Validation of the specificity and sensitivity of species-specific primers that provide a reliable molecular diagnostic for <Emphasis Type="Italic">Xiphinema diversicaudatum</Emphasis>, <Emphasis Type="Italic">X. index</Emphasis> and <Emphasis Type="Italic">X. vuittenezi</Emphasis>     

Judith Hübschen  Lilo Kling  Ulrike Ipach  Volker Zinkernagel  Nathalie Bosselut  Daniel Esmenjaud  Derek J.F. Brown  Roy Neilson 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2004,110(8):779-788

Xiphinema diversicaudatum and X. index are vector nematode species of economic importance in viticulture regions as they can transmit Arabis Mosaic, Grapevine Fanleaf and Strawberry Latent Ringspot viruses to grapevine. Wang et al. (2003) designed species-specific diagnostic primers from ribosomal genes for both these vector species as well as a vector and a non-vector species X. italiae and X. vuittenezi, respectively. Our study aimed to confirm the specificity and determine the sensitivity and reliability of the primers for the two vector species, X. diversicaudatumand X. indexwhen challenged with closely related longidorid species and general nematode communities typical of vineyard soil. With one exception, no PCR product was observed when the primers were tested against six Longidorus, one Paralongidorus and one Xiphinema non-target species. Occasionally (three out of eight replicate PCR reactions) a weak PCR product was noted when primers for X. index were tested with L. elongatus. Furthermore, when challenged with a range of non-target nematode species comprising the nematode community typical of viticulture soil, no PCR product was amplified. An experimental dilution series of extracted DNA rigorously demonstrated that DNA from an equivalent single specimen of the target virus-vector species, X. diversicaudatum and/or X. index, could be detected amongst 1000 equivalent non-targetX. vuittenezi. Also, extracted DNA from an equivalent single target specimen was detected when added to DNA extracted from the overall soil nematode community. The primers were assessed further by using serial mixtures of actual nematodes rather than extracted DNA to simulate field soil. Using this method, a single target nematode could be detected amongst 200 non-target specimens. Given their specificity, sensitivity and reliability, it appears that these diagnostic primers will be of great benefit to phytosanitary/quarantine services related to the viticulture industry.  相似文献   

水牛附睾尾精子的体外受精     

谢英  单天锡  李跃民  张家骅 《中国兽医学报》2004,24(2):190-192

采用肝素诱导获能 ,比较了 TAL P液和 BO液处理水牛附睾尾精子进行体外受精和细管冷冻精液体外受精的效果。结果表明 ,用 BO液和 TAL P液分别处理水牛附睾尾精子 ,受精后的卵裂率分别为 4 6 .6 7%和 5 3.73% ,发育率分别为 2 1.6 7%和 2 6 .87% ,其受精效果差异不显著。综合 2种方法 ,水牛附睾尾精子的受精率为 5 7.14 % ,受精后的卵裂率为 5 0 .39% ;发育率相对于培养卵为 2 4 .4 1% ,相对于卵裂卵为 4 8.4 4 % ;与细管冷冻精液 (5 6 .0 0 % ,5 4 .31% ,2 6 .72 % ,4 9.2 1% )相比 ,差异不显著。形态学观察还表明 ,用保温干储的方法可获得活率好、存活时间长的附睾尾精子。试验结果说明水牛附睾尾精子用于体外受精可以得到与细管冷冻精液相当的效果。  相似文献   

家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化   总被引：4，自引：0，他引：4  

施振旦  邵西兵  方梅霞  于迎春  刘颖  陈楠 《中国兽医学报》2004,24(3):258-260

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右  相似文献   

A mutation confers Monochoria vaginalis resistance to sulfonylureas that target acetolactate synthase     

Guang-Xi Wang  Ying Lin  Misako Ito 《Pesticide biochemistry and physiology》2004,80(1):43-46

Acetolactate synthase (ALS) is the target enzyme for four distinct families of compounds: sulfonylureas (SUs), imidazolinones, triazolopyrimidine sulfonanilides, and pyrimidinyl oxybenzoates. We cloned and sequenced the fragments encoding ALS genes from biotypes of Monochoria vaginalis susceptible (S) and resistant (R) to SU-herbicides. The nucleotide sequences of the 39 bp Domain A region for R M. vaginalis biotype differed from that of the S biotype by a single nucleotide substitution at variable Pro codon of Domain A (CCT to TCT), predicting a Pro in the S but a Ser in the R biotype. No nucleotide differences between S and R M. vaginalis were observed in Domain D. We suggest that the amino acid substitution at Domain A region is responsible for resistance to SU-herbicides in M. vaginalis collected from Ushiku City, Ibaraki Prefecture, Japan.  相似文献   

利用土壤筛选紫花苜蓿高效共生根瘤菌的初步研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

刘杰  王赟文  李颖  汤辉  汪玲玲 《草业科学》2005,22(2):21-25

采用西北地区土壤试管栽培法对12株不同地区来源的根瘤茵和2个紫花苜蓿Medicago sativa品种(品系)进行接种效果的研究，旨在使筛选结果尽量接近实际生产环境，筛选出符合实际效果的高效共生菌株。结果表明，紫花苜蓿与根瘤菌之间表现出共生效果的多样性。绝大多数接种根瘤菌的紫花苜蓿在总瘤数、有效瘤数、地上部干质量方面与不接种的对照相比分别增加了7％～240％，10％～367％，7％～150％。根瘤菌与紫花苜蓿品种之间存在着互作关系，且受土壤因子尤其是土壤养分状况的影响。初步筛选出的与2个紫花苜蓿品种(品系)最佳共生匹配的根瘤菌菌株分别是：中苜一号的73317，01006，01055；金皇后的83092，01006，01055。  相似文献   

浅论优质牧草在肉牛饲养中的利用   总被引：4，自引：3，他引：4  

曾兵  张新全  张新跃  兰英 《草业科学》2005,22(8):50-54

针对我国肉牛饲养在饲料利用中的误区,结合肉牛的消化及代谢特点,分析了牧草的鲜喂、青贮、干草饲喂以及综合利用4种不同的利用方式及其营养特点,指出优质牧草用于肉牛饲养能充分发挥牧草的优良特性,而且符合我国畜牧业发展要求,值得广泛推广.  相似文献   

松嫩平原优势种羊草与其主要伴生种芦苇空间分布格局分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

巴雷  王德利  高莹 《草业学报》2005,14(5):111-116

芦苇是松嫩草地优势种羊草的主要伴生种,两者常常形成物种组成比较单一的混生群落或者与其他物种组成羊草 杂类草群落.选择羊草 芦苇混生群落,羊草群落和芦苇群落的交错区进行羊草、芦苇单物种格局分析.结果表明,1)混生群落和交错区中,羊草和芦苇均是以集聚分布的形式存在;2)羊草在混生群落中的格局强度小于交错区中的格局强度,芦苇在2种类型群落中的格局强度没有显著差异;3)除了考虑物种的生物学特性以外,混生群落种内、种间竞争也是影响羊草集聚分布和格局强度的主要因素,交错区中,环境异质性和种间竞争是影响集聚分布和格局强度的重要因子;4)芦苇在混生群落和交错区中格局强度没有明显差异,由此可以判定芦苇的空间分布格局形成主要受植物本身生物学特性的影响.  相似文献   

2种组胺受体拮抗剂对低温诱发的肉鸡肺动脉高压的影响   总被引：1，自引：3，他引：1  

刘文菊  乔健  欧德渊  范春艳  杨鹰  李静  高铭宇 《畜牧兽医学报》2005,36(4):407-411

为探讨组胺H1受体拮抗剂扑尔敏和H2受体拮抗剂西咪替丁对低温诱发的肉鸡肺动脉高压的影响,并由此推测组胺在低温诱发的肉鸡肺动脉高压形成过程中的作用。140只17日龄AA肉鸡随机分为4组。(1)常温组:40只在常温条件下饲养(22～23℃),每日注射生理盐水2次;(2)低温组:40只在低温环境中饲养(9～11℃),每日注射生理盐水2次;(3)扑尔敏组:40只在低温环境中饲养(9～11℃),每日注射扑尔敏2次;(4)西咪替丁组:20只在低温环境中饲养(9～11℃),于24日龄至38日龄期间每日注射西咪替丁2次。分别于低温处理后1周(24日龄)、2周(31日龄)、3周(38日龄)、4周(45日龄)从常温组,低温组,扑尔敏组中各随机抽取10只,西咪替丁组在低温处理后2周(31日龄)、3周(38日龄)各随机抽取10只,称取体重,然后利用右心导管法测定肺动脉压(PAP),并测定红细胞压积(PCV),腹水心脏指数(AHI)。结果发现:(1)24日龄、31日龄、38日龄时,低温组肺动脉收缩压,舒张压显著高于(P<0105)或极显著高于(P<0101)同日龄常温组。24日龄时扑尔敏组肺动脉收缩压显著低于(P<0105)同日龄低温组。38日龄时西咪替丁组肺动脉收缩压,舒张压极显著低于(P<0101)同日龄低温组。(2)24日龄、31日龄、38日龄、45日龄时,低温组PCV极显著高于(P<0101)同日龄常温组。24日龄时扑尔敏组  相似文献   

BQ123对低温诱发的肉鸡肺血管重塑的影响   总被引：5，自引：1，他引：5  

范春艳  乔健  赵立红  刘文菊  欧德渊  杨鹰  高铭宇 《畜牧兽医学报》2005,36(6):606-611

动态观察了肺小动脉中膜平滑肌的增殖及管腔面积的改变,探讨内皮素受体拮抗剂BQ123 对低温诱发的肉鸡肺血管重塑的影响。200只16日龄AA肉鸡随机均分为4组: 常温(20 ℃)对照组、低温(7~9 ℃)组、低温低剂量BQ123组和低温高剂量BQ123组。23日龄、30日龄时测定肺动脉压,并取肺组织做石蜡切片, 以Weigert间苯二酚复红染色,形态学计算机图象分析法测定肺细小动脉外径和内径、管总面积和管腔面积,计算中膜厚度占外径百分值(%)mMTPA及管壁面积/管总面积WA/TA(%)。结果显示:(1)BQ123 抑制低温肉鸡平均肺动脉压的升高,23日龄时低温高剂量BQ123组显著低于低温组(P<0 05),30 日龄时低温低剂量BQ123 组和低温高剂量BQ123组均极显著低于低温组(P<0 01);(2)BQ123 抑制低温肉鸡肺小动脉WA/TA(%)的升高,30~50μm的肺小动脉,低温组极显著高于低温低剂量BQ123 组及低温高剂量BQ123 组(P<0 01),其它分级的肺小动脉组间差异性与此类似;(3) BQ123抑制低温肉鸡肺小动脉的mMTPA的升高,30~50μm的肺小动脉,23日龄时低温组极显著高于低温低剂量BQ123 组和低温高剂量BQ123 组(P< 0 01), 30 日龄时低温组显著高于低温低剂量BQ123组(P<0 05)、极显著高于低温高剂量BQ123组(P<0 01),30μm以下的肺小动脉组间差异性与此类似,50~120μm  相似文献   

苓桂术甘汤对肉鸡腹水综合征的防治作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

王文魁  齐永华  程佳  李雪莲  周利青  郭娜  张映  刘晋平  宋金香  白建 《畜牧兽医学报》2005,36(11):1215-1222

将15日龄艾维茵肉鸡分成5组,一组在常温(21±1)℃下饲养,作为正常对照组(N);其余4组在低温(11±1)℃下饲养以诱发腹水综合征,其中模型对照组(C)不给任何药物,维生素组(V)饮水中添加VC(0.5 g/L)和VE(0.1 g/L),2个试验组(T1和T2)分别给予不同剂量(0.4和0.8 mL/kg bw)的苓桂术甘汤。结果显示,C组的腹水发病率、腹水心脏指数(AHI)、红细胞压积(PCV)、红细胞数、血红蛋白(Hb)及丙二醛(MDA)含量、血清α-羟丁酸脱氢酶(-αHBDH)、谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)均显著高于N组;而3种抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]的活性则显著降低;2个试验组及V组的上述检测指数都得到明显改善,表明苓桂术甘汤能增强肉鸡的抗氧化能力,具有防治肉鸡腹水综合征的作用。  相似文献