灰飞虱VAP-B蛋白的抗体制备及体内外应用     

赵霞  秦发亮  刘文文  王锡锋 《植物保护》2022,48(4):220-225

灰飞虱Laodelphax striatellus的囊泡相关膜蛋白相关蛋白B(VAP-B)是内质网膜蛋白家族的蛋白,其主要参与调节囊泡运输、脂类的转运代谢以及未折叠蛋白应答等。本研究克隆了灰飞虱VAP-B基因,构建了pCold-SUMO-VAP-B原核表达载体,再将其转化大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE3),经过IPTG低温诱导表达得到了含有HIS和SUMO标签的VAP-B可溶性蛋白,经过Ni²⁺-NTA亲和层析柱纯化后的蛋白再利用rTEV酶去除SUMO标签,得到无标签的VAP-B蛋白。通过免疫新西兰雄兔制备了VAP-B的多克隆抗体。Western blot检测结果表明该抗体可以特异性检测到灰飞虱的VAP-B蛋白;同时利用该抗体进行免疫荧光标记,发现其能特异性定位灰飞虱唾液腺内的VAP-B蛋白。研究结果表明制备的VAP-B抗体能够成功用于该蛋白的体内外检测,为阐明VAP-B在灰飞虱体内的关键作用奠定了基础。  相似文献   

大豆与疫霉菌非亲和互作早期差异显示基因的表达分析     

李永刚  李岩  刘文文  杨明秀  文景芝 《植物保护学报》2011,38(5):413-418

大豆疫霉根腐病是大豆的毁灭性病害。为了深入了解大豆对疫霉菌的分子抗病机制,以大豆疫霉菌1号生理小种游动孢子接种抗性品种绥农10的根部及下胚轴,通过反转录差异显示技术分离到疫霉菌侵染0、0.5、1、2和4h后大豆下胚轴和茎部的差异表达基因,其中至少有8个基因与抗病相关。接种后0.5 h开始上调表达的有肉桂酸-4-羟化酶基因、ATP合成酶β亚基基因,以及类花生泛素结合酶基因;接种后1h和2h依次开始上调表达的有尿苷二磷酸-N-乙酰基-α-D-氨基半乳糖基因和豌豆蓝铜蛋白基因;接种后4 h才上调表达的有TGA型碱性亮氨酸拉链基因、大豆环孢素基因和14-3-3蛋白基因。这8个基因中有1个基因与信号传导有关、4个基因与抗病和防御有关、2个基因与转录调控有关、1个基因与能量代谢有关。研究表明,以上8个基因在疫霉菌游动孢子萌发、侵入大豆和在大豆体内扩展过程中起着重要作用。  相似文献   

猪流行性感冒暴发与防治     

刘文文 《农业科技与信息》2004,(7):31-31

2003年8月中旬,宜州区部分乡镇大面积暴发了猪流行性感冒。发病区域猪的存栏数约为5万头,发病数约为4万头,发病率高达80％:猪(大部分是仔猪)死亡323头,死亡率为0.65％。由于宣州区畜牧兽医站及时采取了综合防治措施,9月上旬疫情基本得到了控制。  相似文献   

基于生态文明的新农村社区规划研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘文文  张万荣 《北方园艺》2011,(19):189-191

基于生态文明的背景,结合浙江省新农村建设调研,分析了新农村社区规划中存在的问题,提出了规划的理念和原则,并对社区空间布局、交通组织、建筑设计、景观绿化、基础服务设施和产业发展规划进行了探讨.  相似文献   

规模场猪腹泻流行的调查与防疫     

刘文文  张尤贞 《畜牧兽医科技信息》2018,(5)

正腹泻是较为常见的一种病症,且致死率也不高,但若未能及时发现与治疗,该病例将会继发新的疾病,诸如传染性胃肠炎、流行性腹泻以及猪痢疾等。而一旦出现继发病例,则猪的死亡率亦将大幅提升,继而导致养猪人蒙受巨大的经济损失。对此养猪人应对猪腹泻的防治格外重视。本文对宣城市宣州区规模化养猪场腹泻性疾病病因进行了调查与分析,报告如下。1对猪腹泻流行的调查2017年1~5月,宣城市宣州区的规模化养猪发生了22  相似文献   

基于酵母双杂交系统筛选灰飞虱体内与大麦黄条点花叶病毒核衣壳蛋白互作的蛋白质     

俎瑶琛  刘文文  刘艳  王锡锋 《植物病理学报》2019,49(2):226-234

 为了获取影响大麦黄条点花叶病毒(BYSMV)在灰飞虱体内增殖、积累和传播的相关介体因子,本研究利用分离泛素酵母双杂交膜系统,以BYSMV核衣壳蛋白(N)为诱饵对灰飞虱cDNA文库进行了筛选。 将BYSMV N基因构建到诱饵载体pDHB1上进行表达检测和功能验证,结果表明重组载体pDHB1-N能在酵母内正常表达并行使功能。利用诱饵载体筛选pPR3-N空文库对文库筛选条件进行优化,确定3-氨基-1,2,4-三唑(3-AT)浓度为12 mmol·L^-1的QDO平板为筛选文库培养基条件,去除可能存在的轻微筛库背景。在此筛选条件下以诱饵载体从灰飞虱cDNA文库中筛选得到57个阳性克隆,序列比对结果表明这些阳性克隆编码17种候选蛋白,包括表皮蛋白、泛素B、核糖体膜相关蛋白、细胞色素b5以及海藻糖转运蛋白等。 经酵母双杂交共转验证和β-半乳糖苷酶检测进一步确认了这17个候选蛋白与BYSMV N发生互作。本研究成功从灰飞虱分离泛素酵母双杂交膜系统cDNA文库筛选到与BYSMV N互作的蛋白质,为进一步探索弹状病毒与介体昆虫的分子互作机制奠定了基础。  相似文献   

一起雏鸭肉毒梭菌中毒症的诊治     

刘文文 《现代农业科技》2010,(21):368+371

介绍了一起雏鸭肉毒梭菌中毒症的发病情况、临床症状、病理变化、实验室诊断及类症鉴别过程,总结了其防治措施,以供参考。  相似文献   

普洱茶对酒精性脂肪肝的预防作用研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

王蕊 肖蓉杨兰兰  刘文文施瀚超 侯艳 《中国农学通报》2014,30(12):308-311

为探讨普洱茶（熟茶）对酒精性脂肪肝大鼠肝损伤的预防作用,将Wistar大鼠随机分为阴性照组、阳性对照组、KXL药物组以及普洱茶（低、中、高）剂量组。试验大鼠采用液体饲料饲喂,同时给予对应的受试物,60天后测定大鼠血清TG、TC、HDL-C、FFA、AST、ALT、INS水平及肝组织FFA、INS水平。与阳性对照组比较,普洱茶低、中、高剂量组血清TG、TC含量,低、中、高剂量组血清和肝组织INS水平,中、高剂量组血清及肝组织FFA含量,中、高剂量组大鼠血清AST、ALT活性均显著降低(P＜0.05或P＜0.01);普洱茶高剂量组血清HDL-C显著上升(P＜0.05)。普洱茶能够有效预防酒精性脂肪肝的发生或发展。  相似文献   

浅谈规模化羊场羊病的防治措施     

刘文文 《畜牧兽医科技信息》2019,(4):76-76

随着社会经济的不断发展,养羊规模不断扩大的同时也伴随着各种羊病的发生,如果不及时采取有效地预防措施,将会给养殖户带来经济损失,并制约我国规模化养羊事业的可持续发展。对此,相关人员应加强对规模化羊场中羊病的防治措施进行深入研究,以期能够提高规模化羊场的养殖质量。  相似文献   

沿黄稻区介体灰飞虱有效接种虫量与水稻病毒病发生关系研究     

冯超红  刘文文  杨琳琳  王光华  任应党 《河南农业科学》2020,49(7):87-92

水稻黑条矮缩病(Rice black-streaked dwarf disease,RBSDD)和条纹叶枯病(Rice stripe disease,RSD)是河南沿黄稻区重要的病毒病,均由介体昆虫灰飞虱传毒所致。为明确介体灰飞虱与不同水稻品种病毒病发生之间的关系,于2014—2018年连续5 a在开封市杜良镇调查灰飞虱高峰期虫量和带毒率,并对生产上常用水稻品种的发病情况进行统计和分析。结果表明,2014年、2016年灰飞虱携带水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的有效接种虫量最多(194.84万、171.11万头/hm~2),2017年和2015年次之,2018年最少。2014—2018年水稻黑条矮缩病发生较为普遍,且2014年和2016年发生较严重,其中淮稻5号的发病率分别为50.6%和70.8%,均表现为高感;镇稻88发病率分别为30.6%和29.3%,表现为感病和中感。2015年、2017年RBSDD发病较轻,2018年发病最轻。而水稻条纹叶枯病则一直保持零星发生趋势。水稻黑条矮缩病的发病率除了在不同品种上表现出差异外,同一品种不同年份的发病率也有较大差异。研究结果表明,由介体灰飞虱高峰期虫量和带毒率决定的有效接种虫量是影响水稻病毒病发生的重要因素。  相似文献