼稻华优广抗占的选育与栽培要点     

仲维功  陈志德  杨杰 《江苏农业科学》2004,(6):44-44,110

华优广抗占是江苏省农业科学院粮食作物研究所最新育成的三系杂交籼稻新组合，2003年5月获国家植物新品种权保护。2004年2月通过江苏省品种审定委员会审定。  相似文献   

优质杂交籼稻新组合粤优938的选育与利用   总被引：13，自引：1，他引：13  

李传国  仲维功  缪炳良 《杂交水稻》2001,16(3):9-10,12

粤优938是用红莲型优质不育系粤泰A与R938配制成的优质，高产，抗病籼型杂交稻新组合，经江苏省区试，该组合比汕优63增产6．5－7．5％，生育期长5－7d，米质达优质稻谷（GB／T17891－1999）标准，中抗白叶枯病和稻瘟病，广泛适合于长江流域一季中灿稻区种植，2000年5月通过江苏省品种审定。  相似文献