鸭ChREBP基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响          下载免费PDF全文

谭光辉  覃媛钰  王单单  李万贵  罗华伦  吴磊  李杰章  张依裕 《南方农业学报》2020,51(4):937-944

[目的]探究鸭原代肝细胞脂质含量与碳水化合物反应元件结合蛋白基因(ChREBP)表达的关联性,为深入研究ChREBP基因对畜禽脂质代谢的遗传调控机制提供参考依据.[方法]采用Ⅳ型胶原酶消化法分离孵化21 d的鸭胚原代肝细胞,以DMEM高糖培养基进行培养.利用RT-PCR扩增鸭ChREBP基因编码区(CDS)序列,构建携带His标签的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His,通过脂质体法分别转染鸭胚原代肝细胞和人前列腺癌细胞(PC3);采用His标签检测试剂盒检测ChREBP基因的表达量,以脂质指标测定试剂盒测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量,并分析鸭胚原代肝细胞和PC3细胞中ChREBP基因表达与脂质指标含量的相关性.[结果]以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞均能发出绿色荧光,表明携带His标签的ChREBP基因能在鸭原代肝细胞和PC3细胞中表达.ChREBP基因表达量与鸭原代肝细胞和PC3细胞中的TG、TC和HDL含量均呈极显著正相关(P<0.01,下同),与LDL含量呈极显著负相关.[结论]以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞后均能发出绿色荧光,说明ChREBP基因表达对鸭原代肝细胞和PC3细胞中的脂质代谢作用机理相似,可促进细胞脂质累积.  相似文献   

科技先行，探索创新，促进海南红毛丹产业发展     

陈兵  吴磊  黄升南 《热带作物学报》2010,30(9):80-82

简介保亭红毛丹产业发展情况，分析红毛丹产业发展的制约因素，提出促进红毛丹产业发展的思路及今后工作的打算。  相似文献   

长顺绿壳蛋鸡SFRP5基因外显子1的SNPs鉴定及其与常规肌肉品质的关联性分析     

游敏芳  廖朝美  吴磊  张依裕  刘若余  蒋会梅  张义玲  向程举  杨远清 《畜牧与兽医》2021,(3):1-6

分泌型卷曲相关蛋白-5(SFRP5)对畜禽脂质代谢起着至关重要的调控作用。为了探讨鸡SFRP5基因SNPs与肌肉品质的相关性,采用PCR产物直接测序法检测SFRP5基因外显子1的SNPs位点,分析其对长顺绿壳蛋鸡胸肌肌肉品质的影响。结果显示:在SFRP5基因外显子1的CDS区中发现3个SNP沉默突变位点:g.23251706 C>T为低度多态位点,g.23251882 C>T和g.23252056 C>T为中度多态位点;3个位点的等位基因C和基因型CC均处于优势地位,且基因型分布均未偏离Hardy-Weinberg平衡状态。连锁不平衡分析表明:3个SNP位点之间不存在强连锁不平衡,发现4种单倍型和10种双倍型,单倍型H1和双倍型H1H1频率最高。关联性分析结果表明:g.23251706C>T位点对胸肌蒸煮损失的影响达到显著水平(P<0.05),TT基因型有利于降低蒸煮损失;g.23252056C>T位点则对失水率的影响达到显著水平(P<0.05),TT基因型有利于提高肌肉保水力;3个SNP位点联合组成的双倍型对胸肌的5个常规肉品质指标均有不同程度的影响。综合所有指标在双倍型之间的差异,双倍型H2H2是改善长顺绿壳蛋鸡肌肉品质最有利的双倍型,揭示在SFRP5基因外显子1中发现的3个SNP位点相互联合能显著影响肉质,可作为鸡肌肉品质选择的遗传标记。  相似文献   

长顺绿壳蛋鸡OCX-32基因变异对蛋壳品质的效应研究     

吴磊  杨明鑫  张依裕  罗华伦  覃媛钰  潘周雄 《黑龙江畜牧兽医》2019,(18)

为了进一步了解蛋壳基质蛋白OCX-32基因对鸡蛋壳品质的遗传效应,试验以长顺绿壳蛋鸡为研究对象,在测定蛋壳质量后翅静脉采血提取DNA,采用PCR扩增并结合PCR产物直接测序法对OCX-32基因进行单核苷酸多态性(SNP)筛查及与蛋壳品质的关联分析。结果表明:在长顺绿壳蛋鸡OCX-32基因中检测到2个SNP位点,即位于外显子4的g.22 598 071 CT错义突变,产生2种基因型(CC和CT),其中C为优势等位基因,其频率为0.900,属于低度多态位点;位于内含子4的g.22 598 730TA突变,产生3种基因型(TT、TA和AA),T为优势等位基因,其频率为0.650,属于中度多态位点。关联性分析结果显示,g.22 598 071 CT位点对长顺绿壳蛋鸡蛋壳强度、蛋比重、蛋壳比例和蛋白高度有显著影响(P0.05),g.22 598 730 TA位点对长顺绿壳蛋鸡的蛋品质10个指标无显著影响(P0.05)。说明g.22 598 071 CT位点可能作为鸡蛋壳品质选择的一个遗传标记,OCX-32基因与长顺绿壳蛋鸡蛋品质存在一定的相关性,可作为发掘长顺绿壳蛋鸡蛋品质的分子育种标记。  相似文献   

南昌市锦峰大酒店发展战略研究     

吴磊 《湖南农机》2012,(11):166-167

南昌锦峰大酒店作为本地区老牌五星级酒店,在对手林立的高端酒店市场竞争中,必须调整发展战略,适应市场需求,文章从品牌、服务、文化、营销四方面进行阐述。  相似文献   

日粮纤维对育肥猪生产性能、抗氧化性能及肉品质的影响     

吴磊  王琳琳 《中国饲料》2023,1(8):66-69

文章旨在探究日粮纤维对育肥猪生产性能、抗氧化性能及肉品质的影响。试验将192头健康、体重近似的外三元杂交育肥猪随机分为4组,每组6重复,每重复8头猪。试验在日粮中添加不同水平麸皮和玉米胚芽粕来调节纤维水平,对照组、试验组1～3的纤维水平分别为3.51%、5.16%、6.58%和8.08%。预试期5d,正试期46d。结果表明,与对照组相比,育肥猪日粮中添加6.58%的纤维可显著降低平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）(P <0.05);与对照组相比,育肥猪日粮中添加6.58%的纤维,血清总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力显著提高7.62%、5.02%,丙二醛（MDA）含量显著降低7.32%(P <0.05);与对照组相比,育肥猪日粮中添加6.58%的纤维,猪肉的剪切力、失水率显著降低8.31%、11.93%,大理石评分和pH24显著提高3.62%、3.57%(P <0.05)。综上所述,育肥猪日粮中添加6.58%的纤维可显著提高其生产性能和抗氧化性能,并改善肉质。  相似文献   

虾夷扇贝Dmrt1基因的分子鉴定及表达模式分析     

赵丹  周丽青  郑言鑫  孙秀俊  吴彪  刘志鸿  吴宙  吴磊 《中国水产科学》2021,28(5):541-549

Dmrt1 是 Dmrt 双性和 mab-3 相关转录因子基因家族的重要成员之一, 在生殖细胞分化和性别调控中发挥着重要作用。为探究其在虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)性别分化中的表达调控模式, 本研究利用生物信息学的方法分析了虾夷扇贝 Dmrt1 的序列特征; 采用半定量 PCR (RT-PCR)检测了 Dmrt1 在不同组织中的表达量差异; 应用实时荧光定量 PCR (qRT-PCR)和原位杂交技术 ISH (in situ hybridization)揭示了 Dmrt1 在性腺发育 4 个时期(增殖期、 生长期、成熟期、排放期)中的时空表达变化。结果显示, 虾夷扇贝 Dmrt1 序列包含 Dmrt 基因家族共有的 DM 结构域; 与已知物种同源序列比对后发现, 虾夷扇贝 Dmrt1 序列与欧洲大扇贝(Pecten maximus)同源性最高; 原位杂交检测到的阳性信号主要定位在生殖细胞的细胞质中; qRT-PCR 定量结果发现, Dmrt1 在精巢生长期和成熟期的表达水平显著高于卵巢, 在卵巢各发育时期中的表达量无明显变化且维持低水平状态。此外, 在外套膜、鳃、肾、和闭壳肌中检测到少量表达的 Dmrt1 转录本, 而在肝胰腺中未检测到。研究结果表明, Dmrt1 在虾夷扇贝生殖细胞分化过程中的表达特征与在其他动物性腺发育中的表达特征基本一致, 推测其是虾夷扇贝性别分化调控中的关键基因。  相似文献   

旱作条件下旱稻和水稻叶片光合特性及RuBP羧化酶活性的比较     

陈展宇  徐克章  吴磊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012,40(5):87-91

【目的】探讨旱作条件下旱稻、水稻品种叶片光合特性及RuBP羧化酶活性的变化规律,为旱稻品种的选育和高产栽培提供依据。【方法】选择2个旱稻品种（“旱9710”、“秦爱”）和2个水稻品种（“吉农8号”、“长白12号”）为试验材料进行田间旱作试验,于苗期、开花期、灌浆期、成熟期测定其叶片光合特性及RuBP羧化酶活性。【结果】旱作条件下,在整个生育期,旱稻品种叶片的叶绿素含量、RuBP羧化酶活性、净光合速率均显著高于水稻品种（P<0.05）,旱稻品种叶片蒸腾速率显著低于水稻品种（P<0.05）,水分利用效率极显著高于水稻品种（P<0.01）;旱稻品种叶片的净光合速率与气孔导度、水分利用效率、RuBP羧化酶活性呈显著正相关。【结论】与水稻品种相比,旱稻品种叶片叶绿素含量高,RuBP羧化酶活性强,蒸腾作用弱,水分利用效率高,从而有利于提高旱稻的抗旱性,维持较高的光合效率。  相似文献   

浅析农村老年人自杀问题——以安徽省宁国市Y乡Z村为例     

吴磊  陆卫斌  朱冠楠 《农村经济与科技》2009,20(4)

近年来,安徽省宁国市Y乡Z村中的老年人自杀事件频频发生,自杀在老年人死亡中所占的比例呈现出上升趋势,这已成为当地人们颇为关注的社会热点问题。文章在实地调查的基础上,结合一定的文献档案资料,对农村老年人自杀问题进行了分析。  相似文献   

当前猪场主要疫病的免疫   总被引：4，自引：0，他引：4  

张洁  谢有福  王守文  朱欣  吴磊 《河南畜牧兽医(综合版)》2003,24(9):40-40

根据近来疫病的流行情况,对养猪生产危害较大的疫病主要有:猪口蹄疫、猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、仔猪副伤寒、猪伪狂犬病、猪传染性胸膜肺炎、乙脑、细小病毒病、链球菌病、喘气病、圆环病毒2型感染、传染性萎缩性鼻炎等,可参照以下免疫程序开展免疫工作:  相似文献