猪细小病毒SYBR Green Ⅰ模式实时定量PCR检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

叶盛权  肖性龙  吴晖  郭祀远  余以刚  吴斌  贾赟 《中国动物检疫》2009,26(6):30-32

根据GenBank猪细小病毒(PPV)的NS1基因序列,设计一对特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ随机结合渗入法,建立实时定量PCR检测方法,构建了检测PPV的标准DNA模版,循环阈值(Ct)与标准质粒DNA模板在7.8×101～7.8×108拷贝/μl浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.997。该方法用于猪细小病毒的检测具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍,可以用于猪细小病毒的快速检测。  相似文献   

浅谈2009年“高热病”     

喻正军  何启盖  吴斌 《北方牧业》2009,(20)

秋风起,高热知多少?从今年6月份开始,编者了解到哈尔滨那边有高热症状的病比较多,在个别区域损失也比较大。然后是7、8月的海南、四川个别的县市,闹的一些猪场都被洗白了。9月前后,苏南的高热已经开始用省作为单位划分。10月安徽的高热在零星持续后,近半个月在南部暴发。河南的专家报平安的话音刚落,目前也开始"热"起来,山东亦不能置身事外。这些消息,是确实的,只是表述无法很准确。也许疾病还没有蔓延到北方,但是一些恐慌性抛售的行为在部分地区出现。作为猪版编辑,这些日子,也接到过数个求助电话。电话的那头,十分的焦虑,每次的意思都差不多,‘能想的办法都想了,可还是没有办法不死猪’。编者能何为,也只能尽可能的多告诉他们几个学院兽医、市场兽医、基层兽医的电话,希望可以帮帮他们。但是,其实是我们养猪人在某些环节没有做好,种下的因,造成了猪这种结果。这期的稿件,就是这种思路的纸面化。面对一个曾被号称"无名"的病,有实验室的教授的数据分析、有公司技术总监的总结、有一线兽医的真切实感。这个病很庞杂,同时因为受编者水平所限,文章亦有内容重叠和有待商榷的地方,敬请读者海涵,但是,作为在一线奔走的专家、技术人员他们的意见值得广大读者重视,并可因地制宜的检验和发挥。编者认为,只有读者参与一本刊物才可能办好,所以希望读者能就养猪生产一线的问题积极交流,踊跃投稿。编者小魏,手机13931178959邮箱weiyueming2222@163.com。先谢谢大家啦!  相似文献   

杏-丹参林药复合系统中丹参光合和蒸腾特性的研究   总被引：23，自引：3，他引：20  

高峻  孟平  吴斌  张劲松  褚建民 《北京林业大学学报》2006,28(2):64-67

该文以杏-丹参林药复合系统中药用植物丹参为研究对象,利用Li-COR 6400便携式光合作用仪测定其光合和蒸腾作用,其目的是探讨林药复合系统中药材的生理生态特征,为发展果药复合模式提供一定的理论依据.结果表明:①杏-丹参复合系统中,杏树行中间测点的光照强度日变化规律与对照一致,都是单峰曲线,但是峰值低于对照.树行的东西冠下测点的日变化规律是对称的,前者上午出现峰值,后者下午出现峰值.树行中间、东林冠下和西林冠下日平均光照强度比对照分别减小25.6%、68.5%、62.6%;统计分析表明各测点光照强度达显著差异.②利用SPSS统计软件分析了光响应曲线和CO2响应曲线,得到丹参叶片的光饱和点约为236.4 μmol/（m2·s）,光补偿点约为15.88 μmol/（m2·s）,表观光量子效率为0.056　1　mol/mol.丹参叶片CO2补偿点为30 μmol/mol, CO2饱和点为800 μmol/mol,叶片的羧化效率为0.075　2,说明丹参为C3植物.③杏-丹参林药复合系统中丹参的光合速率和蒸腾速率均降低,且各测定点间差异显著,日变化曲线规律也发生变化.   相似文献   

岷江干旱河谷主要灌木种群生态位研究   总被引：14，自引：0，他引：14  

冶民生  关文彬  吴斌  马克明  刘国华  汪西林 《北京林业大学学报》2006,28(1):7-13

利用Levins生态位宽度指数和Schoener生态位重叠指数分析了岷江干旱河谷20种主要灌木种群在土壤水分、全N、速效P、速效K和pH 5个资源维上的生态位宽度和生态位重叠特征.结果表明:小花滇紫草、三花莸、白刺花、多花胡枝子、马鞍羊蹄甲具有较大生态位宽度,对环境有较强的适应能力,在维持岷江干旱河谷群落的物种多样性和相对稳定性中发挥重要作用;种群在各个资源维上的宽度值不同,说明对不同的资源利用能力不尽相同,在不同资源空间中的生态适应性亦不同.各个资源维上所有种群生态位宽度和的大小依次为pH全N土壤水分速效K速效P.由此看出,物种对速效P和速效K的利用能力低于对土壤水分的利用;同属种群间的重叠值较低.具有较高生态位宽度的物种一般具有较高的生态位重叠,但并非生态位宽度小的物种其重叠值也就小.灌木种群生态位的研究可用于指导岷江干旱河谷植被的保护和恢复.   相似文献   

苦荞中查尔酮合成酶基因（CHS）的克隆   总被引：1，自引：1，他引：0  

高帆张宗文  李艳琴吴斌 宋韡 《中国农学通报》2011,27(21):207-214

获得完整的苦荞查尔酮合成酶基因（CHS）信息并评价其进化地位,对分子辅助选育高黄酮含量的苦荞品种具有重要的指导意义。用RACE法克隆苦荞CHS基因,用生物信息学手段分析预测苦荞CHS基本理化性质和同源性,用临接法构建了该酶的系统发生树。获得1250 bp的CHS cDNA全长,含241 bp的3’UTR和185 bp的5’UTR;等电点（pI）和分子量（Mr）分别为5.33和35340.75 Da;克隆获得975 bp的开放性阅读框（ORF）。预测该基因编码含325个氨基酸残基的蛋白,氨基酸同源比对结果表明,苦荞CHS与蓼科的虎杖相似性很高;临接法构建的系统发生树结果表明,苦荞CHS与其他双子叶植物有共同的起源,与蓼科的金荞麦、甜荞、虎杖及石竹科的满天星亲缘关系较近。成功获得苦荞CHS基因的cDNA全长,克隆出完整的ORF,并确定了苦荞中该酶的进化地位和方向。  相似文献   

宁夏盐池县官滩村2006年生态足迹分析     

闫艳平  陈国栋  吴斌  张宇清  王炜彤 《防护林科技》2009,(1):27-29

为定量描述北方沙区生态承载状况,运用生态足迹模型计算了处于毛乌素沙地南缘的盐池县官滩村2006年的生态足迹与生态承载力。结果表明：官滩村人均生态足迹为2．0119hm^2,人均生态承载力为1．6568hm^2,人均生态赤字为0．3551hm^2。其中,草地的供需矛盾突出,耕地的供需基本相当,林地和建筑用地供给充足。其中供给以耕地为主,需求以草地为主,供需结构不对称。生态赤字的存在,揭示了当前生态经济系统的不安全与不可持续性。  相似文献   

公共风险危机下的动物疫病应急反应体系建设   总被引：1，自引：0，他引：1  

陶建平  吴斌  杨园园  阎振宇 《湖北农业科学》2009,48(2)

动物产品安全是当今全世界高度关注的热点问题.在论证我国加强动物疫病应急体系建设的重要性基础上,深入剖析我国动物疫情防控存在的突出问题:借鉴发达国家的经验,提出我国公共危机下动物疫病应急反应体系建设的思路与措施:设置专门机构,科学制定应急方案,积极应对动物疫病公共风险;加强疫病监控,科学安排扑灭计划;建立一只精干、高效的动物疫病应急体系专业队伍:完善赔偿制度,保障动物疫情应急处理;加强动物出入境检疫和风险评估,有效防范境外疫情.  相似文献   

苦荞种质资源AFLP标记遗传多样性分析   总被引：7，自引：2，他引：5  

侯雅君  张宗文  吴斌  李艳琴 《中国农业科学》2009,42(12):4166-4174

 【目的】从分子水平研究苦荞种质资源的遗传多样性,为综合评价苦荞种质资源提供依据。【方法】用筛选出的20对AFLP引物,对14个不同地理来源的165份苦荞种质进行遗传多样性分析。【结果】共扩增出938条清晰的条带,其中314（33.48%）条呈多态性,平均每对引物组合的条带数和多态性带数分别为46.9个和15.7个。不同地理来源苦荞种质的Shannon-Weaver多样性指数为0.1093～0.2661,四川资源群最高,青海、云南和甘肃/宁夏等资源群次之,湖南资源群最低。利用Popgen Ver.1.32软件,依不同地理来源苦荞资源群间Nei′s遗传一致度可聚类成5个组,聚类结果与苦荞地理分布相关。基于Structure 2.2软件分析,165份苦荞资源分为5大组群,并与Popgen Ver.1.32聚类结果呼应得较好,其中云南和四川资源的群体结构最复杂,最为多样化,分别被聚到了5个组群中。【结论】苦荞类群的亲缘关系以及遗传多样性与其地理分布有一定相关性。  相似文献   

苦荞SSR分子遗传图谱的构建及分析   总被引：4，自引：1，他引：3  

杜晓磊  张宗文吴斌李艳琴  王安虎 《中国农学通报》2013,29(21):61-65

构建苦荞遗传连锁图谱,为今后有关苦荞基因组结构、重要农艺性状QTL定位、分子标记辅助育种和基因克隆等研究工作奠定基础。以栽培苦荞‘滇宁一号’和苦荞野生近缘种杂交产生的119份F4代分离材料为作图群体,利用SSR分子标记来构建苦荞的分子遗传连锁图谱。本研究构建的连锁图谱包含15个连锁群,由89个标记组成,其中偏分离的标记有22个,占24.7%,每条连锁群上的标记在2~16之间。连锁群长度在6.9~165.8 cM的范围,覆盖基因组860.2 cM,总平均长度9.7 cM。本研究构建了首张苦荞SSR遗传连锁图谱,为苦荞QTL定位、基因克隆、遗传选育等研究奠定了基础。  相似文献   

中国苦荞SSR分子标记体系构建及其在遗传多样性分析中的应用   总被引：9，自引：3，他引：6  

高帆  张宗文  吴斌 《中国农业科学》2012,45(6):1042-1053

【目的】从分子水平优化并构建用于中国苦荞种质资源遗传多样性分析的SSR分子标记体系,为综合评价中国苦荞种质资源提供依据。【方法】以50份苦荞种质为试验材料,用正交设计法[L16(45)]筛选适用于苦荞SSR标记分析的PCR反应体系,浓度梯度检测最佳胶分离效果,并从250对不同科属作物SSR引物中筛选出19对引物进行苦荞遗传多样性分析。【结果】优化的苦荞SSR反应体系为DNA模板30 ng,Taq酶2.0 U•L-1,dNTP、引物和Mg2+终浓度分别为150 μmol•L-1、0.1 μmol•L-1、2.0 mmol•L-1,总体积为25 μL,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。SSR引物筛选率为7.6%,蓼科同属甜荞的SSR引物适用于苦荞SSR扩增。19对引物共检测到157个等位变异,每对SSR引物检测到的等位变异2-11个,平均等位变异（NA）7.42个,平均多态性信息量（PIC）0.888,平均鉴定力（DP）5.684,2对为SSR骨干引物。利用Popgen Ver.1.31软件,当遗传相似度（GS）为0.578时,50份苦荞材料被分为5个组群,聚类结果与苦荞地理分布相关性不大。四川苦荞资源组群各遗传多样性参数均最高,该区域苦荞种质资源多样性最丰富。利用骨干引物可鉴定部分近缘苦荞品种。【结论】构建的SSR分子标记体系适用于中国苦荞种质资源遗传多样性分析,甜荞SSR引物可用于苦荞SSR标记分析,TBP5和Fes2695为苦荞SSR骨干引物,50份苦荞材料遗传多样性丰富,可划分为5个组群。  相似文献