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试验Ⅰ：将180羽11日龄非免疫健康三黄鸡随机分为5组。第Ⅰ～Ⅲ组分别注射高、中、低剂量（4、2、1mg·kg^-1）的新鱼腥草素钠（sodium new houtluyfonate，SNH）注射液；Ⅳ组和Ⅴ组分别为白细胞介素2（IL-2）和生理盐水对照。所有动物于14日龄以新城疫病毒（NDV）LaSota株弱毒活疫苗滴鼻进行第1次免疫，2周后加强免疫1次。于第1次免疫后的7、14、21、28、35和42d测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平以及外周血CD4＋／CD8＋淋巴细胞比值。结果表明，SNH能显著提高鸡体抗NDV抗体水平和外周血CD4＋／CD8＋淋巴细胞比值（P〈0．05），并以中等剂量（2mg·kg^-1）效果最为明显。试验Ⅱ：将72羽7日龄非免疫健康三黄鸡随机分成3组，第1组口服氟苯尼考（Florfenicol，1．2g·kg^-1）并配合肌肉注射SNH（2mg·kg^-1）；同时设氟苯尼考（Ⅱ组）和生理盐水（Ⅲ组）对照。各组于14日龄以NDV LaSota株弱毒活疫苗进行第1次免疫，2周后进行第2次免疫；于首免后7、14、21和28d测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平。结果表明，中剂量的SNH对氟苯尼考引起的雏鸡免疫抑制具有一定的拮抗作用。结论：SNH注射液对雏鸡体液免疫和细胞免疫具有明显的增强功能，并能拮抗某些药物引致的免疫抑制作用。 相似文献
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新鱼腥草素钠对新城疫La Sota疫苗免疫效果的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
将96只非免疫健康三黄肉雏鸡随机分为4组,分别接种新城疫病毒La Sota株弱毒活疫苗,同时将新鱼腥草素钠按照不同的剂量皮下注射;在第二次免疫后的第7、14、21、28天分别测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体、免疫器官指数以及外周血CD4 /CD8 淋巴细胞比值.结果表明,新鱼腥草素钠对提高鸡体抗NDV血凝抑制抗体效价和外周血CD4 /CD8 淋巴细胞比值具有一定作用,且与对照组差异显著(P＜0.05);但不同给药剂量的新鱼腥草素钠影响不同,其中以中等剂量(2 mg/kg)效果最为明显.免疫器官指数的测定表明,新鱼腥草素钠对新城疫疫苗免疫效果的影响不是通过促进免疫器官发育实现的. 相似文献
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畜禽饲养场污水净化处理技术 总被引：1，自引：0，他引：1
畜禽饲养场污水净化处理技术朱善元王涛（江苏省畜牧兽医学校泰州２２５３００）随着人们环保意识的增强，畜禽饲养场污水的净化处理将越来越受到人们的重视。本文从污水净化处理的原理、方法出发，论述了畜禽饲养场污水净化处理的技术，并着重介绍其生物学处理法。１污水... 相似文献
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根据GenBank中已经发表的鸭肠炎病毒(DEV)基因组序列,在抗原性分析的基础上,设计5对引物,以DEV标准强毒株DPV-F37基因组DNA作为模板分别扩增DEV gB基因主要抗原域编码区(328～552 nt、667～1 164 nt和1 519～1 797 nt)和gC基因主要抗原域编码区(67～402 nt和472～837 nt).将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达栽体pGEX-6P1-gB1、pGEX-6P1-gB2、pGEX-6P1-gB3、pGEX-6P1-gC1和pGEX-6P1-g02.将重组表达载体转化至BL21宿主菌,经IPTG诱导,外源基因获得了良好表达,融合蛋白大小分别为35、45、37、38和40ku左右.以兔抗DEV多抗血清进行Western blot分析,抗血清与表达的5种融合蛋白均能发生特异性反应.结果提示所有表达出的目的蛋白均具有与天然蛋白相似的反应原性. 相似文献
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根据血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)SH株3D基因序列设计并合成1对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增3D基因,将其克隆入原核表达载体p ET-32a,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导培养下重组蛋白获得了成功表达。SDS-PAGE显示重组蛋白的分子量约为68 k D,Western blot分析显示该重组蛋白能与多聚组氨酸标签单抗发生特异性反应。将切胶后纯化的目的蛋白免疫ICR小鼠,制备针对重组蛋白的多抗血清,Western blot结果显示制备的抗血清能够与DHAV-1感染的SPF鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应。以上结果表明,3D基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的多抗血清可以用于3D蛋白的检测,为3D蛋白的功能研究奠定了基础。 相似文献
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运用大肠杆菌Red同源重组系统,对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)DE02株的ibeA基因进行了缺失,其结果为揭示IbeA的功能奠定了基础.通过对APEC ibeA基因缺失株与人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)的黏附与侵袭,发现ibeA基因缺失后与HBMECs的黏附率为45%,侵袭率为1.2%,相对于野生型APEC均显著降低;提示ibeA基因是APEC的重要致病因子. 相似文献
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建立了检测田七花总皂苷中三七皂苷R1含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。用BDS HYPERSUL C18(150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 m L/min,柱温30℃;质谱分析采用三重四杆质谱仪,多反应检测(MRM)模式,电喷雾离子源(ESI)负离子检测,定量分析的离子为:三七皂苷R1m/z 931.7→799.6,内标物紫杉醇m/z 852.5→525.3。三七皂苷R1标准曲线的线性范围为0.0476~11.9μg/m L,平均加样回收率为99.33%,RSD为1.65%(n=6)。精密度、稳定性、重现性均符合样品分析的要求。 相似文献
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CpG-ODN增强表达犬瘟热病毒H蛋白重组质粒免疫效果的分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为提高犬瘟热病毒（caninedistempervirus,CDV）重组质粒的免疫应答水平,合成4条CpG-寡脱氧核苷酸（CpG—oligodeoxynueleotides,CpG-ODN）;通过体外淋巴细胞增殖试验确定1条刺激活性最显著的CpG-ODN,序列为5＇-TCGTcGTTTTGTCGTTTTGTcGTT-3’。将30只缝康毕格犬随机均分为2大组,每大组再分为5小组,分别以不同的剂量肌肉注射CDV附着蛋白（H）重组质粒pcDNA—H和选定的CpG-ODN。在免疫后的第2、4、6周分别测定各组动物的抗CDV中和抗体和γ-干扰素水平。结果表明选定的CpG-ODN对提高抗CDV中和抗体效价和干扰素水平具有一定作用,且与对照组差异显著（P〈0．05）;但不同剂量的质粒pcDNA—H和CpG-ODN的效果不同,其中以30μg／只的CpG-ODN和50ug／只的pcDNA—H的剂量组合效果最佳。以选定剂量的CpG-ODN和pcDNA—H免疫5只健康毕格犬,同时以质粒pcDNA—H与生理盐水作为对照;4周后所有动物均接种CDV组织匀浆毒。结果发现试验组动物均未出现犬瘟热临床症状,且攻毒后第3周CDV检测为阴性,而peDNA—H对照组和生理盐水对照组动物的CDV检测阳性率为2／5和5／5;这表明CpG能够明显促进重组质粒pcDNA—H的免疫保护作用。 相似文献
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为制备鼠抗鸭瘟病毒(DPV)UL6基因的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出UL6基因,连接原核表达载体p ET-32a(+),构建表达质粒p ET-UL6,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃经1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,将目的蛋白免疫Balb/c小鼠,利用ELISA方法检测特异性抗体效价。结果显示,构建的原核表达质粒经IPTG诱导能正确表达,且表达的重组蛋白能与DPV阳性血清反应,制备的多克隆抗体效价可达1∶16 000。表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性,可以用于UL6基因的表达检测。 相似文献
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为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽(bTAP)的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9 K-b TAP.用Sal Ⅰ酶切线性化pPIC9 K-b TAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达.SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果. 相似文献