马传染性贫血病病毒L株前病毒全基因组核苷酸序列分析     

刘红全  王柳  杨志彪  孔宪刚  童光志 《中国农业科学》2001,34(6):690-696

 本实验所用的马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）Ｌ株（ＥＩＡＶ－Ｌ）是我国研制成功的ＥＩＡＶ弱毒疫苗的原始强毒株。以ＥＩＡＶ－Ｌ感染马外周血液白细胞中ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术，分４个片段扩增ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒ＤＮＡ，并分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，得到 ４个重组质粒ｐ２．８、ｐ２．４、ｐ３．１和 ｐ１．２，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全序列。ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全长 ８２３５ｂｐ，其中 Ｇ＋Ｃ含量为 ３８％。通过使用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ分析，ＥＩＡＶ－Ｌ与马传贫驴强毒和马传贫驴白细胞疫苗毒序列同源性分别为９８．４％和９６．９％。同源性如此接近反映了它们之间的亲缘关系，另外 ＥＩＡＶ－Ｌ与驴强毒的同源性高于其与驴白细胞弱毒疫苗株的同源性，这符合驴白细胞弱毒疫苗株的衍生过程。基因组两端是长为３１６ｂｐ的ＬＴＲ，其中Ｕ３为１９７ｂｐ，Ｒ为８０ＢＰ，Ｕ５为３９ｂｐ。前病毒基因组有 ３个较大的开放阅读框架（ＯＲＦ），分别编码 ｇａｇ、ｐｏｌ和 ｅｎｖ基因。ｇａｇ基因位于 ７１３～１９１２位碱基之间，全长１２００ｂｐ；ｐｏｌ基因位于 １７０８～５１０９位碱基之间，全长  相似文献   

密云县农民专业合作社服务体系创新与探索     

王柳  赵铁梅 《中国农民合作社》2014,(6):43-44

2008年6月,北京市密云县农民专业合作社服务中心（以下简称“服务中心”）正式成立,成为全国首家服务于合作社的专门机构。服务中心立足密云县生态涵养发展区功能定位,不断完善服务体系,扎实推进合作社规范化、标准化、产业化、品牌化建设;始终突出“服务”职能,创造性地开展各项工作,推出了合作社“八大服务平台”,促进合作社不断规范壮大。  相似文献   

种植速生桉前景看好     

王柳 《农村百事通》2004,(17)

最近,有业内人士指出,随着我国造纸业迅猛发展,造纸原料需求不断增加,作为造纸优质原材的桉木片供不应求,开发速生桉前景看好。近年,日本、加拿大、新加坡、泰国的商人纷纷抢滩广东省,租地造林,兴办林纸一体化企业。广东华威、绿海等私营企业也不示弱,把目光瞄向山地、投入巨资营造速生桉丰产林。专家介绍,桉树对地理条件要求不严,坡度在25度以下山地可种植,技术要求不高,但必须科学造林,选用良种壮苗和足量追肥是保证速生桉丰产的关键。(广东王柳)种植速生桉前景看好!广东@王柳  相似文献   

跟踪学科前沿，引导学科发展——《农业工程学报》的发展探索   总被引：1，自引：1，他引：1  

魏秀菊  王应宽  王柳  杨邦杰 《农业工程学报》2006,22(3):171-175

论述了《农业工程学报》跟踪农业工程学科发展的成功经验，详细分析了未来《农业工程学报》跟踪学科各个专业的报道方向。指出随着学科的发展及时调整学术期刊的报道方向是科技学术期刊的任务和职责，是使期刊保证及时反映相关学科的发展，保持在学科发展中应有的促进作用，在众多期刊的竞争中立于不败之地的保证。在充分分析中国学术期刊面临的形势和问题、机遇与挑战的基础上，提出了学术期刊如何规避不利因素等应对策略，为中国科技学术期刊的发展提供参考。  相似文献   

马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒株L启动子功能的研究     

王柳  杨志彪  仇华吉 《中国预防兽医学报》2000,22(6)

  相似文献   

带有组氨酸标签的马传染性贫血病毒感染性分子克隆的构建     

温建新  仇华吉  涂亚斌  王柳  彭金美  童光志 《中国预防兽医学报》2005,27(3):193-195

马传染性贫血(EIA)弱毒疫苗的广泛使用存在野毒和疫苗毒鉴别困难的问题.本研究以已构建的马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆(pOK8266)为基础,在其S2基因内引入NspV酶切位点,将人工合成的编码6个组氨酸的寡核苷酸插入NspV位点,获得带有组氨酸标签的重组质粒pOK8266-HIS.将pOK8266-HIS转染驴白细胞,将驴白细胞转染产物传至第6代时,在电镜下观察到了典型的马传染性贫血病毒粒子.提取pOK8266-HIS衍生病毒的前病毒基因组DNA,通过PCR扩增和测序表明,衍生病毒基因组中引入了6个组氨酸标签,从而获得了带有分子标志的马传染性贫血弱毒疫苗株,为野毒株和疫苗病毒的鉴别诊断奠定了基础.本研究还证明了S2基因中的插入突变并不影响马传染性贫血病毒的体外复制.  相似文献   

连栋玻璃温室采暖热负荷计算方法   总被引：1，自引：4，他引：1  

富建鲁  周长吉  王柳 《农业工程学报》2020,36(21):235-242

采暖热负荷是温室采暖系统设计中最基本的参数,为了研究随着内保温幕等设备的普及应用和温室密闭性的改善,现行标准体系下计算出的温室热负荷是否仍旧适用,该研究比较了中国和美国的共6个标准中的采暖热负荷计算方法,并以北京地区连栋玻璃温室为例进行采暖热负荷的定量分析。研究表明,基础墙传热热损失约占围护结构总热损失的0.1%,地面热损失占温室总热负荷的1%左右,两者均不是影响温室采暖热负荷的主要因素。计算表明,按照6个标准分别计算出的温室单位面积采暖热负荷最小为230.10 W/m2,最大为305.24 W/m2,相互之间差异较大,而且与温室实际配置散热器的散热量139.61 W/m2相比整体存在明显差距。在考虑内保温幕保温作用后温室的单位面积采暖热负荷最小为101.56 W/m2,最大为176.69 W/m2,如剔除中国民用与工业建筑中由于没有考虑玻璃拼缝造成冷风渗透热损失偏低的最小值,温室专用标准的热负荷计算方法基本符合实际情况。为此,研究提出在温室采暖热负荷计算中应充分考虑温室保温幕的作用,冷风渗透热损失应按换气次数法而非缝隙法计算。研究结果可为中国连栋玻璃温室采暖热负荷计算科学化、精准化、标准化提供依据。  相似文献   

马传染性贫血病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建   总被引：7，自引：1，他引：7  

王柳  童光志  仇华吉  谷守林  涂亚斌  杨志彪 《中国农业科学》2003,36(12):1560-1565

 采用PCR方法分 3段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株 (EIAVDLA)的前病毒DNA ,这 3个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组 ,PCR产物经克隆后顺次连接 ,获得 1个含有EIAV全基因 (8.0kb)的重组质粒 ,将其命名为p8.0。将此 8.0kbEIAV全基因再亚克隆到含有一完整EIAVDLA株长末端重复序列的质粒中 ,获得一含有EIAV驴白细胞弱毒前病毒全基因的重组质粒 ,将其命名为p8.2 ,经核苷酸序列分析 ,证明p8.2含有EIAV前病毒的全基因。用p8.2转染驴白细胞 ,将其作为种毒进行传代 ,于感染该克隆毒的细胞培养上清中检测出了反转录酶活性 ,说明在驴白细胞中由p8.2衍生出了EIA病毒。驴白细胞经该克隆毒感染后 ,第 4天出现病变 ,经透射电镜可观察到典型的马传染性贫血病毒粒子 ,进一步证明p8.2具有感染性 ,笔者获得了马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆 ,为进一步在分子水平上阐明我国EIAV疫苗株的减毒机理和免疫保护机制奠定了基础  相似文献   

牛传染性鼻气管炎病毒tk基因的克隆   总被引：2，自引：0，他引：2  

王柳  于力 《中国兽医学报》1995,15(2):116-120

根据牛传染性鼻气管炎病毒ＬＡ株的物理图谱及Ｃｏｐｅｒ株和ＬＡ标ｔｋ基因在基因组中的定位，将ＬＡ株ＤＮＡ ＨｉｎｄⅢＡ片段中的ＳａｌＩ－ＳａｌＩ亚片段、ＢｇｌⅢ－ＳａｌＩ双酶切亚片段分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ中，筛选出３个重组质粒ｐ＾ｔｋ－１，Ｐｔｋ－２和Ｐｔｋ－３，其外源片段大小分别为２．７ｋｂ，１．１ｋｂ和１．６ｋｂ。经酶切分析及同源核酸探针杂交试验表明，２．７ｋｂ ＳａｌＩ－  相似文献   

茶艺表演中古典音乐的选择和应用分析     

王柳 《福建茶叶》2017,(2)

一场美轮美奂的茶艺表演,需要演出者出众的形象与气质,需要精心布置演出场地,更需要空灵、清雅的背景音乐烘托和渲染。古典音乐的意境恰好与茶艺表演的文化内涵相得益彰,给观众以视觉与听觉的双重享受,在古典名曲的点缀下,彰显茶艺的独特魅力,给人以心灵的洗涤。  相似文献