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利用PCR技术从猪细小病毒的DNA模板中扩增了NS1的基因片段,将PCR产物克隆至pET32c载体,将构建好的重组质粒pET32c-NS1,转入表达宿主茵BL21中,利用低温诱导表达的方法,避免了包涵体的形成.West-ern-blot结果显示,表达产物有良好的生物活性.纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被质量浓度为2.5 mg/L、血清最佳稀释度为1∶200.表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂用于检测PPV,且能很好的区别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪. 相似文献
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应用生物反应器和微载体培养Vero细胞生产猪流行性腹泻病毒的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对应用生物反应器系统和微载体培养Vero细胞生产PEDV进行了实验研究,通过分析和比较批培养及换液培养过程中细胞生长、代谢和病毒增殖的相互关系,发现PEDV随着细胞的生长而不断在胞内增殖和积累,72h后Vero细胞需经过一个短暂的停止生长阶段,再继续呈指数生长。反应器换液培养的单位培养基细胞产量比批培养提高了28%,比方瓶培养提高了138%,疫苗生产效率显著提高。当接种密度为1 23×105cells/ml时,换液培养至96h时获得了1 74×106cells/ml的高细胞密度,细胞扩增了14 3倍,且单位细胞的病毒产量并不低于静态培养。 相似文献
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自 1 98 0年以来 ,已有许多从科学和经济方面研究家禽氨基酸需要量的报道。由于氨基酸需要量受许多因素的影响 ,故这些报道的结果存在着许多差异。Ｉｓｈｉｂａｓｈｉ(1 990 )将这些因素归为四类 :环境因素、遗传背景、动物健康状况和日粮因素。环境温度可直接影响到动物的采食量 ,即使环境条件相同 ,氨基酸的需要量也依不同品系而不同 ,而且受疾病、应激、肠道微生物区系、激素、换羽及年龄的影响。日粮中也包含多种影响氨基酸需要量的因素 ,如日粮代谢能 ,可利用氨基酸 ,氨基酸之间的拮抗和不平衡 ,氨基酸的不足和过剩 ,饲料的适口性以及… 相似文献
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细菌耐药性(Antimicrobial resistance)是21世纪全球性的难题和关注的热点。抗菌药物长期、广泛和不合理使用以及抗菌药物的选择压力等原因使耐药菌株不断增多、耐药 相似文献