猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株E11105 N基因的序列分析与原核表达     

张升波  陈绍品  温贵兰  伍昌华  李天珍  李晨  王开功  文明  龚新勇 《动物医学进展》2016,(10):41-47

为研究PRRSV N蛋白的结构、功能以及N蛋白在病毒致病中的作用,以临床分离PRRSV毒株E11105为研究对象,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,经RT-PCR扩增出N基因片段,利用相关分子生物学软件对N基因序列进行分析;将N基因克隆连接到pColdⅠ原核表达载体上,经PCR、双酶切鉴定及序列测定后,得到重组质粒pColdⅠ-N,将pColdⅠ-N转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳及Western blot验证分析。结果显示,分离株E11105N基因与北美洲型代表株VR-2332、欧洲型代表株Lelystad virus(LV)、中国2006年暴发的高致病性PRRSV代表株JXA1、中国代表株CH-1a的核苷酸序列同源性分别为93.3%、34.7%、99.2%、95.4%,氨基酸序列同源性分别为94.4%、15.3%、94.4%、99.2%;系统进化树显示,E11105株N基因与美洲型代表株VR-2332、中国高致病性JXA1毒株的亲缘关系较近;分离株E11105N基因所编码蛋白不存在跨膜区;二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占20.33%和63.41%;预测该蛋白可能存在5个较为明显的B细胞优势抗原表位。SDS-PAGE蛋白电泳结果表明,重组N蛋白主要存在于菌体沉淀中,分子质量约为16.7ku;Western blot结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单克隆抗体识别,显色后条带约为16.7ku,与SDS-PAGE蛋白电泳的条带大小一致。  相似文献   

猪场环境大肠杆菌qnrA和aac(6’)-Ib基因检测     

李基棕  彭全海  高颖  马喆  张人俊  王开功  周碧君  文明 《黑龙江畜牧兽医》2011,(13)

为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)-Ib-cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)-Ib基因,测序分析aac(6’)-Ib-cr基因变异体,并用药敏纸片琼脂扩散法测其对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性。结果表明:57株大肠杆菌均未携带qnrA基因;8株检出aac(6’)-Ib基因,分别来自污水、粪便和土壤样本,且介导对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的广泛耐药性。E.coli3和E.coli4在第75(A)、76(G)或488位(A)碱基缺失;E.coli5在第222位(A→T)变异,E.coli1、E.coli2、E.coli3、E.coli4、E.coli5、E.coli7和E.coli8在223位(T→C)和454位(G→T)变异;E.coli3、E.coli4在第492位有A、C碱基增添。说明贵州省规模养猪场肠杆菌科细菌qnrA基因携带率较低,但存在aac(6’)-Ib-cr基因。  相似文献   

共和盆地发展农牧业生产的战略与对策初探     

施玉辉  林学征 《草业与畜牧》1989,(2):9-15

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台湾将在沿近海发展娱乐渔业     

林学钦 《福建水产》1995,(4)

台湾沿近海渔业因受工业污染、资源减少威协面临危机,当局面对这一现状提出:沿岸近海渔业利用休渔期间发展娱乐渔业,把渔业与观光结合,开辟另一资源,将是今后产业、学者努力的目标。 “娱乐渔业”是台湾农委会提案时定名的“游乐渔业”,经立法院讨论后更名,正式定名的。 台湾渔业处对“娱乐渔业”定义为:指提供渔船以游乐为目的者,在海上采捕水产动、植物之渔业,须不以营利为目的,以调剂身心为目的的海上的鱼。  相似文献   

作物高光效育种中的几个问题(下)     

韩锦峰  林学梧 《河南农业科学》1980,(12)

<正> 四、光合效率与遗传性1、作物品种间和个体间光合效率的差异:同一作物不同品种之间或同一品种不同个体之间,在光合效率方面存在有不同程度的差异,这就成为筛选高光效品种或株系的依据。中国科学院遗传所对93个小麦品种光合效率测定的结果证明,光合效率变化范围为17—32毫克 CO_2/平方分米/小时,说明了小麦品种间光合效率存在着显著的差异,而且这种差异保持着相对的稳定性,即高光合  相似文献   

真存折 假存款行骗记     

但功文 《畜牧市场》1999,(1)

8月下旬,重庆云阳县云阳镇人民路一个体理发店去了一位男顾客要洗面,他要到女店主的内室去洗被拒绝后,又问女店主:“国税局在什么地方?我是万县建筑公司的工程师,国税局要搞搬迁,你给我带一路,我给你钱”。女店生回答:“我不知道国税局在什么地方,我拿不到你的钱。接着又拿一些本本出来给我看说是他的证件,我只看了一下他的身份证是盘石人,未看其他的,怕象去年一样受骗”。  相似文献   

平陆县小麦施肥存在的问题及应对措施     

唐海功 《农民致富之友》2013,(22)

平陆县地处晋秦豫黄河金三角，小麦常年播种面积28万亩以上。肥料作为小麦生产的重要生产资料，肥料的投入在小麦生产投入中占有很大的比重，一般达到30%，高的达到50%。肥料使用的合理不合理，直接关系到种植小麦经济效益，不合理的施肥不但造成小麦减产，而且会造成肥料浪费和环境污染，直接影响到粮食安全。因此，推广科学合理施肥技术十分必要。  相似文献   

上海市区宠物犬弓形虫病调查     

刘桂清  孙泉云  李维功  沈莉萍  刘红 《上海畜牧兽医通讯》1999,(2)

随着我国改革开放政策的实行，人民生活水平不断提高，上海在日益向国际化大都市迈进的同时也逐步跨入老龄化城市的行列，出于对提高精神生活质量的追求，上海的宠物犬饲养热逐年升温，但不可避免的人畜共患病也随之而来，其中弓形虫病就是危害较为严重的人畜共患病。为了摸清宠物大中弓形虫的感染情况，1996～1998年我们对上海市区的准养犬进行针对性调查。1材料与方法1．1待检血清无菌采集外观正常的宠物犬血样3024份，分离血清后置－20℃冰箱保存备用。1．2诊断液1．2．l弓形虫直接凝集试验（DAT）试剂盒：由上海寄生虫病防治所提供。1…  相似文献   

机修沟峁坡 荒山变良田──机修梯田系统工程讲座(续完)     

功樟 《当代农机》1999,(6)

（上接１９９９年第５期第１９面）３．缓坡挖补三角法在坡度为１０°以下的缓坡地机修梯田时，应从最下边的地块开始，采用逐层开槽法和分段前推法，沿着等高线入铲，先顺坡向下推，当把坡下的三角补齐后，再调转推土机逆坡向上一块地顶推，直到将第１块地里的凸出水平线的三角推平后，再用梯台法完成最后１道工序。转入第２块地后仍照上法作业。４．陡坡侧推法在１５°～２５°的陡坡地上机修梯田时，先用削坡推土法在坡面的最高处，顺等高线挖出工作平台，然后再用斜向层推法和分段前推法向下坡送土，逐步扩大平台面积，降低陡坡的高度。…  相似文献   

机修沟峁坡荒 山变良田──机修梯田系统工程讲座(续二)     

功樟 《当代农机》1999,(3)

四、组织管理和激励政策１．机修梯田的组织管理机修梯田规模较大，时间紧迫，任务艰巨，为确保高质量、高标准地按期完成任务，必须加强组织管理工作。现将近几年成功的组织管理方法介绍如下。（１）强化领导。６０年代，省委、省政府曾提出“建设２个１００万ｈｍ２的奋...  相似文献