伪狂犬病病毒基因缺失及活载体疫苗研究进展   总被引：6，自引：0，他引：6  

周国辉  仇华吉  田志军  童光志 《动物医学进展》2005,26(3):19-22

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。该病每年给养猪业造成的损失达数十亿美元,目前对该病主要是以疫苗防制为主。随着基因工程技术的不断更新和发展,研制更加安全、有效的基因工程疫苗对该病的防治将会有重要的意义。文章对伪狂犬病基因缺失疫苗及活载体疫苗的研究进行了综述。  相似文献   

非洲猪瘟流行病学及诊断技术研究进展     

宋浩  张丽  张交儿  仇华吉  罗玉子 《中国兽医学报》2022,(5):1066-1076

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的猪的一种烈性、出血性、高度接触性传染病,致死率高达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物传染病。目前尚无商品化疫苗和有效的治疗方法。2018年8月,ASF首次传入我国,随后迅速大范围蔓延,造成我国生猪存栏量急剧下降,猪肉价格大幅度上涨,给我国养猪业和食品经济造成了严重冲击。虽然目前生猪产能有较大恢复,但是ASF防控压力有增无减。2020年以来,各地陆续出现了ASFV变异株(基因Ⅱ型)和基因Ⅰ型弱毒株,与初期流行的毒株(基因Ⅱ型)相比,变异株潜伏期延长、感染猪临床症状不明显、死亡率降低,难以早期发现,给猪场ASF防控带来了新的挑战。因此,快速可靠的诊断技术和病原流行病学研究对ASF防控至关重要。本文对ASFV病原学、流行病学和实验室诊断技术进行了分析和梳理,以期为ASF流行趋势、诊断及防控提供技术参考。  相似文献   

稳定表达T7RNA聚合酶PK-15细胞系的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄俊华  贺番  孙元  张鑫  常天明  李宏宇  仇华吉 《中国预防兽医学报》2011,33(5)

为构建稳定表达T7 RNA聚合酶(RNAP)的猪肾细胞系(PK-15),本研究采用PCR方法,以E.coli BL21(DE3)细菌基因组为模板扩增T7 RNAP基因,将其克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-T7.采用脂质体将pLXSN-T7转染至PT67细胞中,经G418筛选培养获得重组逆转录病毒rMLV-T7,将其接种于PK-15细胞进行G418加压筛选和纯化;应用PCR、间接免疫荧光试验及T7启动子控制下的红色荧光蛋白的重组表达质粒(pET-RED)进行瞬时表达,检测T7 RNAP的表达及活性,结果表明筛选所得的细胞系PK/T7的不同代次均具有转录活性.本研究建立稳定表达T7 RNAP的细胞系PK/T7,为实现细胞内T7启动的转录和猪源RNA病毒等的反向遗传操作提供了有效的方法.  相似文献   

猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立     

赵建军 成丹李娜  孙元史子学  涂长春童光志 仇华吉 《中国兽医科技》2007,37(5):406-412

根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针，建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示，该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来，而不与其他猪源病毒发生非特异反应，分别可检测到初始模板中41．8和81．5个拷贝的病毒RNA，与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近，两种方法对152份样品检测的符合率达96．9％～100％。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测，证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性，可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。  相似文献   

同时检测猪瘟病毒和北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的复合荧光定量RT-PCR方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

成丹  赵建军  李娜  孙元  周艳君  朱妍  田志军  涂长春  童光志  仇华吉 《畜牧兽医学报》2009,40(1)

应用猪瘟病毒（CSFV）及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）特异性引物和TaqMan水解探针,建立一种同时检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT—PCR方法。该方法可检测到3．2TCID50的CSFV和1．8TCID50的北美洲型PRRSV,比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT—PCR方法对155份现地样品进行检测,结果73份为PRRSV阳性,16份为CSFV阳性,13份为CSFV和PRRSV混合感染,与常规RT—PCR的符合率高达99．4％。该复合荧光定量RT—PCR方法敏感、特异、重复性好。  相似文献   

等温扩增技术的原理及其在病原检测中的应用     

高瑶  孟星宇  罗玉子  胡永浩  仇华吉 《动物医学进展》2017,38(8)

等温扩增技术(IAT)作为一种新型的体外核酸扩增技术,与PCR相比,该技术具有特异性强、敏感性高、简单便捷和成本低等优点。目前,等温扩增技术在病原检测方面得以应用,论文对环介导等温扩增(LAMP)、依赖解旋酶的等温扩增(HDA)、依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)、链置换等温扩增(SDA)、交叉引物扩增(CPA)5种扩增技术的原理、特点及应用分别予以介绍,为该技术在病原检测的实际应用提供参考。  相似文献   

应用重组N蛋白—ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

王云峰  周艳君  仇华吉  钱平  蔡雪晖  柴文君  童光志 《中国兽医杂志》2001,37(3):3-5

利用昆虫杆状病毒表达系统表达的猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白作为抗原，包被聚苯乙烯微量反应板，建立了猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白-ELISA诊断方法。试验证明，该方法对其他8种猪疫病阳性血清均无交叉反应，对标准阳性样品的检出率为100%。具有敏感性高、特异性强的特点。  相似文献   

猪瘟病毒野毒株RT-LAMP可视化检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

张兴娟  孙元  刘大飞  仇华吉 《中国预防兽医学报》2009,31(11)

本研究旨在建立一种可视化检测猪瘟病毒(CSFV)野毒株的反转录.环介导等温扩增方法(RT-LAMP).根据CSFV的NS5B基因序列设计一套RT-LAMP引物,以样品的cDNA为模板,利用Bsf DNA聚合酶,在62℃恒温条件下进行扩增,扩增产物中加入sYBR Green I染料直接或在紫外光下观察判定扩增结果.该方法可检测出不同基因型的CSFV厂野毒株,其检出极限为2.5 TCID_(50)的CSFV,与实时荧光定量RT.PCR方法的敏感性相当;特异性试验表明,该方法对猪瘟免化弱毒疫苗株(HCLV)、牛病毒性腹泻病毒以及其它常见猪源病毒均无扩增反应;通过对126份不同样品进行检测比较,该方法与实时荧光定量RT-LAMP检测方法的符合率达100%.与引物.探针能量转移PCR方法的符合率为98.4%.该方法无需特殊仪器,是一种适用于基层的快速、简便的CSFV野毒鉴别检测方法.  相似文献   

伪狂犬病病毒变异株的致病性、分子特征及基因缺失疫苗的研制     

仇华吉 《兽医导刊》2016,(21)

正仇华吉研究员首先介绍了伪狂犬病的基本情况和危害,他介绍说伪狂犬病是一种严重危害养猪业的一种烈性传染病,感染宿主广泛,除了人和马都可感染此病,不同日龄的猪均可感染,可造成严重的经济损失。当前对于伪狂犬病新疫情主要使用的是Bartha-K61弱毒活疫苗,但很多免疫过此疫苗的猪场暴发了伪狂犬病疫情,造成母猪流产,产死胎,新生仔猪神经症状和高死亡率。根据仇研究员所在团队和国内  相似文献   

猪“神秘病”及其诊断     

仇华吉 《上海畜牧兽医通讯》1992,(4)

猪神秘病(mystery swine diseaea,MSD)是最近发现的一种猪病,病原是Lelystad病毒(LV)。此病先后在美国、加拿大、德国、法国、荷兰、英国、希腊和澳大利亚暴发流行,某些发展中国家也有关于本病的报道。其特征是感染猪食欲不振、厌食、发热、繁殖障碍(流产、早产、产弱仔、产死胎、胚胎死亡、胚胎木乃伊  相似文献