马铃薯Y病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制     

乔开  赵锐佳  黄维依  蔡红 《植物检疫》2023,(4):23-27

选取马铃薯Y病毒（potato virus Y,PVY）代表株（NC＿001616.1）外壳蛋白基因37～281区间，采用化学合成方法合成目标序列，将其连接到原核表达载体pET-32a（+），并转化至大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达出45 kDa融合蛋白，回收后免疫日本大耳白兔制备抗血清。Western Blot分析多克隆抗体特异性良好，后制备25 nm胶体金，标记PVY CP37-281多克隆抗体，制备胶体金免疫层析试纸条。结果表明，试纸条能在15 min内检出PVY,PVY病株汁液检测稀释限度可达106倍（W/V），使用常见复合侵染烟草检测，未出现交叉反应。由此可知，该试纸条操作简便，反应灵敏特异，适用于田间一线及种薯生产中马铃薯Y病毒的检测。  相似文献   

三叶青两个受体蛋白基因的克隆及功能分析     

林国卫  武思梦  张悦  蔡红  闻静 《山东农业科学》2023,(6):7-14

植物细胞受体类蛋白是一类重要的结构蛋白，在环境信号感知及细胞间信息传递中起重要作用。本研究克隆了三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的两个受体蛋白基因ThRLP1与ThRLK1,并对其进行了生物信息学分析、器官特异性表达分析和在块根发育不同时期的表达分析，以明确两基因与三叶青芽发育和块根形成的相关性。生物信息学分析表明，所克隆的两个基因中一个为细胞外受体类蛋白基因(ThRLP1),其氨基酸序列具有特征的亮氨酸重复序列，亚细胞定位推测在细胞壁；另一个为质膜受体类蛋白激酶基因(ThRLK1),推测氨基酸序列中具有特征的丝氨酸/苏氨酸激酶的催化结构域，亚细胞定位推测在细胞核。器官特异性表达分析发现ThRLP1在块根中的表达量显著低于其他器官，ThRLK1在块根中的表达量显著低于枝蔓但高于其他器官，两个基因的表达水平并没有显示出与芽发育有相关性；块根发育不同时期表达量分析表明，ThRLP1在块根初始膨大期的表达量显著低于其他时期，ThRLK1表达量随块根发育进程而提高，ThRLK1基因的表达与块根发育进程呈现出一定的正相关性。所克隆的两个受体蛋白...  相似文献