草鱼肠道中香港海鸥型菌的选择性分离与鉴定   总被引：7，自引：0，他引：7       下载免费PDF全文

潘厚军  吴淑勤  李宁求  石存斌  李凯彬  巩华  陶家发  常藕琴 《中国水产科学》2005,12(3):307-313

从广东省某市池塘采集商品规格(体重2．0～2．5k)的草鱼(Ctenoharyngodon idellus)，利用加有头孢哌酮的麦康凯琼脂培养基，对其肠道中细菌进行选择性分离与鉴定。结果显示，12尾草鱼的肠道中，5尾可分离到具有以下特征的细菌：两端生鞭毛，菌体弯曲似海鸥状，革兰氏染色阴性，过氧化氢酶、氧化酶、尿酶和精氨酸双水解酶阳性，还原硝酸盐。不发酵、氧化或同化葡萄糖、甘露醇等15种常见的糖醇类，细菌形态、生化特性与报道的香港海鸥型菌相似，阳性率为41．7％。但在肌肉中未分离到此菌。进行分离细菌的16S rRNA基因序列分析，与GenBank中登录的4株香港海鸥型菌序列的同源性为99．7％～99．9％。由菌的培养特征、形态特点、理化特性、16S rRNA基因序列分析等多元鉴定的结果表明，从草鱼肠道中选择分离的细菌为香港海鸥型菌。药敏实验结果表明，所分离菌株对奥格门丁和亚胺培南的敏感性与报道的香港海鸥型菌有一定区别。  相似文献   

应用间接荧光抗体技术研究水中嗜水气单胞菌的数量与鱼类出血性败血病的关系   总被引：3，自引：0，他引：3  

吴淑勤  石存斌  潘厚军  黄志斌 《中国水产科学》1994,2(2)

应用间接荧光抗体技术（ＩＦＡＴ），并结合嗜水气单胞菌（Ａｈ）地区优势血清型，对鱼类出血性败血病的致病菌Ａｈ进行水中数量的测定。ＭＭ感染试验和对生产鱼塘调查的结果表明，水中Ａｈ菌量与疾病呈正相关，致病浓度又随鱼体健康低下、水中氨氮偏高、溶氧偏低等多种因子的影响而下降。本试验方法快速简便，检测对象为水体，非常适用于预测疾病的发展趋势。  相似文献   

鳜致病性嗜水气单胞菌GYK1株的鉴定、毒力及溶血性   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘厚军  吴淑勤  董传甫  石存斌  叶美茜  林天龙  黄志斌 《上海海洋大学学报》2004,(1):23-29

从患溃疡病的鳜肾脏中分离出一株病原细菌编号为GYK1。此株病菌人工感染鳜、银鲫、剑尾鱼,实验鱼出现出血、肌肉坏死或溃疡症状;腹腔注射攻毒,对鳜、银鲫、剑尾鱼、小鼠的半致死剂量(LD50)分别为8.33×104、1.06×105、1.26×105、1.05×106CFU/g;菌培养液上清能溶解鳜、加洲鲈、银鲫、小鼠、兔、绵羊、人O型血等的红细胞,在绵羊血平板上为β 溶血,不同代次和保存条件的细菌溶血性稳定。细菌在电镜下的形态、生化特性和ID32E系统自动鉴定的结果均符合嗜水气单胞菌的特征;PCR扩增检测到嗜水气单胞菌特异性的毒力基因气溶素基因(aerA)209bp片段,进一步说明此株病原细菌为含有毒力基因的嗜水气单胞菌。实验结果表明,GYK1是一株毒力和溶血性均较强的嗜水气单胞菌。  相似文献   

鳜塘水体理化因子昼夜变化及相关性研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

赖子尼  石存斌  吴淑勤  李凯彬  钟邓文  劳启宁  吴柳平  卫东 《大连水产学院学报》2001,16(1):61-66

通过对鳜塘水体部分理化因子昼夜检测及藻类的观察 ,分析了塘水重要理化因子昼夜变化情况。结果表明 ,不同鳜塘溶氧、pH值昼夜升降变化规律基本一致 ,总铵、亚硝酸盐氮、磷酸盐磷昼夜变化因塘而异。鳜塘生态因子的统计分析还显示 ,磷酸盐磷与异氧细菌数 (r2 8=0 30 )相关性最大 ,其次是与溶氧 (r2 8=0 2 4 ) ;亚硝酸盐氮与叶绿素a呈负相关 (r2 8=- 0 35) ;总铵与多数因子呈负相关 ,但相关不显著  相似文献   

草鱼呼肠孤病毒JX-0901株FQ-PCR检测方法的建立及其在定量分析中的应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘宝芹  曾伟伟  王庆  张乐生  王英英  石存斌  李华  吴淑勤 《广东农业科学》2012,39(11):139-143

根据GCRV JX-0901株S7基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立了针对GCRV JX-0901株病毒的TaqMan实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并利用FQ-PCR方法对该毒株在不同鱼类细胞中的增殖情况和不同温度条件下的稳定性进行了定量分析。结果显示,建立的FQ-PCR方法的Ct值与标准品在1.0×101～1.0×108拷贝/μL浓度范围呈良好的线性关系,R2高达0.999;该方法有较好的敏感性和特异性,最低模板检出量为10个拷贝,只能特异地检测出GCRV JX-0901,不能检出其他鱼类常见病毒。该毒株能在10种常见鱼类细胞中增殖,其中在L8824细胞中的增殖量最大,含量达到4.1933×107拷贝/μL;此外,该毒株对温度敏感性较弱,病毒在48、56℃条件下放置96 h后才失去对CIK细胞感染性,而在4、15、28、37℃条件下放置32d,-20℃条件下储存2年仍具有较高的含量和较强的感染性。  相似文献   

食蚊鱼白内障的研究初报     

李凯彬  常藕琴  王芳  刘春  吴淑勤 《广东农业科学》2012,39(2):98-100

采用定期观察方法,了解食蚊鱼白内障的发生过程以及由此导致的外部形态和行为的变化情况。研究的食蚊鱼群体的白内障有较高的发生率,白内障鱼一般体色晦暗,经常浮于水面缓慢游动;其摄食和生长也受较大影响。食蚊鱼白内障大多是双眼同时发生的,眼球可见不同程度的浑浊。从外观形态区分,食蚊鱼白内障主要有两种类型,一种是绕核性白内障,另一种无法看到晶状体形状,表现为整个眼球的不透明。对病鱼的眼球等进行组织病理观察,发现病理变化部位主要在晶体,所有病例的晶状体纤维都出现病理变化,最普遍的是晶状体皮质区纤维不同程度变性或断裂;晶状体上皮细胞有脱落、增生等。食蚊鱼白内障为鱼类白内障研究提供良好材料。  相似文献   

牡蛎养殖过程中副溶血弧菌与水质因子间的关系     

林强  李宁求  付小哲  刘礼辉  石存斌  吴淑勤 《勤云标准版测试》2012,32(1)

为了研究牡蛎养殖过程中副溶血弧菌与水质因子之间的关系,2009年3月到11月从广东阳西某牡蛎养殖场采集牡蛎样品检测其副溶血弧菌的感染情况,并检测水体温度、盐度、pH和溶解氧。实验结果表明：副溶血弧菌总量的检出率为94.38%。水温和副溶血弧菌总量呈正相关,盐度和副溶血弧菌总量呈负相关,pH和溶解氧与副溶血弧菌总量的相关性不明显。对水温和盐度与副溶血弧菌总量的对数进行回归分析,水温和副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP= 0.093?T-0.685(R₂=0.336);盐度和副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP=1.199 0.116?S-0.004?S₂(R₂=0.217);水温和盐度对副溶血弧菌浓度的拟合回归方程为：lgVP=-1.941 0.116?T 0.058?S-0.001?S₂(R₂=0.414)。研究结果可为牡蛎养殖过程中副溶血弧菌的风险分析提供参考依据。  相似文献   

鳜鱼幽门盲囊球虫感染的病理组织学观察     

黄彦云  于博  孔小明  吴淑勤  石存斌 《动物医学进展》2005,26(7):77-79

对广东省某鳜鱼养殖场发生的一起以慢性死亡为特征的疾病进行了病理组织学诊断。在所取的4尾鱼中,3尾在幽门盲囊内发现严重的球虫感染,球虫在上皮细胞内寄生并释放,引起上皮细胞坏死,由此可诊断为球虫感染。这是国内首次鳜鱼球虫感染的报道,也是国内第一次在幽门盲囊内发现球虫感染。  相似文献   

鳜黏膜淋巴组织结构的初步研究     

范毛毛  常藕琴  石存斌  王斌  吴淑勤 《中国水产科学》2009,3(3)

采用组织学和电镜技术,应用HE常规染色方法、AB-PAS黏液细胞染色方法、免疫组织化学方法,对鳜(Siniperca chuats)黏膜淋巴组织的基本结构以及免疫相关细胞的形态、类型及其在黏膜淋巴组织中的分布情况进行了研究.结果表明,鳜的鳃弓、鳃小片基部、皮肤的表皮以及肠上皮中存在大量的黏液细胞,用AB-PAS染色方法将鳜黏液细胞分为6种类型;免疫组化方法可在鳃的血窦腔、皮肤的基底层以及肠黏膜层中检测到抗体分泌细胞的存在;透射电镜观察显示,黏膜淋巴组织中存在着黏液细胞、淋巴细胞、浆细胞、吞噬细胞、肥大细胞、朗罕氏细胞、嗜中性粒细胞等免疫相关细胞.结论认为,鳜黏膜淋巴组织具有完成免疫应答的细胞基础.  相似文献   

一种佐剂新材料在嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡免疫鲫中的应用效果     

任燕  时云朵  石存斌  吴淑勤 《水产学报》2018,42(1):112-119

为研究蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷(CPMG)在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的佐剂作用,将CPMG和嗜水气单胞菌灭活疫苗联合施用,二次浸泡免疫异育银鲫后饲养在室内玻璃缸中,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测加强免疫后2、4、7、11、14和21 d脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素和溶菌酶的m RNA表达量,首次免疫30 d后用同源菌株活菌攻击实验鱼;同时,用含CPMG、山莨菪碱复合佐剂的灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫一次后饲养在池塘网箱中,定期抽取血液检测血清抗体效价并用同源菌株人工感染实验鱼。结果显示,CPMG佐剂组和无佐剂组的5个免疫相关基因的相对表达量显著高于对照组,CPMG组Ig M基因较无佐剂组更早表达,补体C3、C-凝集素以及溶菌酶的基因表达量更高或表达持续时间更长。血清抗体效价在免疫后2周达到160,6周达到峰值640,12周降低为40。室内玻璃缸中二次免疫30 d后,CPMG组的平均相对保护率达到70.6%,复合佐剂组达到88.2%,均显著高于无佐剂组的56.0%。池塘网箱中一次浸泡免疫30、60和120 d后,平均相对保护率分别为54.6%、44.0%和12.5%。研究表明,CPMG与嗜水气单胞菌灭活疫苗共同浸泡免疫异育银鲫,增强了脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素以及溶菌酶基因表达,提高了异育银鲫抗嗜水气单胞菌感染的能力。  相似文献