白茶萎凋过程中儿茶素合成关键酶基因表达分析          下载免费PDF全文

陈静  俞滢  张丹丹  陈丹  杨国一  陈桂信  叶乃兴 《南方农业学报》2016,47(8):1364-1369

[目的]研究白茶萎凋过程中茶多酚、儿茶素组分含量变化与其合成途径中关键酶基因的动态表达,为优化白茶的萎凋工艺提供参考依据.[方法]以不同萎凋阶段的白茶为原料,分别采用福林酚(Folin-Ciocalten)比色法和高效液相色谱法(HPLC)测定茶多酚、儿茶素组分含量的变化,并以实时荧光定量PCR检测白茶萎凋过程中与儿茶素物质代谢合成相关基因(PAL、C4H、CHS、CHI、F3'5'H、FYH、F3H、DFR、LAR、ANS、ANR和UGGT)的相对表达量.[结果]白茶萎凋过程中茶多酚含量呈逐渐降低趋势,儿茶素组分中表儿茶素(EC)、没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)含量整体上呈先上升后下降的变化趋势,且均在萎凋历时32h出现最大值.实时荧光定量PCR检测结果表明,儿茶素生物合成途径关键酶基因PAL、C4H、CHI、F3H、F3'H、F35'H、DFR、LAR、ANR和UGG丁均在萎凋历时32 b呈上调表达,CH基因则随萎凋历时的增加呈下调表达趋势,ANS基因表达在整个萎凋过程中呈先上升后下降的变化趋势,在萎凋历时16 h达最大值.白茶萎凋过程中儿茶素合成途径关键基因表达水平具有调控儿茶素生物合成的作用.[结论]在白茶萎凋过程中,儿茶素生物合成途径关键酶基因PAL、C4H、F3H、FYH、DFR、LAR、ANR的表达与儿茶素组分单体EC、GC、EGC的积累规律基本一致,其最大值均出现在萎凋历时32 h,因此在制茶时可适当缩短萎凋时长,以提高白茶品质.  相似文献   

茉莉花萜类合成酶基因JsTPS的克隆及其表达分析     

俞滢  陈丹  孙君  吕恃衡  陈桂信  叶乃兴 《园艺学报》2016,43(2):356-364

以双瓣茉莉花[Jasminum sambac（L.）Ait]花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,克隆了萜类合成酶基因（JsTPS）的全长cDNA,该cDNA全长为1 884 bp,其中ORF为1 491 bp,编码496个氨基酸的蛋白,分子量56 989.7 D,与原核表达结果一致。序列分析结果表明,该基因编码的氨基酸序列与油橄榄（Olea europaea）的TPS2具有75%的同源性,同属于α-Farnesene synthase分支。采用荧光定量PCR技术检测JsTPS在茉莉花开放过程中的表达量变化,结果表明,表达量在未开放时（18：00）最低,在半开放时（22：00）达到最高。  相似文献   

茶树萜烯类香气物质合成相关酶研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

张冬桃  孙君  叶乃兴  陈桂信 《茶叶科学技术》2015,(2):68-79

萜烯类化合物与茶叶香气品质密切相关,茶叶中橙花醇、芳樟醇、橙花叔醇、α-法尼醇、α-紫罗兰酮、茶螺烯酮、石竹烯、古巴烯、柏木醇等萜烯类香气物质通过MVA途径(甲羟戊酸途径)和MEP途径(2-C-甲基-D-藓糖醇-4-磷酸途径)合成,调节机制复杂,在很大程度上影响茶叶的品质.本文综述了茶叶萜烯类香气物质合成途径中相关酶的研究进展,探讨该代谢途径未来的重点研究方向.  相似文献   

夜来香SAMT基因的分离与原核表达     

杨华丽  吕恃衡  蔡韡韡  郑鸿昌  潘东明  李子真  陈桂信 《热带作物学报》2015,36(10):1831-1838

为探究夜来香（Cestrum nocturnum）花香基因SAMT在花香代谢中的调控作用,以花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合,克隆夜来香SAMT基因的全长cDNA。结果表明：该cDNA的序列长度为1 493 bp,编码365个氨基酸,其中包含1 098 bp ORF、130 bp 5′UTR和265 bp 3′UTR,将其命名为CnSAMT;生物信息学分析结果表明：该基因所编码的氨基酸序列与烟草、番茄的同源性分别为98％和98％,属于甲基转移酶-7家族;原核表达结果表明：CnSAMT的蛋白表达产物约为42 ku,与软件预测的结果大致相同。采用染色体步移技术,克隆夜来香CnSAMT的5′端调控序列,结果表明：该序列长度为993 bp,且该序列除了含有TATA-box、CAAT-box等启动子核心元件外,还含有光、生长素、脱落酸、热胁迫、缺氧胁迫等外界环境条件响应的顺式作用元件。  相似文献   

橄榄基因组DNA提取及RAPD扩增条件优化   总被引：8，自引：0，他引：8  

聂珍素  赖钟雄  潘东明  郭玉琼  陈义挺  邓传远  陈桂信  吴金寿 《亚热带农业研究》2005,1(2):6-8

以橄榄叶片为材料,进行橄榄基因组DNA提取及RAPD扩增条件优化。试验表明,采用改良的SDS法,提取的DNA质量较高,适宜于RAPD分析。在25μL反应体积中,RAPD反应的优化体系为:18.5μLddH2O,0.5μLdNTP,2.5μlBuffer,1μL引物,0.5μLDNA模板,2μLTaqDNA聚合酶。  相似文献   

金柑多倍体诱导初探   总被引：3，自引：0，他引：3  

郑君强  陈露薇  罗筱玉  陈桂信  赖钟雄 《亚热带农业研究》2005,1(4):17-20

以秋水仙素为诱变剂,应用混培法和浸渍法诱导金柑(Fortunella crassifoliaSw ingl)多倍体,结果表明:浸渍法的诱导效果优于混培法;种子用0.1%秋水仙素浸渍60 h,多倍体诱变率最高,达22%;变异植株移栽的成活率高于二倍体;变异植株茎粗、矮化,叶片变大、蜡质层厚,叶色浓绿,气孔增大,气孔密度减少,具有较强的抗逆性。  相似文献   

植物生长调节剂对王官溪蜜柚汁胞粒化的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

潘东明  陈桂信  郑国华  林慧颖  佘文琴 《福建农林大学学报(自然科学版)》1998,(2)

以８～１０年生王官溪蜜柚（土柚砧）为试材,分别在盛花期、幼果期、果实膨大期以及采后贮藏期,采用植物生长调节剂ＮＡＡ、ＩＡＡ、ＧＡ３、２,４－Ｄ、ＢＡ、ＫＴ、ＰＰ３３３喷布（或洗果）处理,观察了上述植物生长调节剂对汁胞粒化的影响．试验结果表明,上述植物生长调节剂对汁胞粒化均产生了不同程度的影响．在花期和幼果期喷布ＫＴ、２,４－Ｄ、ＮＡＡ明显地抑制了汁胞粒化的发生和发展;用ＧＡ３在果实膨大期喷布或采后洗果有促进粒化作用的趋势．  相似文献   

羊蹄甲果荚中总RNA提取的新方法   总被引：12，自引：0，他引：12  

夏海武  吕柳新  陈桂信 《分子植物育种》2006,4(1):147-149

高质量RNA的获得是开展羊蹄甲分子生物学研究的基础,但要获得高质量的植物总RNA比较困难,RNA的提取方法会因植物材料的不同而有较大差异。目前已有多种从植物组织中提取RNA的方法。但是由于羊蹄甲中的次生物质含量较高,这些常用方法并不适用于羊蹄甲RNA的提取。本文介绍一种羊蹄甲果荚中总RNA的提取方法,它可以有效的排除羊蹄甲组织中大量存在的多酚类和多糖类物质的干扰。所得RNA样品经紫外分光光度计检测和1%琼脂糖凝胶电泳分析证明无明显降解,且具有较高的纯度。获得的RNA样品在纯度和浓度上都可以满足RT-PCR,Northernblot和cDNA文库构建等分子生物学实验的要求。本方法尤其适用于多酚和多糖含量较高的植物组织的RNA提取,且试剂简单经济,试验结果稳定,重现性强。  相似文献   

油(木奈)成熟胚愈伤组织的诱导与保持     

刘杰俊  陈露薇  黄伟明  陈桂信  潘东明 《亚热带农业研究》2006,2(1):12-14

以油木奈成熟胚为材料,对愈伤组织的诱导和保持进行了初步研究。结果表明:以WPM为基本培养基,当2,4-D浓度为2.0 mg.L-1时,成熟胚的诱导率最高,达73.54%;以MS为基本培养基,KT浓度一定时,2,4-D浓度为1.0 mg.L-1时,愈伤组织保持的效果较好。  相似文献   

琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘腾飞  陈桂信  潘东明 《园艺学报》2010,37(5):835-840

以琯溪蜜柚[Citrus grandis(L.)Osbeck'Guanximiyou']叶片为材料,比较了两种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响。结果表明,改良Zhang法与Peterson法相比,前者更适合于琯溪蜜柚HMW-DNA的提取。改良Zhang法用温和的物理方法破碎细胞壁,在一定的渗透压下保证细胞核的完整性,运用miracloth和低速离心去除大部分的多糖和细胞壁碎片,经显微观察,所提取的细胞核完整、纯净、质量高;将这些细胞核用低熔点琼脂糖包埋,以琼脂糖小块的方式保存细胞核,以保持核的稳定;琼脂糖小块的最适消化时间为48h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明所获得的HMW-DNA大于1Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化,适合于琯溪蜜柚BAC基因组文库的构建。  相似文献