3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及应用     

姜珊珊  冯佳  吴斌  张眉  王升吉  辛志梅  任建雯  陈琳琳  辛相启 《植物病理学报》2018,48(6):847-851

正病毒病是引起甘薯品质降低和减产的重要原因之一,现已报道30多种能侵染甘薯的病毒~([1,2])。山东省是甘薯种植大省,病毒种类近10种~([3,4])。甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFM V)、甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)是为害甘薯的主要病毒,在全国甘薯种植区广泛分布~([5,6])。甘薯病毒2(Sweet potato virus 2,SPV2)为Potyvirus的一个暂定种,多与同属的其他病毒混合侵染~([7])。多重PCR技术由Chamberian等~([8])1988年首次提出,可实现多基因的同时扩增,具有节省时间、提高效率的优点,已初  相似文献   

鳗弧菌单克隆抗体-胶体金检测方法的建立     

吴斌  樊海平  王雪妹  黄小红  张新艳  叶小军  林志铿 《福建农业学报》2016,(11):1145-1150

以灭活鳗弧菌(SMW5)全菌为抗原,应用杂交瘤技术,制备了鳗弧菌单克隆抗体3株,分别命名为1H9、1C12、6F8,细胞亚类分别为IgG2a、IgM、IgG2b,其中1H9腹水效价为1∶6.4×105。制备鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体,效价为1∶3.2×105。应用纳米胶体金颗粒标记单克隆抗体1H9并制备金标垫,抗鳗弧菌(SMW5)兔多克隆抗体与羊抗鼠抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜,分别作为检测线T和质控线C,建立鳗弧菌的胶体金免疫层析快速检测方法。经过对试纸条的特异性和灵敏度测定,结果表明:试纸条与嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌、创伤弧菌、副溶血弧菌、副溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌,7种水产常见病原菌没有交叉反应,与鳗弧菌特异性反应,检测灵敏度为6.3×104cfu·mL~(-1),检测所需时间低于10min。所制备的鳗弧菌胶体金免疫层析检测试纸条具有快速、简便、特异性高和适应基层生产推广应用等优点。  相似文献   

新疆葡萄贮运保鲜现状与产业技术提升途径   总被引：5，自引：0，他引：5  

吴斌  闫师杰  王文生 《保鲜与加工》2016,16(4):1-5

新疆葡萄种植面积和产量均居全国第一,也是我国葡萄保鲜产品最大生产销售区,但是新疆葡萄贮运保鲜现状不容乐观,产业系统保鲜技术也亟待提升。本文通过分析新疆主栽品种葡萄的采收期及主要贮运特征,指出新疆葡萄贮藏及运输保鲜技术存在的问题,并探讨了新疆鲜食葡萄贮运保鲜产业技术提升途径,为我国新疆葡萄贮运保鲜产业的健康发展提供理论基础。  相似文献   

24种连蕊茶在夏季极端高温干旱条件下的耐旱潜力评价   总被引：1，自引：0，他引：1  

王江英  吴斌  刘伟鑫  范正琪  李纪元 《热带作物学报》2015,36(3):563-569

2013年6~9月,华东地区发生的极端高温干旱给园林植物的生长造成了严重影响。通过田间旱害调查及相关生理指标测定,采用叶片耐旱指数和生理指标的平均隶属函数值聚类分析方法,对浙江省金华市国际山茶物种园连蕊茶组(Sect.Theopsis)的24个种进行了耐旱潜力综合评价。结果表明:24种连蕊茶的耐旱潜力可分为强、较强、中等及弱4类,其中第一类耐旱潜力强,包括小卵叶连蕊茶、七瓣连蕊茶、长尖连蕊茶、贵州连蕊茶、大萼连蕊茶;第二类耐旱潜力较强,包括细萼连蕊茶、微花连蕊茶、黄杨叶连蕊茶、尖连蕊茶、岳麓连蕊茶、小长尾连蕊茶、钟萼连蕊茶、蒙自连蕊茶、川鄂连蕊茶、长管连蕊茶、大花尖连蕊茶;第三类耐旱潜力中等,包括荔波连蕊茶、披针萼连蕊茶、细叶连蕊茶、肖长尖连蕊茶、柃叶连蕊茶、细尖连蕊茶;第四类为耐旱潜力弱,包括毛花连蕊茶、川滇连蕊茶。  相似文献   

日本鳅中高密度生态养殖试验     

刘小平  付辉云  刘中恵  王海华  蔡欣  吴斌  华崇新 《江西水产科技》2015,(2):28-29

采取综合生态养殖技术,实现日本鳅生态养殖的中高密度生产。中密度与高密度生态养殖平均养成规格分别为50 g和35~45g。日本鳅养成的个体规格中密度生态养殖优于高密度养殖,但池塘亩产量高密度养殖优于中密度生态养殖,中密度与高密度生态养殖单产分别为700kg/亩和1200~1500 kg/亩。  相似文献   

27株嗜水气单胞菌致病性及ERIC—PCR指纹图谱分析     

吴斌  樊海平  邓志武  林煜  钟全福  曾占壮  肖丹 《福建水产》2014,(1):14-20

从福建省淡水养殖鱼类体内分离到27株嗜水气单胞菌,根据嗜水气单胞菌16SrDNA基因和气溶素基因（aerolysin）的保守序列,设计2对引物,对所分离到的27株嗜水气单胞菌进行双重PCR扩增,扩增结果表明,其中18株为含有Aer毒力基因的潜在致病性嗜水气单胞菌,占总菌数的66．67％。应用ERIC-PCR分型技术对27株嗜水气单胞菌菌株进行分析,以相似度54．00％为限,所有菌株可分为Ⅰ和Ⅱ两大聚类,以76．00％相似度为界,27株嗜水气单胞菌可分为11个聚类,同一个聚类中菌株分离区域基本相同。分析结果表明,分离的嗜水气单胞菌基因型的多样性和分离地域具有一定的关联,也表明ERIC-PCR可以有效应用于嗜水气单胞茵分子流行病学调查。  相似文献   

裸燕麦萌发期耐盐性综合评价与耐盐种质筛选   总被引：9，自引：1，他引：8  

陈新  张宗文  吴斌 《中国农业科学》2014,47(10):2038-2046

【目的】对来自不同生态区的278份裸燕麦种质在萌发期的耐盐性进行综合评价,以期为裸燕麦萌发期耐盐性的鉴定和评价提供方法指导,同时为裸燕麦耐盐育种的亲本选择提供丰富的耐盐材料。【方法】以1.2%NaCl水溶液进行盐胁迫,以蒸馏水培养为对照,利用培养皿纸上发芽法在人工气候培养箱中进行裸燕麦种质萌发期的耐盐性鉴定,培养条件为25℃恒温、相对湿度（70±5）%、每天12 h光照（6:00-18:00）、光照强度150 μmol?m-2?s-1。以胚根至少与种子等长、苗高不短于种子长的1/2为发芽标准,培养96 h时统计各供试种质的发芽势,培养168 h时统计各供试种质的最终发芽率并测量幼苗的最长初生根长和苗高,以发芽势、发芽率、根长、苗高4个性状来鉴定供试种质对盐胁迫的反应。以基于4个鉴定指标的耐盐系数为评价依据,根据各指标耐盐系数的隶属函数值的变异系数来分配各指标的权重,利用加权隶属函数法对供试278份裸燕麦种质进行综合评价,结合聚类分析对供试种质进行耐盐性级别划分。【结果】与正常条件相比,在1.2% NaCl胁迫下,除了SHX88和NM47以外,其他所有材料的发芽势和发芽率都降低;所有材料的根长和苗高都受到抑制。不同材料在4个鉴定指标上都表现出差异。根据加权隶属函数值和聚类分析,可将供试278份裸燕麦种质分为耐盐性不同的5个级别：17份材料高度耐盐（1级）、114份材料耐盐（2级）、106份材料中等耐盐（3级）、25份材料对盐胁迫敏感（4级）、16份材料对盐胁迫高度敏感（5级）。在4项鉴定指标中,发芽势和发芽率与萌发期耐盐性的关系最为密切,但发芽率在材料间的表现比发芽势更为稳定。【结论】发芽率可作为裸燕麦萌发期耐盐性快速鉴定或种质资源初步筛选的鉴定指标。加权隶属函数法对于裸燕麦种质耐盐性综合评价具有较好的应用价值。SHX75等17份高耐盐性裸燕麦材料可进一步用于耐盐机理研究、耐盐育种以及盐碱地栽培。  相似文献   

白细胞介素13基因+1923C/T多态性与哮喘的相关性及对血浆总IgE水平的影响     

刘军麟  吴斌  陈华军  何承伟  谢佳星  李祚涛 《湛江医学院学报》2004,22(3):211-214

目的 :探讨白细胞介素 1 3(IL- 1 3)基因内含子区 +1 92 3C/ T多态性与哮喘的相关性及对血浆总 Ig E水平的影响。方法 :用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性 (PCR/ RFL P)方法检测哮喘与对照组 +1 92 3位点多态性 ,用酶联免疫吸附法 (EL ISA)测定血浆总 Ig E水平。结果 :+1 92 3位点等位基因 C、T频率在两组间分布的差异有显著性 (χ2 =9.30 ,P<0 .0 1 ) ,等位基因 T与哮喘关联 ,OR(T/ C) =1 .87,95 % CI=1 .2 5～ 2 .80 ,P<0 .0 1。两组基因型 (TT、CT、CC)频率的分布差异亦有显著意义 (χ2 =9.92 ,P<0 .0 1 ) ,同组内 ,T等位基因携带者血浆总 Ig E水平高于非携带者 ;同一基因型 ,哮喘组总 Ig E水平高于对照组。结论 :IL- 1 3基因 +1 92 3位点多态性是影响哮喘的重要候选基因 ,T等位基因与哮喘关联 ,并可能通过增强 IL- 1 3基因的表达影响血浆总 Ig E水平  相似文献   

雉鸡群支原体病并发大肠杆菌病的诊治     

郝景锋  吴斌  宋泰 《中国兽医杂志》2009,45(11)

1 发病情况 2007年11月,吉林市经济开发区某特禽场饲养的45日龄美国七彩山鸡340只出现病情,患病雉鸡表现为精神委顿,羽毛杂乱,食欲减退,排出白色的稀粪,呼吸困难,喜伏卧.每日死亡10多只,病情持续1周多,从发病开始认为是大肠杆菌病,期间用过恩诺沙星饮水,但仍有鸡死亡,此后经过确诊为雉鸡支原体与大肠杆菌混合感染,通过对症联合用药,雉鸡病情逐渐得到了控制.  相似文献   

猪瘟快速诊断金标试纸条的研制及应用     

姜成  李沐森  付连军  吴斌  叶永铭 《当代畜牧》2009,(5)

运用胶体金免疫层析技术,建立一种操作简单、特异性好、灵敏度高、适合临床诊断的检测猪瘟病毒的方法。通过采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,结果显示,用试纸条检测猪瘟病毒,15min左右即可显示结果,并与荧光抗体检测方法加以比较,结果表明用此种方法可以检测猪瘟病。  相似文献