1种用于分离猪肠道CD3⁺T细胞方法的建立     

陈忠良  黄振 《现代畜牧科技》2024,(3):24-27

CD3⁺T细胞是猪肠道免疫系统的重要组成部分,对肠道病毒感染研究具有重要价值。该研究开发了一种采用磁珠富集手段从猪小肠组织中分离原代CD3⁺T细胞的方法。该方法将为研究猪肠道免疫系统功能提供合适的细胞模型,还可加速抗病毒药物和疫苗研发。  相似文献   

玉米转录因子EREB58启动子分析     

陈忠良  李圣彦  汪海  黄大昉  郎志宏 《中国农业科技导报》2016,18(6):23-30

玉米EREB58转录因子能够调控萜类合成酶基因TPS10的表达,启动玉米抗虫间接防御体系。但是目前对于EREB58的转录调控机制还是未知。克隆得到EREB58基因的1 193 bp的启动子序列,通过生物信息学分析发现在启动子序列中存在多个与植物防御相关的顺式作用元件,如ABRE、Box-W1、GARE motif和TCA元件。将不同长度5’端缺失的启动子与GUS报告基因相连构建植物表达载体转化拟南芥,转基因拟南芥进行GUS组织化学染色和GUS酶活性分析,结果显示:正常情况下EREB58PF1-PF7和PF9无GUS染色,但PF8有GUS染色;Me JA或亚洲玉米螟处理后PF1-PF7有GUS染色,PF8无明显变化,PF9仍无GUS染色。GUS酶活性分析与GUS组织化学染色结果一致。以上结果表明:EREB58启动子的-323至-270和-270至-183区段是启动子的功能区段,且-323至-273区段含有抑制EREB58基因转录的顺式作用元件,-273至-183区段是EREB58基因转录所必需的,这为后续研究EREB58的转录调控机制奠定基础。  相似文献   

基于CGE技术的甘蔗SSR-PCR反应体系优化          下载免费PDF全文

桂意云  陈忠良  秦翠鲜  汪淼  刘丽敏  李杨瑞  黄东亮 《南方农业学报》2016,47(9):1463-1469

【目的】优化基于毛细管凝胶电泳(CGE)技术的甘蔗SSR-PCR反应体系,为甘蔗遗传多样性和亲缘关系研究、分子辅助育种及遗传图谱构建提供技术支持。【方法】基于CGE技术,采用正交试验设计,选择dNTPs浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和DNA模板量为考察因素进行优化,确定最佳SSR-PCR反应体系,并用于8个甘蔗种质资源材料的遗传多样性分析。【结果】最佳SSR-PCR反应体系(20μL):dNTPs浓度0.15 mmol/L,DNA聚合酶1.5 U,引物浓度0.50μmol/L,DNA模板量25 ng。利用该体系对8份来自不同国家地域的甘蔗种质材料进行遗传多样性分析,发现8对SSR引物共扩增出101个片段,其中多态性片段为93个,多态性比率为92.1%。聚类分析结果表明,参试材料间的遗传相似性系数为0.521~0.871,在相似性系数为0.614处,所有参试材料可分为两大类,3份国外种质材料PINDAR、CP72-1210、CP84-1198与ROC20、GT69-156聚为一类;而ROC26、GT02-237和GT97-69聚为另一类。【结论】基于CGE技术的SSR-PCR反应体系检测结果稳定,重复性好,适用于甘蔗的遗传分析及遗传作图。  相似文献   

中蜂过箱绑脾巧用小橡皮圈     

陈忠良 《蜜蜂杂志》2010,30(3):37-37

<正>凡中蜂过箱者,大都要把原巢脾按封盖子脾、粉脾、优质空巢脾等分类裁接镶满框,经人工绑扎牢固后,交还蜂群继续使用。绑扎巢脾,各地蜂友方法技巧很多,用材也不一样。选用竹签+小橡皮圈,不仅绑脾简单快捷,而且在拆竹签时不用提起巢脾,仅靠钩针拉起上梁边的  相似文献   

甘蔗B家族蔗糖磷酸合成酶基因SotSPSB的克隆及原核表达     

黄东亮  秦翠鲜  陈忠良  桂意云  李双喜  汪淼  廖青  李杨瑞 《广西农业科学》2013,(4):545-551

【目的】克隆甘蔗B家族s0心PsB基因并进行原核表达,为进一步研究甘蔗SPS酶学特性及SPS活性调控机制奠定基础。【方法】在进化分析的基础上,通过同源克隆获得甘蔗SofSPSB基因部分序列,再结合RACE技术获得全长cDNA序列。扩增SofSPSB基因ORF并连到原核表达载体pETBlue－2上导入大肠杆菌BL21（DE3）中表达。【结果】通过比对B家族中进化关系很近的玉米（Zeamays）ZmSPS1和水稻（Oryzasativa）OsSPS1基因序列,并在保守区设计一对引物扩增获得甘蔗B家族SPS基因（SolSPSB）2330bp序列。结合5’－RACE和3’－RACE技术获得3481 bp SofSPSB基因全长cDNA序列,该序列包含一个3225bp的开放阅读框（0I江）;起始密码子（ATG）位于转录起始位点后56bp处,终止密码子（TGA）后有一段201bp的非编码序列,并带有真核生物典型的polyA尾巴;编码1074个氨基酸,SofSPSB与Zm—SPS1、OsSPS1的核苷酸序列同源性分别为94．7％和81．3％,氨基酸序列同源性分别为96．0％和83．9％;其理论分子量Mw=118．96kDa,等电点pI=6．30。经原核表达后纯化获得带6xHis标签的融合蛋白。【结论】克隆获得甘蔗B家族Sol-SPSB基因全长cDNA序列,成功构建了SoPSPSB基因原核表达载体,使其在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。  相似文献   

桂糖42号胚性愈伤组织高效诱导及相关内源激素的动态变化     

秦翠鲜  廖芬  潘有强  陈忠良 《广西糖业》2023,(6):1-9

以优良甘蔗品种桂糖42号心叶为外植体,以MS为基本培养基,探究不同浓度2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)及营养成分[水解酪蛋白(CH)和椰汁(CW)]对甘蔗胚性愈伤组织诱导效果的影响,优化甘蔗胚性愈伤组织诱导培养基;测定诱导胚性愈伤组织发生过程中不同组织样品的4种激素[玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA₃)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)]含量。结果表明,甘蔗心叶在添加3.0 mg/L 2,4-D的MS培养基中其愈伤组织诱导率达93.33%,第一代愈伤组织转接于添加3.0 mg/L 2,4-D和100.0 mL/L CW的MS培养基,其胚性愈伤组织诱导率达83.33%;在甘蔗胚性愈伤组织诱导过程中,内源激素ZR和GA₃含量呈下降趋势,IAA和ABA含量呈上升趋势,胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织间的4种激素含量均存在显著差异(P<0.05),其中,胚性愈伤组织的GA₃含量是非胚性愈伤组织的1.77倍。本研究将甘蔗愈伤组织诱导培养基优化为MS+3.0 mg/L 2,4-D,继代培养基优化为MS+3.0 mg/L 2,4...  相似文献   

用(?)鳎鱼生产鱼片技术筒介鲁     

陈忠良 《中国水产》1993,(11)

今春以来,舟山马面鱼(橡皮鱼)产量蜕减,许多生产烤鱼片的企业停工待料,厂家积极寻找马面鱼替代鱼类,经过多方试验,(?)鳎鱼被选中,使昔日不起眼的鱼种身价百倍。  相似文献   

五个甘蔗品种(系)的生长性能及相关性分析     

周丽  何海波  刘嘉琪  秦翠鲜  黄东亮  黄律  陈忠良 《广西糖业》2019,(6)

  相似文献   

我国甘蔗新品种(系)的抗旱性研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

谢金兰  吴建明  黄杏  丘立航  李强  陈忠良 《江苏农业科学》2015,43(3):108-112

为了筛选抗旱性强的甘蔗新品种(系),采用桶栽和人工控水的方法,以我国当前甘蔗主栽品种新台糖22号为参照,通过调查植株枯叶率并测定叶片电导率、叶绿素含量、丙二醛含量、脯氨酸含量、过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性等生理指标的变化,对12个甘蔗新品种(系)进行抗旱性研究。结果表明,桂糖03/2287、桂辐98/296的抗旱性表现最好,桂糖31号、粤糖60号、桂糖30号、桂糖33号、桂糖42号也表现出较好的抗旱性;抗旱性综合表现比新台糖22号好的有9个品种(系)。  相似文献   

小麦种内和种间杂交的效应          下载免费PDF全文

С.Боранбаев  陈忠良 《麦类作物学报》1987,(3)

小麦品种主要是用杂交方法选育的.杂交时采用去除雄花的限量-自由授粉、强制授粉和重复授粉(?),七十年代前期,大多数科研机关多半是用前两种方法.1936年,?改进了限量-自由授粉法,把母本穗和父本品种的穗子套在一个隔离袋内,并定期抖动,这就大大地提高了结实率.强制授粉,取得了更好的效果(3?1966;? H.M.等,1971).但利用重复授粉法获得的籽粒数量最  相似文献