山东省3家鹦鹉养殖场多瘤病和喙羽病的病原检测与序列分析     

吴汝娟  李玉杰  谢立香  吴明庆  马婧姣  王伟利  田夫林  邬静 《中国动物检疫》2020,37(3):103-108

2018年山东省某养殖场发生大量幼龄鹦鹉死亡事件,疑似为病毒感染。为探寻病因,开展了该场及省内另外两个鹦鹉养殖场的流行病学调查。利用PCR技术对临床样品中提取的DNA或RNA进行检测,结果发现新城疫与禽流感病毒均呈阴性,而禽多瘤病毒(APV1)与鹦鹉喙羽病病毒(PBFDV)呈现为强阳性,由此推断此3个鹦鹉养殖场存在APV1和PBFDV感染,平均病毒检出率分别为67.9%与71.4%,共感染检出率率为58.0%。对阳性样品进化全基因分析发现:区域内的PBFDV流行毒株同源性高,与该地区早期报道的毒株亲缘关系较为接近;APV1的VP1基因同源性较高,与欧洲分离毒株亲缘关系较为接近,说明我国流行的APV1或来源于进口鹦鹉。本研究警示,需要加强鹦鹉疾病防控,严格鹦鹉进出口检疫,并制定和健全标准的鹦鹉病检疫程序。  相似文献   

非洲猪瘟病毒TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法建立     

任名  牛婷婷  于婉琪  孙海伟  邬静  陈鸿军 《中国动物传染病学报》2020,(3):42-48

为建立一种快速、准确的非洲猪瘟病毒(ASFV)分子检测方法,以2018年8月分离的SY18毒株P72基因序列(GenBank登录号:MH713612.1)为参考毒株,人工合成质粒标准品,命名为pcDNA3-P72,基于该毒株P72基因序列,在1627~1876 bp处设计一对特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系及条件,本研究成功建立了基于P72基因的TaqMan探针qPCR方法,并与OIE的特异性引物和TaqMan探针进行灵敏度、稳定性和特异性比较.结果显示:本研究建立的qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R^2值可达到0.9932,灵敏性最低能检测到10 copies/μL,与OIE引物扩增灵敏度相当,比普通PCR方法高100倍.该方法重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%.这一方法为我国非洲猪瘟疫情的快速确诊提供了必要的分子诊断工具.  相似文献   

T-2毒素对Sertoli细胞氧化应激和DNA损伤作用的研究     

袁莉芸  邬静  袁慧 《中国兽医学报》2014,(3):481-484

用不同浓度的T-2毒素染毒Sertoli细胞24h。染毒结束后采用MTT法检测细胞相对活力,常规方法检测SOD、过氧化氢酶(CAT)和谷胱肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量,彗星试验检测DNA损伤。结果显示,与对照组比较,随着T-2毒素染毒剂量的增加,Sertoli细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、CAT和GSH-Px活性显著下降(P<0.05),MDA含量显著上升(P<0.05),DNA的损伤程度则加重的极为显著(P<0.01)。结果表明,T-2毒素可显著抑制Sertoli细胞活力,并通过氧化应激损伤细胞的DNA。  相似文献   

棉酚对猪原代培养黄体细胞增殖和凋亡的影响     

龙安梅  邬静  袁莉芸  袁慧 《中国兽医学报》2009,29(10)

采用长大杂母猪原代培养的黄体细胞,通过MTT法、DNA Ladder和TUNEL检测法,探讨了0、0.4、2、10、50 mg/L棉酚对猪原代培养黄体细胞增殖和凋亡的影响.结果表明,棉酚分别染毒24、48 h后,与对照组比较,各浓度组对黄体细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),黄体细胞的凋亡率达5%～23%;这种细胞毒性作用呈剂量相关性,在一定剂量下,具有时间依赖关系.  相似文献   

非洲猪瘟病毒CRISPR/Cas9敲除技术研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

任名  郭晓宇  邬静  李金祥  朱鸿飞  陈鸿军 《中国动物传染病学报》2018,(4)

非洲猪瘟(african swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,严重危害着全球养猪业。目前尚无商品化ASFV疫苗用于ASF的防控。传统ASFV疫苗研究存在不同程度的局限性。通过建立ASFV的CRISPR/Cas9基因敲除技术平台,将为非洲猪瘟病毒基因功能研究提供便捷的工具。  相似文献