牛副流感病毒3型NP单抗的制备及初步应用     

吕闯  朱远茂  董秀梅  蔡红  于作  高欲燃  薛飞 《中国预防兽医学报》2011,33(12)

为制备牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的重组NP (rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用以BPIV3为检测抗原的间接ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得1株稳定分泌抗NP特异性MAb的杂交瘤细胞株(5E5)并制备腹水,采用rNP及BPIV3包被的ELISA效价分别是2×106和1.28×105.间接ELISA、western blot、IFA试验表明该MAb具有良好的反应性和特异性.经抗体亚类鉴定该MAb亚类为IgGl/κ.特异性试验表明该MAb不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒反应.免疫组化试验表明该MAb可以检测BPIV3感染动物体内的病原.该MAb还可用于建立检测BPIV3病原及抗体的诊断方法,同时为研究NP的结构和功能提供了条件.  相似文献   

应用分子生物学方法检测植原体研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

蔡红  杨根华  孔宝华  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》2002,17(2):188-191

 从血清学、核酸杂交技术以及PCR技术等方面综述了国内外植原体检测研究的概况及最新进展。  相似文献   

高等教育中基础有机化学教学方法的类比   总被引：1，自引：0，他引：1  

罗蒨  葛兴  郑燕英  苑嗣纯  蔡红 《北京农学院学报》2007,(Z1)

高等教育的特点是信息量大,因此好的教学方法是学好有机化学的关键。通过各种教学方法的类比,加强各种教学方法的紧密联系,能够有效地提高学生学习的兴趣及综合能力的培养。  相似文献   

改良茚三酮比色法测定土壤蛋白酶活性的研究   总被引：10，自引：0，他引：10       下载免费PDF全文

蔡红  沈仁芳 《土壤学报》2005,42(2):306-313

通过引入Ca2 为蛋白酶激活剂、以Pb(CH3 COO) 2 和Na2 C2 O4—CH3 COOH混合试剂作为除杂剂、将抗坏血酸与KIO3 结合起来以提高茚三酮比色法测定氨基酸的灵敏度和稳定性,并使培养和测定两个过程的pH缓冲体系有机结合起来,从而全面改进了土壤蛋白酶活性的测定方法。用该方法测定了潮土、黄棕壤和红壤的蛋白酶活性,并与常用的Folin比色法进行了试验比较,证明该方法适合于测定中性、碱性土壤的蛋白酶活性并优于Folin比色法  相似文献   

云南花生丛枝植原体secY基因序列分析及结构预测     

万琼莲  蔡红  杨子祥  王连春    陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》2013,28(2):163-169

 对采自云南元谋的花生丛枝植株总DNA进行secY基因的巢式PCR扩增,得到约1700bp的特异扩增片段,将该扩增产物克隆后进行序列测定,表明该片段长1709bp,该序列包括部分rpl15基因、全部secY基因序列以及部分的map基因,为植原体部分spc核糖体蛋白操纵子,其中secY基因编码的蛋白包括420个氨基酸,为含有10个明显跨膜区的整合性跨膜蛋白。通过同源性比对及构建的系统进化树,表明该株系与来源于台湾、海南的花生丛枝植原体亲缘关系最近,确定了该株系属于16SrII A亚组成员。该分类结果与基于16SrDNA及rp基因的分析结果一致。  相似文献   

烟草赤星病菌遗传多样性的ISSR和RAPD标记比较分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡中会  赵立华  孔宝华  陈海如  范静华  刘飞  李小鹏  蔡红  杨根华  秦西云  方敦煌 《西南农业学报》2012,(3):917-921

采用ISSR和RAPD 2种分子标记方法对来自不同地区的28份烟草赤星病菌进行遗传多样性分析,筛选后选用10个ISSR引物和10个RAPD引物,ISSR扩增出多态性条带112条,多态性条带百分率为86.82%,菌株间相似性系数为0.53～0.97;RAPD引物扩增出多态性条带70条,多态性条带百分率为81.39%,菌株间相似性系数为0.57～0.94;用SPSS17.0软件对2种标记遗传距离进行相关性分析,发现2种分子标记结果呈显著正相关,表明2种分子标记方法都适合于烟草赤星病菌遗传多样性研究,ISSR是一种多态性优于RAPD的标记技术。根据2种标记的结果,利用NTSYS软件按UPGMA方法进行聚类分析,发现烟草赤星病菌遗传多样性与地理差异没有显著相关性。  相似文献   

仔猪水肿病病原菌的分离鉴定     

许信刚  张琪  张耀相  蔡红 《猪业科学》2002,19(11):15-17

从某猪场发生水肿病仔猪的脾脏中分离到一种细菌,通过菌体形态,菌落形态,染色特性,培养特性,生化试验等一系列的系统鉴定,确定为引起仔猪水肿病的大肠埃希氏菌.动物致病性试验表明该菌对小白鼠有较强的致病性,引起小白鼠死亡.毒素试验证明该菌产生致水肿病2型类志贺毒素(SIT-2e),引起小白鼠发生水肿症状,该毒素对Vero细胞敏感,引起其死亡.药敏试验证明该菌对常见的抗生素不敏感.  相似文献   

侵染百合的黄瓜花叶病毒亚组Ⅱ分离物cp基因克隆和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵丹  孔宝华  李凡  蔡红  王连春  陈海如 《植物病理学报》2007,37(5):456-460

 从云南大理的东方型百合上得到黄瓜花叶病毒分离物(CMV-DL), ELISA检测初步确定为CMV亚组Ⅱ分离物, 设计并合成CMV亚组Ⅱ的特异引物, RT-PCR扩增得到1条约800 nt的特异片段, 经克隆及序列测定, 该片段长828 nt, 包含的外壳蛋白(CP)基因由657 nt组成。将该分离物的cp基因与其它14个CMV分离物进行同源性比较, 在核苷酸水平上与CMV亚组I和亚组Ⅱ的同源性分别为76.8%~78.1%和98.6%~99.2%;在氨基酸水平上与CMV亚组I和亚组Ⅱ的同源性分别为82.0%~84.3%和95.9%~100.0%。结果表明CMV-DL为CMV亚组Ⅱ成员。  相似文献   

香石竹斑驳病毒(CarMV)云南分离物CP基因的克隆和序列分析     

孔宝华  李文君  常胜军  蔡红  刘进元  陈海如 《植物病理学报》2003,33(2):187-188

 香石竹斑驳病毒(CarMV)是侵染香石竹的主要病毒。关于该病毒的株系和不同地区分离物的病毒核酸序列研究报道较少。  相似文献   

云南烟草丛枝症病害的超微细胞病变研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨根华  蔡红  张修国  吴建宇  陈海如  吴仕梅 《山东农业大学学报(自然科学版)》2000,31(3):269-272

超薄切片观察云南烟草丛枝症病害的病叶组织，并抽提试验材料的总核酸电泳检测。病组织中检测到与烟草丛枝症病害相关的低分子量RNA，切片中未观察到病毒粒子和植原体等病原，薄壁细胞中发现细胞膜系统的畸变：质膜体和细胞质泡囊，质膜体(1000～2000nm)结构类似于病毒形成的旁壁体。细胞质泡囊(100-200nm)是含纤维状物的双膜的囊。运用不同盐浓度介质的RNase处理病变细胞组织，发现高盐介质的Rnase(2XSSX)不能消解小囊泡中的纤维状物，而低盐介质的Rnase(O．01XSSC)可以消解小囊泡中的纤维状物。文献显示这些病变是类病毒和某些病毒侵染的特征，初步认为这是云南烟草丛枝症病害发病早期细胞内出现小分子核酸侵染的细胞病变特征。  相似文献