罗非鱼无乳链球菌的分离、鉴定及致病性研究   总被引：8，自引：3，他引：5       下载免费PDF全文

张新艳  樊海平  钟全福  卓玉琛  林煜  曾占壮 《水产学报》2008,32(5):772-779

从患暴发性流行病罗非鱼的肝脏中分离获得一株细菌TL60829NA,将TL60829NA对罗非鱼进行人工感染致病性试验,试验感染罗非鱼表现出自然发病症状,确认分离菌株为罗非鱼暴发性流行病的致病菌.分离株菌经形态学观察、Bio Merieux Vitek全自动微生物分析系统GPI测定卡分析和16S rRNA特异性基因序列与NCBI中收录的其它引起罗非鱼病害的链球菌的16S rDNA序列构建的系统发育进化树显示,分离细菌与其它无乳链球菌的16S rDNA序列构成一个进化分支,而海豚链球菌则构成另一分支,确定分离菌株为无乳链球菌(Streptococcus agalaciate).分离菌株对氨苄西林、青霉素G、卡那霉素等28种试验药物敏感,对妥布霉素、复方新诺明、环丙沙星等15种试验药物不敏感.由无乳链球菌引起的罗非鱼暴发性流行病的主要病理变化为鳃小片结构崩解,鳃上皮增生、融合;心肌纤维变性、肌间白细胞浸润;肝脏颗粒变性和脂肪变性;肠道粘膜上皮变性、坏死、脱落、固有膜炎性白细胞浸润;肾脏组织大量嗜中性白细胞浸润,肾小管上皮细胞核固缩,小动脉血管壁玻璃样变性;眼睛的脉络膜和眶骨膜组织炎性坏死,晶状体纤维断裂和脱离.  相似文献   

罗非鱼无乳链球菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

张新艳 《福建农业学报》2014,29(6)

通过杂交瘤技术制备抗罗非鱼无乳链球菌SIP融合蛋白单克隆抗体2株:1C9和6G5,均为IgM,效价分别为10-5和10-4,间接ELISA结果显示单克隆抗体1C9对无乳链球菌具有良好的检测特异性和灵敏性;同时制备兔抗罗非鱼无乳链球菌SIP融合蛋白多克隆抗体及其HRP酶标记物,兔抗SIP蛋白多克隆抗体的效价为10-6,经标记的抗体效价为10-4,最佳抗体工作浓度为1:400.建立双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测罗非鱼无乳链球菌的方法,具良好的特异性,检测灵敏度为0.85×106 CFU· mL-1.双抗体夹心ELISA检测实际应用结果与双重PCR检测比较,相对符合率为98.33％,检测结果可靠性高.  相似文献   

豚鼠气单胞菌胶体金免疫层析试纸条的研制     

辛志明  樊海平  吴斌  张新艳 《水产学报》2009,33(4):679-684

采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体分泌细胞株,获取抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体,柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒,标记抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体并制备胶体金垫。将胶体金垫与喷涂有抗豚鼠气单胞菌兔多克隆抗体和羊抗鼠抗体的硝酸纤维素膜及样品吸收垫等组装成免疫层析试纸条,建立豚鼠气单胞菌的快速检测方法。用灭活细菌与血清混合的模拟样本测定试纸条的特异性、灵敏度,结果显示,试纸条对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌等13种常见病原菌没有交叉反应,与豚鼠气单胞菌显示特异性反应,检测灵敏度为1×10⁶ CFU/mL,结果显示时间小于5 min。研制的豚鼠气单胞菌胶体金免疫层析检测试纸条具有快速、简便、特异性高、适用于基层临床生产推广应用等优点。  相似文献   

城乡公路建设投资控制探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

张新艳  屈青山 《技术与市场》2007,(9):94-95

本文分析了城乡公路交通建设的投资构成,找出投资管理中的薄弱环节,提出加强控制和管理,降低建设投资风险,充分利用资金成本,运转投资控制体系等措施.  相似文献   

鸿鹤谷水土保持科技示范园     

李张谦  张新艳 《中国水土保持》2018,(5)

正鸿鹤谷水土保持科技示范园位于陕西省渭南市区南25 km,总面积65 hm~2,其中水土流失面积63 hm~2,属黄土丘陵沟壑区,水土流失严重。园区建设坚持以水保示范为主,兼顾产业示范、休闲旅游和科普教育三大功能。园区综合治理主要采取在坡耕地上新建水平梯田,配套肥水一体化节水灌溉,栽植经济林发展支柱产业;在荒坡地上修建鱼鳞坑、水平阶等栽植水保生态林,积极  相似文献