猪链球菌2型分选酶srtC5基因敲除突变菌株的构建及其特性分析     

祝令伟  田园  贝为成  齐翀  刘军  孙洋  周博  郭学军  冯书章 《中国兽医学报》2011,31(7)

构建猪链球菌2型（Streptococcus suis serotypc 2）强毒株ZY458分选酶srtC5基因敲除突变体并分析其特性。首先通过重叠延伸PCR技术扩增AsrtC5片段,该片段携带srtC5编码基因及其上下游部分序列,但是中间缺失212bp序列。随后构建重组自杀载体pSET4s：：△srtC5,并将其电转化导入ZY458菌株,通过同源重组获得△srtC5突变体。通过体外的细胞黏附试验和体内的家兔攻毒试验证明△srtC5突变体比较野毒株,其细胞黏附能力和对家兔的致病性都显著降低。  相似文献   

绿盲蝽对寄主转换的适应性及生理响应   总被引：2，自引：0，他引：2  

肖留斌  谭永安  孙洋  赵洪霞  吴国强  柏立新 《中国农业科学》2013,46(23):4941-4949

【目的】明确绿盲蝽在不同寄主植物之间转换后的适应性与生理响应机制。【方法】采用昆虫试验种群生命表方法,系统测定用四季豆饲养2代后的绿盲蝽分别转换到豇豆、绿豆、鄂杂棉10号（Bt棉）和苏棉9号（非Bt棉）上的种群生长发育与繁殖等生命表参数,并分析不同供试寄主饲养的绿盲蝽成虫体内的淀粉酶、蛋白酶及海藻糖酶活性和海藻糖含量。【结果】绿盲蝽由四季豆转移到不同供试寄主植物上均可完成世代循环,但不同龄期若虫的发育历期与存活率、5龄若虫体重及成虫寿命与产卵量等差异显著。不同供试寄主饲养的绿盲蝽种群趋势指数值依次为：四季豆（16.56）﹥Bt棉-鄂杂棉10号（3.23）﹥常规棉-苏棉9号（2.14）﹥豇豆（1.67）﹥绿豆（1.31）。不同供试寄主饲养的绿盲蝽成虫体内的几种酶活性也存在较大差异。转基因棉（鄂杂棉10号）种群的海藻糖酶活性最高（3.74 μg•mg-1•min-1）,而海藻糖含量最低（3.03 μg/adult）。【结论】绿盲蝽由四季豆转换到其它4种寄主后,其生长发育速率与种群趋势增殖指数等生命参数均有所下降,成虫体内的蛋白酶、淀粉酶、海藻糖酶活性及海藻糖含量也有显著差异。总体相对比较而言,绿盲蝽对棉花具有较高的适应性。  相似文献   

EHECO157∶H7stx基因缺失突变株的构建及其特性     

孙洋  刘军  郭学军  常国权  尹铁勇  冯书章 《中国兽医学报》2005,(2)

针对肠出血性大肠杆菌 (EHEC) O1 5 7∶H7的 stx基因 ,通过 PCR扩增出缺失了 1 83bp的 stx基因片段 ,将其克隆到自杀性载体 p CVD4 4 2中 ,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒 p CVD4 4 2∷Δstx从大肠杆菌 SM1 0转到 O1 5 7∶ H7中 ,利用抗性标记和 PCR方法筛选出 O1 5 7∶ H7stx基因缺失突变菌株。Vero细胞毒性试验证实 ,该突变株不能产生完整的 Stx。动物试验表明 ,与强毒株相比该突变株的致病性明显降低。该突变株的构建为研究志贺毒素在 EHEC O1 5 7感染中所起的作用和研制 O1 5 7的基因工程减毒活菌苗奠定了基础  相似文献   

计算机及网络的管理与安全防护     

杨光  孙洋  王磊  吴冰 《内蒙古林业调查设计》2013,36(2):135-137

近年来,随着科技的发展,计算机和网络得到飞速发展和应用,已成为社会运转的核心和未来发展的趋势,信息化在为发展带来机遇和便利的同时,也带来安全问题。文章以计算机管理为研究重点,对计算机的管理与安全防护现状进行了分析,并以风险管理理念为指导,从培育风险意识、加强制度建设、运用技术手段、强化监督检查等方面,提出了加强计算机管理的对策。  相似文献   

出血性大肠杆菌感染疫苗的研究进展     

陈萍  冯书章  孙洋 《中国兽药杂志》2007,41(4):29-33

介绍了国内外出血性大肠杆菌感染疫苗的研究概况，包括Stx类毒素疫苗、亚单位疫苗、结合疫苗、减毒活菌苗及一些新型疫苗研究的技术发展和最新成果。其中Stx类毒素疫苗肠外注射免疫在兔子和猪中已经显示具有保护效果；利用弱毒霍乱弧菌或沙门氏菌载体表达Stx的减毒活菌苗免疫小鼠能产生中和肠毒素的血清抗体；此外还发展了多种以特异性多糖为基础制备的结合疫苗；近年来通过构建真核细胞质粒pStx2B和pStx2△A发展的DNA疫苗，诱导小鼠产生了抗Stx2体液免疫反应。  相似文献   

我国犬埃立克体病病原分离与鉴定 Ⅱ.我国病原株与其他埃立克体间的遗传距离分析     

潘华  孙洋  马玉海  佟世德  莫卓寿 《中国兽医学报》1999,(6)

应用clustalw 计算机分析软件,对我国南方某养犬基地的埃立克体病原株(Gzh981 和Gzh982)与基因库中其他相关埃立克体16SrRNA 基因进行了匹配分析。结果表明,我国的2 种分离株分别与E. platys和 E. canis 的遗传距离最小(0.001)。在系统发育中, Gzh981 和 E. platys、HGE、E. equi、E.phagocytophila 同属一群;Gzh982 和E. canis、E. ew ingii、E. chaffeensis、E. m uris同属一群。  相似文献   

EHEC O157:H7 stx基因缺失突变株的构建及其特性     

孙洋  刘军  郭学军  常国权  尹铁勇  冯书章 《中国兽医学报》2005,25(2):166-169

针对肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7的stx基因，通过PCR扩增出缺失了183bp的s灯基因片段，将其克隆到自杀性戢体pCVD442中，然后通过接合性转导将重组自杀性质粒pCVD442：：△stx从大肠杆菌SMIO转到O157：H7中，利用抗性标记和PCR方法筛选出O157：H7 stx基因缺失突变菌株。Vero细胞毒性试验证实，该突变株不能产生完整的Stx。动物试验表明，与强毒株相比该突变株的致病性明显降低。该突变株的构建为研究志贺毒素在EHEC O157感染中所起的作用和研制O157的基因工程减毒活菌苗奠定了基础。  相似文献   

犬源大肠杆菌耐药与毒力的分子特征     

纪雪  王嵘  孙洋 《中国兽医学报》2014,(4):578-582

从9份病犬血便和6份健康犬粪便样品中分离出17株大肠杆菌,分别进行了生化鉴定,耐药基因blaCTX-M、blaTEM和blaSHV以及24种毒力基因的PCR扩增,13种抗菌药的药敏检测,以及ESBL表型鉴定、MLST分型、菌株分群和质粒分型。研究发现,病犬分离出的大肠杆菌多为致病性的ESBL表型耐药菌,携带多种质粒以及blaCTX-M和/或blaTEM-1基因,检测到10种毒力相关基因,健康犬分离出的大肠杆菌对多数抗菌药敏感,绝大部分未检测到质粒及blaCTX-M、blaTEM和blaSHV耐药基因。本研究从健康犬大肠杆菌分离株检测到3种新的ST型,分别为ST4001、ST4002和ST4003。结果表明,犬致病性大肠杆菌耐药情况十分严重,其临床治疗难度以及耐药性传播风险将加大,并对于人类健康具有潜在威胁,应予以重视。  相似文献   

中国农业科学院网站平台智能搜索技术与方法研究     

孙洋  杨晓蓉 《安徽农业科学》2015,(35):343-346

为了解决原有检索技术已经不能满足中国农业科学院网站检索需求的问题,研究了智能搜索引擎方面相关的关键技术和方法.探讨了利用智能搜索引擎关键技术在中国农科院网站平台改进搜索技术的方法,将搜索结果与现有的搜索技术在中国农科院网站平台搜索时所得到的结果相比较,结果表明,基于智能搜索引擎方面的关键技术改进的搜索平台在检索结果上明显占优,实际应用效果令人满意.  相似文献   

仔猪腹泻大肠杆菌流行株鉴定及毒力与耐药性分析     

刘哲  孙洋  纪雪  郭学军  刘军  祝令伟  周伟  冯书章 《中国畜牧兽医》2017,44(4):1226-1232

为明确河南地区一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病原特性及其耐药谱,本研究对肠道致病大肠杆菌进行了分离鉴定。对腹泻仔猪粪便中分离的大肠杆菌进行13种毒力基因检测和21种抗生素的药敏试验。结果显示,34.8%分离株检出EAST1基因;所获分离株均为多重耐药菌株,且至少对5类抗生素耐药,耐9类以上抗生素的菌株达到75.3%,对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率达到100.0%。细菌种系进化分群结果显示,21.7%分离株属于有致病性的B2群和D群。本研究获得了腹泻仔猪大肠杆菌分离株的毒力基因、耐药谱的基本数据和种系进化分群的遗传背景,为制定有针对性的治疗和防控技术方案提供依据。  相似文献