马传染性贫血野毒辽宁株前病毒全基因组核苷酸序列测定     

刘红全  王柳  童光志  杨志彪  仇华吉  孔宪刚  智海东  李昌文 《中国预防兽医学报》2000,(Z1)

采取马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）辽宁野毒株（Ｌ株）感染马的血液,分离白细胞。提取白细胞中的ＤＮＡ,并以此为模板,利用ＰＣＲ技术分四个片段扩增 ＥＩＡＶ前病毒 ＤＮＡ。将其分别克隆到载体质粒 ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中,经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接,得到 ＥＩＡＶ　 Ｌ株前病毒基因组全序列。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gC和gD基因的克隆及序列分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

孟松树  郭鑫  张绍杰  王柳  仇华吉  王玫  童光志 《中国兽医学报》2000,20(2):108-111

根据已发表的传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）ＳＡ－２株的核酸序列,设计了１对引物,以ＩＬＴＶ－中国王岗株ＤＮＡ为模板,ＰＣＲ法扩增出１条１．３９ｋｂ的基因片段,将扩增产物插入到真核表达质粒ｐＣＲ＾ＴＭ３－Ｕｎｉ,得到重组质粒ｐＴＡ－ｇＤ,另将克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ质料中的ｇＣ基因酶毁后,插入到ｐＣＲ＾ＴＭ３－Ｕｎｉ载体,得到重组质粒ｐＴＡ－ｇＣ,经电泳分析、酶分、ＰＣＲ鉴定后,进行序列测  相似文献   

牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究   总被引：7，自引：1，他引：7  

张桂红  童光志  王柳  仇华吉  赵晓岩  张绍杰  刘宝全 《黑龙江畜牧兽医》2000,(4):1-2

根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒（ＩＢＲＶ）ｇＢ基因序列,应用ｏｌｉｇｏ４．１程序设计一对引物ＰＢ１／ＰＢ２,分别对ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、ＢａｒｔｈａＮｕ／６７株、Ｂ７株、云南－１和云南－２分离株进行ＰＣＲ扩增。结果显示７株ＩＢＲ病毒ＤＮＡ均有３９９ｂｐ的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒（ＰＲＶ）、马立克氏病毒（ＭＤＶ）、鸡传染必喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）进行扩增。均未见特异性条带,证  相似文献   

猪生殖—呼吸道综合征免疫学研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

王柳  仇华吉 《预防兽医学进展》1999,1(1):5-8

  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株糖蛋白gB基因序列比较分析   总被引：8，自引：1，他引：8  

张绍杰  孟松树  仇华吉  王柳  倪键强  何召庆  王玫  童光志 《中国兽医学报》2000,20(6):544-547

根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）SA2的株的gB基因序列,设计了1对引物,通过PCR扩增了ILTV王岗株的gB基因,并克隆到pUC119质粒的EcoR I位点中,经酶切鉴定证实后,进行了序列测定。结果表明,gB基因长2619bp,包含完整的阅读框架。序列比较分析表明,ILTV王岗株的gB基因核苷酸序列与英国的Throne 882和美国的6322个强毒株的gB基因序列完全一致,而与澳大利亚SA2疫苗株gB基因核苷酸同一性为99.8%,氨基酸的同一性为98.4%。与澳大利亚SA2疫苗株gB基因核苷酸和氨基酸序列比较发现,ILTV3个强毒株（王岗株,Throne 882株和632株)gB基因的核苷酸序列在第89位上均缺失1个碱基G,而在第102位核苷酸处又插入了1个碱基A,从而引起了在氨基酸序列中第29～32位5个氨基酸的移码突变。此变异是否与病毒的毒力有关尚待进一步研究。  相似文献   

PCR技术及其在兽医领域中的应用     

王柳  王兴洲 《黑龙江畜牧兽医》1994,(3):32-34

阐述了ＰＣＲ技术在原理及近年来推出的ＰＣＲ新方法，着重讨论了ＰＣＲ技术在检测感染病毒，疾病的鉴别诊断，区别野毒与重组疫苗毒，鉴别不同的病毒株，制备标记探针等方面的应用。  相似文献   

传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达   总被引：16，自引：0，他引：16  

张绍杰  童光志  王柳 《中国预防兽医学报》2000,22(3):205-208

本试验首先用ＰＣＲ方法扩增出ＩＬＴＶ ｇＢ基因,将其克隆到质粒ｐＵＣ１１９中,并进行了序列分析。将克隆的ｇＢ基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中,然后,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）中,筛选蓝色的重组病毒,并对其进行了６轮蚀斑纯化。该重组病毒通过ＰＣＲ方法鉴定证明其基因组中含有完整的鸡传染性喉气管炎ｇＢ基因,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ实验证明了该重组鸡痘病毒表达了鸡传染性喉气管炎ｇＢ糖蛋白。  相似文献   

猪生殖-呼吸道综合征病毒CH-1_株N基因的原核表达     

仇华吉  童光志  郭宝清  王柳  张绍杰  王玫  蔡雪晖  于力  刘宝全 《中国预防兽医学报》1999,(1)

将ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株Ｎ基因用ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ双酶切从重组质粒ｐＵＣ１８ＯＲＦ７切下后,插入到原核表达载体ｐＢＶ２２０的ＰＲ、ＰＬ启动子下游,得到重组表达质粒ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７。转化了ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７的大肠杆菌ＪＭ８３经诱导培养后,用ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达产物。结果表明ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株的Ｎ基因在原核载体上得到高效表达,表达产物占菌体总蛋白的１５３％。表达蛋白可望成为有价值的ＰＲＲＳ诊断抗原。  相似文献   

高空气象探测系统现状分析与未来发展     

王柳 《农村经济与科技》2018,(4)

"十三五"气象改革发展极大提高了我国气象综合能力,促进了气象事业的不断发展。虽然我国气象事业已经取得了很可观的成绩,但与其他气象强国相比,我国高空气象探测仍然较为落后。因此,本文主要对我国高空气象探测系统的现状进行分析,然后指出高空气象探测的未来发展趋势,希望能够进一步实现我国气象事业的进步,逐渐缩小与其他气象强国间的差距。  相似文献   

流向统计法分析中国粮食安全状况及高标准农田需求预测   总被引：1，自引：0，他引：1  

王柳  魏秀菊  张跃峰  张学军  赵爱琴  张秋玲  吴政文  陈松云 《中国农业大学学报》2021,26(3):124-137

加强高标准农田建设,提升国家粮食安全保障能力已经成为国家战略。为预测2020—2030年高标准农田需求量,本研究基于中国国家统计局、海关总署等相关数据,利用流向统计法从粮食、谷物和口粮自给率3个角度分析了中国粮食安全现状,并建立了预测模型,对2020、2025和2030年中国粮食、谷物和口粮的需求量进行预测;基于各省级行政区可建高标准农田面积、农业用水量、单位面积高标准农田粮食产能提高量和复种指数,预测了2020、2025和2030年保障我国粮食安全需建高标准农田面积。结果表明:1)近年来中国粮食、谷物和口粮产量呈增长趋势;1997—2018年粮食、谷物和口粮的自给率分别在86.24%～118.15%、88.67%～121.67%、84.25%～123.98%,2006年以来中国守住了"谷物基本自给、口粮绝对安全"的战略底线,但距《国家粮食安全中长期规划纲要》中粮食自给率95%以上的要求仍存在差距,需进一步提升国家粮食安全保障能力,增建高标准农田是保障粮食安全的重要战略;2)根据建立的模型预测2020、2025和2030年粮食需求量分别为72 318、72 673和72 724万t,谷物需求量分别为67 898、68 251和68 301万t,口粮需求量分别为32 811、33 863和34 914万t;统计检验及验证表明预测结果可信;3)2018年已建成的高标准农田已能满足我国90%的粮食自给率需求;95%自给率粮食安全条件下2020、2025和2030年分别需求6 844、7 125和7 165万hm2(10.27、10.69和10.75亿亩)的高标准农田。预测值与《乡村振兴战略规划(2018—2022年)》提出的到2022年建成10亿亩(6 667万hm2)高标准农田的指标接近,该研究结果支撑了规划指标的科学性,亦可为未来10年我国高标准农田建设数量及进度控制提供参考,研究为宏观预测粮食及耕地需求提供了一种方法。  相似文献